酵母双杂交技术原理和步骤

酵母双杂交法的原理：

典型的真核生物转录因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域： DNA结合结构域和转录激活结构域

前者可识别DNA上的特异序列， 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游， 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用， 启动它所调节的基因的转录。

步骤：

1. 阳性克隆的筛选

2. 用质粒自然分选法筛除只含有AD-文库杂合子的克隆

3. 酵母杂合试验确定真阳性克隆

4. 阳性克隆的进一步筛选和确证

5. 对双杂交系统阳性结果的进一步研究