SLM是什么

SLM是什么,第1张

SLM,从实践中走出的理论
一、服务水平管理的由来
服务水平管理(Service leve Management,简称SLM)是20世纪90年代末,随着信息技术对社会生产、消费的推动而诞生的新名词。不可否认,信息技术的高速发展给今日的商业环境带来了巨大的变革,信息技术的应用提高了企业的竞争力,而企业对信息技术越来越深的依赖又极大地促进了IT的发展,技术不断升级,系统不断革新,IT所扮演的角色举足轻重。
但是,IT在企业的发展中并不仅是发挥推动器的功能,很多时候,它也是阻碍企业革新和盈利的重要因素。原因有二,一是IT的投入大;二是IT的升级快。这两个因素导致企业在IT投入上越来越谨慎思量,一个是考虑成本,一个是考虑产出企业较之个人有更多的理性,因此也带来了更多的管理和控制方法,SLM作为IT服务管理的一部分被呼之而出。
二、服务水平管理的概念
SLM是一种严格的超前方法论和处理程序,用来保证在有效的资金利用率下,能够向所有的IT用户传递足够级别的服务,以确保业务能够得到相应的优先权来优先处理。SLM可使IT部门根据“购买”服务的业务部门对不同的服务类型、成本和服务水平的要求,来提供面向业务和企业范围的服务。SLM需要IT机构充分了解它所能提供的各种服务,以及相关的优先权和业务重要程度。
因此,SLM从IT用户角度被定义为:企业在可以接受的成本条件下,就IT服务的质量所做出的包括谈判、定义、评估、管理、改进等在内的一系列管理活动。这一系列活动同时也是一个动态循环的过程,使SLM在实施过程中使服务质量螺旋上升,我们将这些活动用一张图表示出来(如图1所示)。
图1 SLM的管理过程
本文将围绕SLM的这一系列管理活动,逐步介绍着个新概念的内容。
三、服务水平管理中的一些概念介绍
目录服务(Service Cataogue):表达客户期望的关键性文档,它应该是公开的,不论是服务提供者还是客户都应该能方便的查阅这些资料,在某些场合下,甚至会有一个专门的内部网站点来完成这项任务。服务目录会利用一些来自质量控制系统的信息和文档,这些质量信息需要进行定期回顾,及时做出相应调整以适应客户或者业务的具体需求。
服务水平协议(Service leve Agreement,简称 SLA):是IT服务提供商与其客户之间的一种书面协议,规定了服务需要达成的主要目标和双方具体的责任,是有效的衡量考核工具。由于SLM是在所制定的SLA基础上展开活动,因此SLA是影响SML的一个关键因素。SLA需要建立在双方互相理解,互相同意的基础上,通过协商形成对一些目标和责任的共识,保证协议的合理性和公正性。SLA是顾客和SLM开展之间的桥梁,在制定过程中,将会形成覆盖所有服务的细节信息,并记录在案,可根据所提供的服务规模和复杂程度生成一个或多个SLA文件。SLA中所包含的信息大致上包括:
l 服务概述和业务关键流程描述
l 有效期限和SLA变更控制机制
l 授权协议的细节信息
l 双方沟通的渠道、方式以及回顾汇报形式的描述
l 服务时间、服务进度计划
l 客户的责任
l 服务提供商的责任和义务
l 高管理层面的财务信息,比如说相关费用的记账方式
l 术语表
l 服务要达到的目标,比如响应时间、可靠性和可用性等
l “意外”的定义以及故障的恢复
同时SLA并非一成不变,而是能够随需要不断调整,这种灵活性才能够保证SLM的实施中获得成功。
*** 作级别协议(Operation Leve Agreement,简称OLA):用来支持SLA中的服务水平级别的实现。OLA是后台的协议,它定义的服务内容可能与客户不发生直接关系,但却是实现SLA所必不可少的。也就是说,OLA定义的内容更加接近具体 *** 作而客户所看到的则是这些 *** 作的结果。因此OLA的制定是SLA的前提和参考,一般是IT服务提供方在谈判之前预先所具备的服务文档内容。
支持合同(Underpinning Contract,简称UC):指公司与外部服务供应商之间签订的有关服务实施的正式合同。如果IT服务不是内部部门提供,而是外部服务提供者,这一环节则相当重要,因为SLA只是内部协议,不具法律效力,而UC则一定是和外部组织签订的合同,是正规的具备法律效力的。而UC从内容上看,主要是依据SLA的内容加上法律条文中的责任、权利和义务构成。
服务章程(Service Charters):用来描述组织所提供的服务,明确组织的义务,被视作是提高客户满意度,保持和吸引客户的一种手段。有些服务章程是非正式的,而且对服务要求只进行定性而不是定量的规定,但是在大部分情况下,它和SLA异曲同工,在SLM管理流程中经常发挥着相同的作用。不过,就算公司有意认真制定服务章程,我们还是认为其在SLM的运用不是十分合适,效果不及SLA。理想的处理方法是将服务章程用来从较高的层次、较为宏观地描述服务,作为服务目录和SLA的先导,而具体的服务还是由SLA来规范较为妥当。
四、服务水平管理的实施
在SLM实施过程中,主要有监控、汇报、回顾三方面内容。SLM的实施需要借助于各种工具,例如管理系统、程序日志文件、性能管理程序,在目前市场上的SLM产品中都提供了这些常用工具,一般SLM的产品都应用于相应的解决方案,因此一般可以通过采用产品提供商的配套解决方案实施SLM工具。
工具的实施只是SLM实施中的一部分,在有了工具之后,还需要建立报告机制,报告机制包括由谁产生报告、在哪儿产生报告、何时产生报告、报告提交给谁、如何进行提交等内容。报告机制决定了服务水平监控结果能够及时有效的被收集、汇总、分析,并对异常及时作出反应,将可能的错误和灾难造成的损失减小到最低。
成功的实施SLM还需要保证良好的业务交流,IT部门和业务部门之间的不间断交流,可以使一个得当的服务水平协议能为IT部门提供讨论工程目标、责任的信息,业务流程的问题也就能够方便的理解。就业务经理看来,服务管理将IT部门和业务联系在了一起,提升了IT部门的可信度和价值。从而保证了业务部门对SLM实施的积极性,降低了SLM实施的风险。
五、服务水平管理的收益
最后我们总结一下实施服务水平管理可能带来的收益:
第一,客户满意度的提高。实施SLM最主要的原因是满足客户的需要。实施SLM首先要在IT管理者和他们的客户之间建立一个对话途径,这就需要IT必须了解客户到底需要哪些服务,同样,那些客户也必须阐明他们的需要或者是希望得到哪些服务。当IT部门和客户之间达成某种共识之后,那么也就建立了一个衡量IT性能的标准,企业也有了明确的目标以满足客户的需要。
第二,能够实现客户期望管理。能够避免所谓的期望蔓延,也就是客户所未成文要求的服务。对于人们来说,对现状提出更高要求是很正常的。SLA一旦制订,协议将成为文档。虽然用户会不断地提出更高的服务要求,但是协议只能在所规定的范围内发挥作用。SLM中先前所规定的承担的义务可以进行变更,但是每次变更都需要重新进行协商。
第三,对有限资源的适当调节。SLM提供了一种机制来管理IT的资源。在某些机构里面,一个强有力的用户小组有时会需要大量占用资源的应用的支持。适当地利用SLA,资源就不会被超常占用。SLA还有助于避免当太多的应用程序堵塞网络、服务器时产生的拥挤问题。因为SA指定了服务水平,所以它能够充当现行系统容量和网络所需带宽的指示器。
第四,满足了IT服务的内在需要。SLM被正确使用,不但有助于IT部门有效配置资源,而且会成为一个强大的市场工具。为了保证响应时间和可用性,SLA提供一条有效的途径来告诉那些内在的客户,IT部门的工作是多么关键。在实施SLA以前,许多部门只有在问题出现时才和IT部门取得联系,这种情况说明他们未把IT部门放到一个很重要的位置,这导致一旦系统出现问题,IT就成为罪魁祸首和客户抱怨的对象。为了改善这种状况,SLM把IT部门相对独立出来,并且把它放到了与其他部门同等重要的位置。
第五,控制了IT投入的成本。SLM有助于IT更好的对其服务水平做出正确的决定。如果没有针对客户的服务水平目标,IT只能盲目地去猜想,而这些主观的想法往往导致资源的浪费,如大量雇用职员、配置大容量的网络、大批购买处理速度更快的微机等。SLM还能够通过调整用户对更高服务水平的需求而对成本产生影响,限制用户需求的膨胀。同样,更高级别的服务所带来的成本冲击也是应该阐明的。在某些场合下,公司必须考虑提供更高水平服务所需要的附加成本。
第六,使IT部门更加有效的履行服务承诺。只要把SLM恰当使用,无论是用户、IT部门、还是与他们相关的公司都会从中受益。SLM能够调整用户需求和高水平服务之间的关系;反过来说,SLM能够督促IT部门必须提供承诺的义务,为用户提供目标明确的服务。
趋势展望
SLM目前尚在发展之中,出生于IT领域,和借助于IT技术的身世,使其必将在未来的发展中有着广阔的前景。对于服务业而言,由于服务的无形、易逝、无法保存等特性,在服务水平和服务质量管理方面始终没有形成完善的质量管理体系,而SML所形成的一套规范和标准,恰恰从IT服务的角度出发,对这些特性有了较好的把握,很有可能被引入到服务业领域中,成为通用的服务水平管理方法。

外汇字母缩写都是指哪种货币?

常用货币程式码
美元 USD 新加坡元 SGD
欧元 EUR 荷兰盾 NLG
日元 JPY 芬兰马克 FIM
英镑 GBP 泰国铢 THB
瑞士法郎 CHF 瑞典克朗 SEK
澳大利亚元 AUD 丹麦克朗 DKK
纽西兰元 NZD 挪威克朗 NOK
加拿大元 CAD 奥地利先令 ATS
港币 HKD 菲律宾比索 PHP
法国法郎 FRF 西班牙比塞塔 ESP
义大利里拉 ITL 澳门元 MOP
比利时法郎 BEF 德国马克 DEM

字母缩写

1.BC——British Columbia加拿大卑诗省的英文名,也称“英属哥伦比亚”省或“不列颠哥伦比亚”省
2.BCSIP——British Columbia Settlement and Integration Program卑诗省新移民安置及融入计划
3.CPP——Canada Pension Plan加拿大退休金计划
4.CIC——Citizenship and Immigration Canada加拿大公民及移民部
5.CPR——Canadian Pacific Railway加拿大太平洋铁路
6.EI——Employment Insurance就业保险
7.ESL——English as a Second Language英语作为第二语言
8.GIC——Guaranteed Investment Certificate保证投资回报存款证
9.GST——Goods and Services Tax货品服务税
10.ICBC——Insurance Corporation of British Columbia卑诗省汽车保险公司
11.ID——Identification身份z明档案
12.IFH——Interim Federal Health联邦 临时医疗纸
13.MSP——Medical Services Plan医疗保健计划
14.OLA——Open Learning Agency公开成人教育中心
15.PST——Provincial Sales Tax省销售税
16.RCMP——Royal Canadian Mounted Police加拿大皇家骑警
17.RRSP——Registered Retirement Savings Plan注册退休储蓄计划
18.WCB——Worker's Compensation Board工人赔偿局
19.YMCA——Young Men's Christian Association基督教男青年会
20.YWCA——Young Women's Christian Association基督教女青年会
(以上缩写的发音是逐个英文字母念)
(以下缩写的发音是将缩写字母拼读)
21.CANN——Community Airport Newer's Neork新移民社群适应及机场接待处
22.ICES——International Credential Evaluation Service国际文凭稽核服务处
23.SAFER——Shelter Aid For Elderly Renters为老年租户提供租金援助计划
24.SIN——Social Insurance Number社会保险卡
星期
星期一:MONDAY=MON 星期二:TUESDAY=TUS
星期三:WENSEDAY=WEN 星期四:THURSDAY=THUR
星期五:FRIDAY=FRI 星期六:SATURDAY=SAT
星期天:SUNDAY=SUN
月份
一月份=JAN 二月份=FEB
三月份=MAR 四月份=APR
五月份=MAY 六月份=JUN
七月份=JUL 八月份=AUG
九月份=SEP 十月份=OCT
十一月份=NOV 十二月份=DEC
常用词
4=FOR 到永远=FOREVER
2=TO RTN=RETURN(送回)
BT=BLOOD TYPE(血型) PLS=PLEASE(请)
BD=BIRTHDAY(生日) REWARD=酬谢
REWARD 4 RETURN=送回有酬谢 ALLRG=过敏
军事术语
USMC=海军陆战队 NAVY=海军
AF=AIR FORCE(空军) ARMY=陆军
宗教类
C=CHRISTIANISM(基督教) J=JUDAISM(犹太教)
C=CATHOLICISM(天主教) B=BUDDHISM(佛教)
I=ISLAM(伊斯兰教) NR=NO REFERENCE(没有宗教信仰)
星座
水瓶座: AQUARIUS(1月21日 - 2月19日)
双鱼座: PISCES(2月20日 - 3月20日 )
白羊座: ARIES (3月21日 - 4月20日 )
金牛座: TAURUS(4月21日 - 5月21日)
双子座: GEMINI(5月22日 - 6月21日 )
巨蟹座: CANCER(6月22日 - 7月23日 )
狮子座: LEO(7月24日 - 8月23日)
处女座: VIRGO(8月24日 - 9月23日 )
天秤座: LIBRA (9月24日 - 10月23日 )
天蝎座: SCORPIUS(10月24日 - 11月22日 )
人马座: SAGITTARIUS(11月23日 - 12月21日 )
山羊座: CAPRICORNUS (12月22日 - 1月20日 )
1 国际性或全美性:
UNESCO (United Nations Educational, Scientific and Cultural anization)联合国教育科学文化组织(也叫国际文教组织)
例如: (The)UNESCO has made some contributions to the world(UNESCO 对世界做出一些贡献)
NATO(North Atlantic Treaty anization)北大西洋公约组织。
例如:Could(the)NATO members stick to their mitments?(NATO 的成员能坚守承担义务吗?)
SALT(Strategic Arms Limitation Treaty)战略武器限制公约
例如:Should every nation join(the)SALT?(每个国家都要加入 SALT?)
NASA(National Aeronautics and Space Administration)美国航天太空总署
例句:The US space programs depend on the performances of NASA(美国的太空计画是靠NASA的表现而定。)
(注:以上缩写字也被人们当做一个字看待)
WHO(World Health anization)世界卫生组织
例句:Taiwan has been trying to bee one of the WHO members(台湾一直想办法成为WHO的成员之一)
FBI(Federal Bureau of Investigation)联邦调查局(负责美国境内)
CIA(Central Intelligence Agency)中央情报局(负责国外)
例句:Over the past years, Dr and Mrs Lee have worked for both FBI and CIA(过去多年来李博士夫妇都为 FBI 和 CIA 工作)
FDA(Food and Drug Administration)美国食品药物管理局
例句:This new drug has to be approved by the FDA(这新药要经 FDA 批准)
USDA(United States Department of Agriculture)美国农业部
例句:USDA supplies myriad of information on agriculture market(有关农业市场,USDA 供应大量资料。)
IRS(Internal Revenue Service)美国税务局
例句:Employees working for IRS should be courteous toward tax payers(IRS 员工对纳税人应该有礼貌)
NAACP(National Association for the Advancement of Color People)(全国黑人权益促进会,即黑人为了增进权益的最大机构)
例句:Many African-Americans join NAACP(许多美国黑人参加 NAACP)
NIH(National Institute of Health)
例句:Mr Wang has worked at NIH as a researcher(王先生在 NIH 担任研究员)
AARP (American Association of Retired People)(美国退休人员协会)
例句:At age 50, you are eligible to be a member of AARP(如果你 50 岁就可以成为 AARP 的会员)
AAUP (American Association of University Professors) (美国大学教授协会)
例句:The AAUP has many branches at different colleges and universities in the US (AAUP 在美国各大学有很多分会)
SCORE (Services Corps of Retired Executives)(退休主管服务队)(这是美国企业界主管退休后,免费担任顾问,协助年轻人创业的团体。)
(注意:corps 单复数一样,发音与 corpse 不同,要小心。)
(注:老外在机构名称缩写字前面,有时加冠词 the, a ,an,有时不加,不过在正式档案里,通常都加。)
2 一般考试名称:
SAT (Scholastic Aptitude Test) 学术能力倾向测验 (就是美国为高中生想进大学而设的考试)
例句:The well-known universities aept new students based on SAT scores and well-rounded personalities (名大学接受新生根据 SAT 成绩及各方面优良的品德)
GPA (Grade Point Average)(学业成绩总平均)
例句:His GPA always stands on the of his class (他的 GPA 都是全班第一)
GED (General Equivalent Diploma); 一般同等文凭(高中没有毕业的学生,如果参加 GED,及格后,就可取得高中毕业z书)
例句:If he passes GED test, he will earn a high school diploma
AP (advanced placement) 在校高中生,如果选修 AP 课程,考试及格,将来进大学时,可不必再修。
例句:His son took some AP courses at high school
GMAT (Graduate Management Admission Test) 美国为攻读企管硕士 (MBA) 学生而设的入学考试
例句:In order to enter a MBA program, you need a high score on GMAT
LSAT (Law School Admission Test) 美国为攻读法律学生而设的入学考试
例句:He did very well in his LSAT (他的 LSAT 考得不错)
MCAT (Medical College Admission Test) 美国为进入医学院学生而设的考试
例句:Do you think he will do well in his MCAT
GRE (Graduate Record Exam) 这是美国大学研究所对一般研究生的入学考试
例句:Most American graduate schools require GRE scores(多半美国研究所需要 GRE 成绩)
TOEFL (Test of English as a Foreign Language) 外国学生想进美国大学的英语能力考试(即所谓:「托福」考试)
例句:Almost all Chinese college graduates are required to take TOEFL if they e to the US for advanced degrees (几乎所有的中国大学毕业生都要参加 TOEFL,假如他们要到美国取得高学位的话。)
CLEP(College Level Exam Program) 任何人只要有学识专长,都可参加这种考试,一旦及格,就可取得大学的学分。
例句:As long as you pass CLEP, You may earn college credits(只要你通过 CLEP,就能获得大学学分。)
(注:老外一般所谓「大学」只说 College,不说 University)
ESOL(English for Speakers of Other Languages) 这是美国为新来移民或外国学生所设的特别英语课程。也叫 ESL(English as a Second Language)
例句:Many American campuses offer ESOL courses for foreign students(许多美国校园为外国学生开设 ESOL 课程)
3 一般生活方面:
EOE (Equal Opportunity Employer) 这是美国各机构招考员工时向申请工作者表明自己是「平等机会雇主」。
例句:All African-Americans hope that their employments will be based on EOE(所有美国黑人都希望他们的工作机会均等)
DOQ (Depending on Qualifications) 根据申请工作者的资历决定是否雇用。
例句:The DOQ policy is being used by our school in hiring new teachers (聘请新教师时,本校采用 DOQ 政策。)
PR (Public Relation) 公共关系
例句:The college president wants to improve its PR with the munity(大学校长想与社群增进公共关系)
CEO (Chief Executive Officer) 最高行政执行长 (多半指企业界或公司)
例句:The CEO of this pany will resign because of poor health (这公司的 CEO 因为身体不好而辞职)
CPA (Certified Public Aountant) 美国有执照的会计师
例句:Do you have a CPA to prepare your ine tax(你有 CPA 为你报税吗?)
COLA (Cost of Living Adjustment) 生活费用的调整(即加薪时是按生活指数而定)
例句:Our annual pay raise will be based on COLA
STD (Sexually Tran itted Disease) = VD = Venereal Disease 性病(现在 STD 较常用)
例句:Many teen-agers face STD problems(许多青少年面临 STD 问题)
SOA (Sexually oriented Advertisement) 有关性方面的广告
例句:Don\'t you feel we have too much SOA in the media(你不认为在媒体上有太多的 SOA 吗?)
GOP (Grand Old Party) 美国共和党另一称呼 = Republican Party
例句:The GOP has nominated Mr Bush as its Presidential candidate(GOP 已提名 Bush 先生为总统候选人)
PMS (Pre-menstrual Syndrome) 这是女人在月经前不舒服或心情不好所常用的缩写字
例句:Don\'t bother her; she has PMS
ADHD (Attention Deficit Hyperactivity Disorder) 指青少年不能集中注意力,静不下来的一种病症。
例句:Tens of thousands of youngsters are suffering from ADHD in the US (在美国成千上万的青少年有 ADHD 的毛病)
RSVP (Respondez sil vous plait) 这是法文,通常在请帖上使用的「敬请回音」= Please reply(或 respond)
例句:There is“RSVP”on the invitation card
BYOB (bring your own bottle) 老外请客时,为了减少负担或个人爱好酒的品种,在请帖上注明「请自己带酒」。
例句:Whenever he invites guests, he asks “BYOB”。 (他只要请客,就要人家自己带酒。)
AIDS (Acquired Immune Deficiency Sydrome) 爱滋病
例句:AIDS has spread all over the world
CPR (Cardiopulmonary resuscitation) 心脏病急救法
例句:Everyone should learn how to do CPR
EKG (Electrocardiography) 心电图检查 (不是 ECG)
例句:Her physician asks her to have an EKG next week (医生要她下周做 EKG)
IV (intravenous injection) 为病人注射的点滴
例句:In the hospital emergency room, I saw a patient with an IV on his arm (在医院大的急诊病房里,我看见一个病人在打点滴)
ST 股票前“ST”是特别处理的英文“special treatment”的缩写
FAQ Frequently Asked Questions 的简写。常问问题的问答集。
World Wide Web的缩写,也有人戏称为World Wide Wait。
edu education 教育
IP (Inter Protocol) 网际协议
ISP 网路服务提供者
ISO 国际标准化组织(ISO,International Organization for Stan-dardization缩写)。
IT 是指资讯科技,即英文Information Technology 的缩写
EC Electronic Commerce 或 E-merce电子商务 源于英文
Biz business 经济缩写
Com merce 商务缩写
Info infomation 资讯缩写
Cn China 中国缩写
OK okay 好的
VC Venture Capital 风险资金
BBS Bulletin Board System 电子公告版
Dns DomainNameSystem 域名系统
Vip Very Important Person 贵宾
Nic NETWORK INFORMATION CENTER 网路资讯中心
URL Uniform Resource Location 统一资源定位符
BT 是一种P2P共享软体,全名叫"BitTorrent",中文全称:"位元流"又名"变态下载"
DIY 是每个电脑爱好者熟悉的新名词,是英文Do It Yourself的首字母缩写,自己动手制作的意思,硬体爱好者也被俗称DIYer
OEM 是英文Original Equipment Manufacturer的缩写,意思是原装置制造商。
XP 是英文Experience(体验)的缩写, 自从微软释出Office XP后,成为软体流行命名概念
ID 是英文IDentity的缩写,ID是身份标识号码的意思
MSN 即MICROSOFT NETWORK, 是微软公司的一个门户站点 MSN作为网际网路上最受欢迎的一个门户, 具备了为使用者提供了线上调查、浏览和购买各种产品和服务的能力
DJ 是DISCO JOCIKEY(唱片骑士)的英文缩写,以DISCO为主,DJ这两个字现在已经代表了最新、最劲、最毒、最HIGH的Muis
CEO (Chief Executive Officer),即执行长,源自美国20世纪60年代进行公司治理结构改革创新时
CS 是非常流行的网路游戏,中文名是反恐精英。
SOHO 是SMALLOFFICEHOMEOFFICER的简称,意思是“在家办公”。
FTP 是英文File Transfer Protocol的缩写,即文字传输协议

DC 是哪二字母缩写

DC(Detective Comics )漫画公司;
DC 直流电(direct current);
DC 哥伦比亚特区(District of Columbia);
有很多说法。

字母缩写含义

CP : Cerebral Palsy
中文全称:脑性麻痹,痉挛性两侧麻痹
CP : Command Post
中文全称:n <美>[军]战地指挥所
CP : Copilot
中文全称:n 副驾驶员
CP : Candle Power
中文全称:烛光
CP : Content Provider
中文全称:内容提供商
CP : Control Point
中文全称:控制点,检查点
CP : Central Processor 中央处理器
CP : Creatine Phosphate 磷酸肌酸
CP : Crude Protein 粗蛋白
CP : Cellulose Propionate 丙酸纤维素
CP : Centipoise 厘泊
CP : Communist Party
CP : Center of Pressure 压力中心
CP : Control Program 控制程式
CP : Command Processor 命令处理器
CP : Control Panel 控制盘
CP : Control Period 控制周期
CP : Chicken Pox 水痘
CP : Circular Polarization 圆极化

银行字母缩写

中国建设银行 ——CBC(Construction Bank of China)——“存不存?”
中国银行 ——BC(Bank of China)——“不存。”
中国农业银行 ——ABC(Agriculture Bankof China)——“啊,不存”
中国工商银行 ——ICBC(Industryand Commercial Bank of China)——“爱存不存”
民生银行 ——CMSB(China minsheng Bank)——“存吗?”
招商银行 ——CMBC(China Merchants Bank)——“存吗?!”
兴业银行 ——CYB——“存一百”
国家开发银行 ——CDB(china Development Bank)——存点吧!”
北京市商业银行—BCCB(beijing City Commercial Bank)——白存存不?”
汇丰银行 ——(HSBC)还是不存”

用字母缩写呢?

正规英文书面表达的话,还是说o hundred and seven,非正式的表达用o o seven,别人也能懂。

终老 字母缩写

你好,“终老”字母缩写是:zl
-------------供参考,希望帮到你,。

SR是哪种货币的缩写

苏利南元(Suriname dollar, SRD) 时区 UTC -3 国际网域缩写 SR 苏利南共和国(荷文:Republiek Suriname)是一南美洲国家,位于南美大陆北岸,北滨大西洋,南临苏利南共和国,东边与西边的国界分别为法属盖亚那与盖亚那包围。苏利南旧称荷属盖亚那,是荷兰王国在南美洲的殖民遗迹,1954年时成为荷兰的一个海外自治省,1975年时独立,相对于大部分都是使用西班牙文的周遭南美洲国家,苏利南是少数以荷兰文作为官方语言的国家之一。首都帕拉马里博(Paramaribo)是一位于苏里南河河口的商港。 官方语言 荷兰文 首都 帕拉马里博(Paramaribo) 土地面积 163,270 km2 总人口 433,998(2001年) 货币

字母缩写是dc的明星

字母缩写是dc的明星,比较有名的是邓超。
邓超,1979年生于江西南昌,中国男演员、导演、投资出品人、公司创始人、网际网路投资。1995年考上江西艺术职业学院话剧班,1998年考入中央戏剧学院表演系本科班,毕业后编入中国国家话剧院,并落户北京。
2000年起拍摄电视剧,2006年起主攻,主演《集结号》饰演赵二斗,获百花奖最佳男配角奖;2007年主演《李米的猜想》获中国表演艺术学会奖;2009年主演徐克武侠片《狄仁杰之通天帝国》饰演裴东来,获提名香港金像奖;2010年-2013年,主演陈嘉上古装片《画壁》和《四大名捕》三部曲的票房连续破亿;2012年主演陈可辛《中国合伙人》饰演孟晓骏口碑不俗;2013年成立邓超,组建公司投资发展及话剧事业。2014年导演并投资主演喜剧片《分手大师》;10月起领衔主持中韩节目《奔跑吧兄弟》第一至第三季;又主演《烈日灼心》、《美人鱼》。2015年凭主演曹保平《烈日灼心》饰演辛小丰,获上海国际节“金爵奖”最佳男演员奖。2016年主演喜剧片《美人鱼》票房339亿元,同年主演爱情片《从你的全世界路过》票房813亿元,主演悬疑片《心理罪之城市之光》及剧情片《乘风破浪》。2016年5月,凭借《烈日灼心》获得第33届大众百花奖最佳男主角提名。

年字用字母缩写是哪个字母

拼 音
nián
详细解释
地球绕太阳一周的时间:一~。三~五载。
每年的:~会。~鉴。~利。~薪。
一年的开始:~节。新~。
有关年节的(用品):~画。~礼。~货。
时期,时代:近~。~华。~号(a.帝王用的纪年名称;b.公元纪年名称)。~限。~深日久。
收成:~成。~景。~谨。荒~。
岁数:~纪。~事(岁数)。~高。~轮。
人一生所经年岁的分期:幼~。童~。青~。壮~。中~。老~。
科举时代同年考中者的互称:~兄。~谊(同年登科的关系)。
姓。

----------------------DNA芯片技术与SNP分析--------------------------
摘要: 基因芯片技术作为一种新兴的生物技术,近年来得到迅速发展,其应用具有巨大的潜力。单核苷酸多态性(SNP) 作为新的遗传标记对基因定位及相关疾病研究的意义亦非常重大。本文主要介绍了DNA 芯片技术的原理和分类、单核苷酸多态性检测方法及DNA 芯片技术在单核苷酸多态性检测方面的应用。
生物芯片技术是90 年代初发展起来的,集分子生物学、微电子技术、高分子化学合成技术和计算机科学等于一身的一门新型技术。目前发展的生物芯片种类繁多, 如蛋白质芯片、基因芯片、激素芯片、药物芯片等。但最初的生物芯片主要用于对DNA 的测序, 基因表达谱的鉴定及基因突变体的检测、分析等方面[1 ] 。迄今为止, 使用最多的也是DNA 芯片。DNA 水平遗传多态性标记至今已经历了3 个阶段:限制性酶切片段长度多态性标记(RFLP) 、DNA 重复序列的多态性标记(包括小卫星、微卫星DNA 重复序列) 、单核苷酸多态性标记( single nucleotide polymorphisms , SNPs) [2 ] 。
SNP 具有数量多,分布广泛,易于快速、规模化筛查,便于基因分型等特点。伴随着SNP 检测和分析技术的进一步发展,尤其是与DNA 芯片等技术的结合, SNPs 在基因定位中具有巨大优势和潜力, 并为DNA芯片应用于遗传作图提供了基础。由于基因芯片具有携带信息量大和检测方便的特点,使得用DNA 芯片对SNP 进行分析具有广阔的前景。DNA 芯片和SNP 分析已日益成为研究功能基因组学的工具。
1 基因芯片
基因芯片的基本原理是应用已知的核苷酸序列作为探针与标记的靶核苷酸序列进行杂交,通过对信号的检测进行定性与定量分析。基因芯片可在一微小的基片(硅片、玻片等) 表面集成大量的分子识别探针,能够在同一时间内平行分析大量基因,进行大信息量的检测分析[3 ] 。基因芯片应用很广, 根据所用探针类型不同分为cDNA 微阵列(或cDNA微阵列芯片) 和寡核苷酸阵列(或芯片) ,根据应用领域不同而制备的专用芯片如毒理学芯片(toxchip) 、病毒检测芯片(如肝炎病毒检测芯片) 、p53 基因检测芯片等。根据其作用可分为检测基因质和量的芯片。量的检测包括:检测mRNA 水平、病原体的有无及比较基因组基因的拷贝数,既可用寡核苷酸芯片,又可用cDNA 芯片完成,但cDNA 芯片更具优势。质的检测包括:DNA 测序及再测序、基因突变和SNP 检测等,主要用寡核苷酸芯片完成。
2 SNP
单核苷酸多态性(SNP) 是指在基因组上单个核苷酸的变异,包括置换、颠换、缺失和插入。从理论上来看每一个SNP 位点都可以有4 种不同的变异形式,但实际上发生的只有两种,即转换和颠换,二者之比为2 :1。SNP 在CG序列上出现最为频繁,而且多是C转换为T ,原因是CG中的C 常为甲基化的,自发地脱氨后即成为胸腺嘧啶。一般而言,SNP 是指变异频率大于1 %的单核苷酸变异。在人类基因组中大概每1000 个碱基就有一个SNP ,人类基因组上的SNP 总量大概是3 ×106 个[4 ] 。
绝大多数疾病的发生与环境因素和遗传因素的综合作用有关,通常认为是在个体具有遗传易感性的基础上,环境有害因素作用而导致疾病。不同群体和个体对疾病的易感性、抵抗性以及其他生物学性状(如对药物的反应性等) 有差别,其遗传学基础是人类基因组DNA 序列的变异性, 其中最常见的是SNP。易感基因的特点是基因的变异本身并不直接导致疾病的发生,而只造成机体患病的潜在危险性增加,一旦外界有害因素介入, 即可导致疾病发生。另外在药物治疗中,易感基因的变异造成药物对机体的疗效和副作用不同。
随着人类基因组计划的进展,人们愈来愈相信基因组中的SNP 有助于解释个体的表型差异、不同群体和个体对疾病,特别是对复杂疾病的易感性以及对各种药物的耐受性和对环境因子的反应。因此, 寻找和研究SNP 已成为人类基因组计划的内容和目标之一[5、6 ] 。
3 SNP 的检测方法
SNP 的分型技术可分为两个时代,一为凝胶时代,二为高通量时代。凝胶时代的主要技术和方法包括限制性酶切片段长度多态性分析(RFLP) 、寡核苷酸连接分析(OLA) 、等位基因特异聚合酶链反应分析(AS2PCR) 、单链构象多态性分析(SSCP) 、变性梯度凝胶电泳分析(DGGE) ,虽然这些技术与高通量时代的技术原理大致一样,但是由于它不能进行自动化,只能进行小规模的SNP 分型测试,所以必然会被淘汰。高通量时代的SNP分型技术按其技术原理可分为:特异位点杂交(ASH) 、特异位点引物延伸(ASPE) 、单碱基延伸(SBCE) 、特异位点切割(ASC) 和特异位点连接(ASL) 5 种方法。此外,采用特殊的质谱法[7 ] 和高效液相层析法也可以大规模、快速检出SNP 或进行SNP 的初筛。近年来已经在晶体上用“光刻法”实现原位合成,直接合成高密度的可控序列寡核苷酸,使DNA 芯片法显示出强大威力,对SNP 的检测可以自动化、批量化[8 ] ,并已在建立SNP 图谱方面投入实际应用。DNA 芯片法有望在片刻之间评价整个人类基因组[9 ] 。
4 基因芯片在SNP 分析方面的应用
41 疾病预防
随着人类基因组计划的逐步发展,人们分析出了许多基因序列,下一步是要分析这些基因的多态性与生物功能和疾病的关系。通过基因芯片检测SNP ,可以确定基因多态性和疾病的关系;在预防医学方面,可使人们尽早地认识自身潜在的疾病,并实施有效的防治措施,从而做到疾病的早期预防。1997年美国提出了环境基因组学计划,目的是要了解环境因素对人类疾病的影响和意义,针对与环境因素发生相互作用的蛋白的编码基因(如DNA 修复机制、氧化2还原反应及病毒受体蛋白等) 来识别其基因组的多样性以及其结构2功能的关系,从而发现与特定环境因子相关的危险人群,制定出相应的具有个体化特点的危险度评价和预防措施。SNP 是在漫长的进化过程中形成的,具有遗传稳定性。
将其与基因芯片技术相结合进行基因分型, 将会产生大量的遗传易感性标志物,使通过基因分析来筛选易感个体、重点保护高危人群成为可能。美研究人员采用高通量微阵列基因分析方法, 对美国15 个医学中心的352 例患冠状动脉疾病者和418 名未患该疾病个体的62个基因进行了评估[10 ] 。在编码血小板凝血酶敏感蛋白的基因上,鉴定出3 种SNPs (TSP-1 ,TSP-2 ,TSP-4) ,携带TSP-4 (杂合子或纯合子) 变异体的个体患心肌梗塞的危险性高达89 %以上; 携带的TSP-2 变异体为纯合子者发生心肌梗塞的危险性大为降低; 携带的TSP21 变异体为杂合子者冠状动脉疾病过早发生的危险性增加9 倍以上。这种可预示危险性增加的遗传学证据的发现对疾病预防来说是一种进步,这些变异体可能成为预测心血管疾病发生的指标之一。
42 临床诊断和个性化治疗
利用基因芯片技术对人类未来疾病作出诊断,具有广阔的前景。Wang 等[11 ] 应用高密度基因芯片对213Mb 人类基因的SNP 进行筛查,确定了3241 个SNPs 位点,显示出大规模鉴定人类基因型的可能。同样,利用基因芯片技术分析感染病毒、细菌基因的多态性,有助于人们了解病毒、细菌的感染发病机制与抗药性机制。例如利用基因芯片检测结核菌核糖体16sRNA 的多态性,可了解结核菌对雷米封和异烟肼的耐药情况。Kozal 等[12 ] 用高密度HIV 寡核苷酸探针芯片对HIV 病株的多态性进行了分析, 观察到HIV21 包膜氨基酸的天然多变性, 对病人临床用药及预后具有重要意义。Kozal等[13 ] 利用芯片技术,对尚未使用蛋白酶抑制剂的HIV 感染病人的HIV21 蛋白酶基因多态性进行研究,并将结果与传统法测序结果相比较,在114 例病人样本中,两者吻合率达98 %。
43 药物开发与合理用药
目前兴起的药物基因组学(pharmacogenomics) 主要研究遗传因素对药物作用的影响和不同基因型个体对药物反应的差异[14 ] , 从而为临床有针对性地合理用药和根据不同基因型群体对药物的反应来改进药物设计提供了理论依据。而SNP 是药物基因组学的分子基础[15 ] ,这是当前制药行业对SNPs 制图和发展大量检出SNPs 方法表现出空前兴趣的原因。例如,影响药物体内效应的一个重要因素是肝脏的代谢酶系统,而造成酶功能差异的则是决定其结构及功能的DNA 序列。如果将与药物代谢有关的主要酶系统的DNA 制成基因芯片,便可迅速确定病人之间肝代谢酶的遗传学差异。
近来很多基因分析技术已应用于遗传药理学研究,但如果要同时快速分析多个病人的多个基因以确定其用药方案,则利用基因芯片技术筛选出相关SNP 是最佳选择[16 ] 。
5 前景和展望
基因芯片的一个重要发展趋势是芯片制备、样品处理、杂交、检测以及数据分析的标准化,提高基因芯片的准确性和可靠性。从今后大量的基因多态性检测的应用需求,以及基因芯片的标准化和批量化生产角度来看,利用高分辨率在片合成技术制备高密度基因芯片是一个重要的发展趋势[17 ] 。近年来运用的多色荧光标记技术可更直观地比较不同来源样品的基因表达差异,可以大大提高芯片的准确性和检测范围,把不同来源的靶基因用不同激发波长的荧光素标记,并使它们同时与基因芯片杂交,通过比较芯片上不同波长荧光的分布图获得不同样品间差异表达基因的图谱[18 ,19 ] 。例如用不同的荧光素分别标记靶序列及单碱基失配的参考序列, 使它们同时与芯片杂交,通过不同荧光强弱的比较得出靶序列中碱基失配的信息[20 ] 。
迄今能揭示多基因改变与一些疾病如心脏疾患、糖尿病、哮喘及精神分裂等易感性联系的,非SNPs 莫属。使用基因芯片进行SNP分析,具有快速、高效、准确、可产业化等特点,虽然它还处在初始阶段,但已显示出潜在的广阔的应用前景。

什么是复用技术
随着”光进铜退”逐渐成为园区网的技术主流,一方面由于资源受限,制造成本不断增加,光纤链路的铺设费用也在逐年增长,同时对于无线传输媒介来说,有限的可用频率也是非常宝贵的资源。因此,对于通信线路的利用率提升成为了大家关注的重点,多路复用技术应运而生。
多路复用技术就是通过在一条通信线路上传输多路信号,从而提升光通信线路利用率的技术。目前最常用的多路复用技术有波分复用、时分复用、频分复用、码分复用。今天会重点对波分复用和时分复用展开来讲。
二:什么是波分复用技术
21波分复用概念
波分复用(WDM))是一种通过使用不同波长(即颜色)的激光将多个光载波信号复用到一根光纤上的技术,参考图一示意。
波分复用可以实现在一根光纤上双向通信,并实现容量的成倍增长。波分复用技术是基于频分复用技术(FDM),可以将一个信道的带宽按照一定的数值分为多个信道(一般按照20nm为一个单位)。在波分复用网络中,每个信道都被称为一个波长,每个信道以不同的频率和不同的光波长进行信息传输互达。每个波长彼此分离,可以实现天然的物理隔离,k可以有效防止他们互相干扰。
22 波分复用的工作原理
波分复用技术,是将多个不同波长(或频率)的调制光信号(携带有用信息)在发送端经复用器(也叫合波器,Mux)合路到一起送入光线路(光纤传输链路)的同一根光纤中进行传输,在接收端用解复用器(也叫分波器,demux)将不同波长信号分开接收的技术,原理图见下方示意图。一个波分系统包含很多的功能单元,如光转发单元(OTU),用于转发客户侧数据业务到线路侧的光口;光合波单元(OMU)和光分波单元(ODU),分别用于将多个波长光信号合并和分开;以及光功率放大器(OBA),光线路放大器(OLA)和光前置放大器(OPA),分别用于发端,链路,和接收端光信号放大。当然还应该包括光监控信道(OSC),完成业务和链路的监控以便网络管理和维护。
三、什么是时分复用
31 时分复用原理
时分复用(TDM)是采用统一物理连接的不同时段来传输不同的信号,也能达到多路传输的目的。它以时间作为信号分割的参量,必须使各路信号在时间轴上互不重叠。时分复用可以将整个信道传输信息的时间划分成若干时间片,并将这个些不同的时间段分给每个信号源使用,从而保证资源的利用率。
32 时分复用工作原理
正如时分复用的名字一样,时分复用的工作原理就是把时间分成均匀的时间间隙,将各路信号的传输时间分配在不同的时间间隙,以达到互相分开,互不干扰的目的。示意图2是时分复用原理示意图,各路信号经低通滤波器将频带限制在3400Hz以下,然后加到发端快速电子旋转开关(称分配器),开关不断重复地作匀速旋转,每旋转一周的时间等于一个抽样周期T,这样就做到对每一路信号每隔周期T时间抽样一次。由此可见,发端分配器不仅起到抽样的作用,同时还起到复用合路的作用。合路后的抽样信号送到 PCM编码器进行量化和编码,然后将数字信码送往信道。在收端将这些从发送端送来的各路信码依次解码,还原后的PAM信号,由收端分配器旋转开关依次接通每一路信号,重建成话音信号。由此可见收端的分配器起到时分复用的分路作用,所以收端分配器又叫分路门。
这里需要特别注意的是,为保证正常通信,收、发端分配器必须同频同相。同频是指分配器的旋转速度要完全相同,同相指的是发端分配器连接第一路信号时,收端分配器也必须连接第一路,否则收端将收不到本路信号,为此要求收、发双方必须保持严格的同步。
四:波分复用和时分复用的区别
波分复用和时分复用是将多个信号复用到一个载波中的两种方法。多路复用是将多个信号组合成一个信号的过程,这样每个单独的信号都可以在目的地检索。由于多个信号占用信道,它们需要以某种方式共享资源。
41 信道划分标准不同
而两者的主要区别在于它们如何划分信道。波分复用将信道划分为两个或多个不重叠的波长范围,而时分复用则是将整个信道传输信息的时间划分成若干时间片,以时间间隙作为划分的标准。基于这个标准的不同,波分复用每个信号会占用一小部分的带宽和所有的时间,而时分复用则是占用全部的带宽和一部分时间。
42 应用不同
波分复用的信道可以在任何时候进行传输,因此它们的延迟比时分复用要低得多。波分复用(WDM)通常用于延迟是最高优先级的应用程序,例如那些需要实时信息的应用程序。
波分复用具有高传输容量,可以节省光纤资源。对于单波长光纤系统,需要使用一对光纤来接收和发送一个信号,无论等待传输多少个信号,只需要一对光纤。波分复用对各种业务信号都是透明的,能够传输不同种类的信号,然后对其进行复合和分解。波分复用作为一种最佳的扩容方式,可以不使用大量的光纤或高速网络设备,而只通过改变交换机和增加一个波长来引入各种业务或扩容,可以构成高灵活性、高可靠性、高生存性的全光网络。
时分复用(TDM)通过动态地为需要更多带宽的信号分配更多的时间周期,相应减少不需要带宽的信号的占用时间,提供了更大的灵活性和效率。而波分复用缺乏这种灵活性,因为它不能动态地改变所分配波长的宽度。所以时分复用大多用在高传输容量,高速传输这种场景中。时分复用作为一种有效的光复用方式,可以充分利用频谱资源,大大提高频谱带宽的利用率。与波分复用不同,时分复用不受光纤非线性效应的限制,有效地利用了光波长,可以在不同距离、不同容量的网络中工作。
五:总结
波分复用(WDM)作为一种成熟的大容量光传输技术,它具有透明性、可重构性和良好的网络生存性等优点。已经在网络中得到了广泛的应用。在锐捷网络最新的以太全光网2X方案中,就创新型的将彩光复用与以太充分融合,不仅实现了汇聚层彻底无源,弱电间0运维,同时还大大提升了光纤的传输效率和高扩展性,大大节省了链路铺设成本,保护用户投资。未来的波分复用光网络将朝着基于光波长路由和交换的灵活组网方向发展,具有快速恢复和重构网络的能力,在未来的光传输网络中将发挥主要作用。
时分复用(TDM)作为一种非常有效的复用技术,可以充分利用频谱资源,消除由于非线性效应对WDM系统的一些限制。近年来,时分复用在研究领域取得了很大的进展,但还不够成熟。简单地说,波分复用和时分复用作为光复用技术各有利弊。随着相关研究的不断深入,二者可以结合起来广泛应用于超高速传输网络中。
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北京时间9月9日上午7:05,美国宇航局首个小行星取样返回器从佛罗里达州卡纳维拉尔角空军基地发射升空,开始了一段探寻太阳系早期历史的漫漫征程。

北京时间9月9日上午7:05,OSIRIS-Rex探测器从美国佛罗里达州卡纳维拉尔角空军基地发射升空

OSIRIS-REx探测器在发射升空之后,于北京时间9月9日8:04与美国联合发射联盟(ULA)的宇宙神-V型火箭分离。随后太阳能帆板成功展开,为卫星进行充电。

OSIRIS-Rex是美国宇航局“新前线项目”(New Frontiers Program)中规划的第三颗探测器。此前两大同样隶属于该项目之下的探测任务分别是2006年发射升空,飞往冥王星以及外太阳系的“新视野”号(New Horizons)探测器,以及2011年升空,飞往木星的“朱诺”(Juno)号探测器。

OSIRIS-REx探测器首席科学家,来自美国亚利桑那大学图森分校的丹特劳瑞塔(Dante Lauretta)表示:“随着今天的成功发射,OSIRIS-Rex飞船开始了它探测贝努小行星的旅程。”他说:“我为将这一切变为现实的团队感到无比骄傲,我急切期待着我们将在贝努小行星探测中将会取得的发现。”

美国宇航局局长查尔斯博尔顿也在成功发射后的讲话中表示:“今天,我们在此庆祝关键性 的里程碑,为这一伟大的项目,也为我们的团队。”他说:“我们对于这一项目未来将能够为我们带来的有关早期太阳系历史的相关知识感到兴奋,我们也庆贺这更 为广泛的科学进步,它正帮助我们作出发现并达成目标,有些在过去可能都属于科幻的范畴,但在今天却已经成为真正的现实。”

艺术示意图:OSIRIS-Rex探测器正使用“着陆-离开样品获取机构”(TAGSAM)对贝努小行星进行取样

这艘探测器的名字是什么意思?

这艘探测器全名为“起源、光谱解译、资源识别、安全性与表土风化层探测器”( The Origins, Spectral Interpretation, Resource Identification, Security-Regolith Explorer),英文缩写为“OSIRIS-REx”。 这个名字将西方航天界为探测器取名时的典型做法演绎地淋漓尽致。简单来说,与我们国家为探测器取一个有寓意的名字相似,西方也希望探测器的名字带有某种象 征意义。从我国的案例来说,前不久中国科学院空间科学战略性先导科技专项中首批立项研制的四颗科学实验卫星之一,由南京紫金山天文台主导的我国首颗暗物质 探测器被取名“悟空”,就寄寓了科研人员们希望借助“悟空”的火眼金睛,洞察暗物质本质的希望。而我国的探月卫星叫做“嫦娥”,则是寄寓我国古代嫦娥奔月 的美好传说。

而由于英语是由多个字母构成的,希望科学界在为探测器取名时,除了考虑最后的名字具有一 定的寓意之外,往往还喜欢追求让它英文名字的每个字母都能对应每个体现探测器科学目标的英文单词缩写。在如此苛刻的双重要求下,往往就会出现极为刻意,非 常“痛苦”而拗口的“凑词”做法,此次OSIRIS-Rex在这方面不可谓不典型。

OSIRIS这个名字本身发音“奥西里斯”,这是古代埃及神话中的“九神”(Great Ennead) 之一。根据神话传说,“奥西里斯”曾在古埃及的尼罗河三角洲地区传播农业知识,从而为这个古老的世界带来生命。与之类似,OSIRIS-Rex项目计划从一颗小行星地表进行取样返回,科学家们认为小行星上的有机物质可能为早期地球带来了生命的种子。当然,在古埃及神话中,“奥西里斯” 还是复活之神,他是文明的赐予者,冥界之王,执行人死后是否可得到永生的审判官。这一层含义寓意着较大型的小行星撞击地球可能给地球造成的巨大破坏作用。据此,国内很多译者将这艘飞船的中文名译为“冥王”。

与此同时,正如前面所看到的那样,这个名字中的每个字母都对应着一个英文单词的缩写,表明了此次项目的各项主要科学目标,包括对小行星“贝努”(Bennu)进行3D激光成像,从这颗小行星的地表进行取样并将这些样本送回地球等等。

它具体要达到哪些科学目标?

这一点其实仍然可以从这艘飞船的名字入手。OSIRIS-Rex这个名字本身就已经说明了这艘飞船的主要科学目标。这背后其实还有故事:当该项目最初立项时,项目的首席科学家丹特劳瑞塔(Dante Lauretta)正着手拟定该项目预计将要达成的科学目标。为了方便自己思考,于是他便在纸上逐个写下自己想到的科学目标,很快,劳瑞塔便意识到自己写下的这些单词可以组合起来缩写为“OSIRIS”。

O- Origins:起源

实现一颗富碳原始小行星的取样和返回,对其本质、历史乃至矿物和有机质的分布情况进行分析;

SI – Spectral Interpretation:光谱解译

对一颗原始富碳小行星的全球特征进行确认,从而为地面望远镜开展的小行星观测提供直接对比数据参照;

RI – Resource Identification:资源识别

对一颗原始富碳小行星全球特征、化学、矿物学特征进行探测并确认其地质与动力学历史,为取样工作做准备;

S – Security:安全

测量亚科夫斯基效应对一颗潜在危险小行星产生的影响并考察哪些小行星特征可能会对这一效应产生影响;所谓亚科夫斯基效应是指一颗自转的小行星由于在太阳辐射下产生的微弱推力会在长期作用下导致其轨道出现偏移的现象;

REx – Regolith Explorer:表土风化层探测器

记录计划取样地点附近区域表土风化层的整体背景、地貌学、地球化学以及光谱学特征数据。

类似贝努这类小行星是早期太阳系在大约45亿年前形成之后留下的残留体。科学家们认为小行星可能是为地球乃至其他行星带来最早的水体和有机分子的来源。一份具有明确来源背景信息且未受污染的小行星样品将让精确分析成为可能,从而有望取得大大超越探测器本身近距离探测或者对陨石进行研究所能达到的考察结果。

在2018年,OSIRIS-Rex探测器将抵达贝努小行星,这颗小行星非常小,大小大致与一座小山相当。随后通过一系列精妙的轨道机动,探测器将开始它与这颗小天体之间的宇宙之舞——围绕这颗太空大石块飞行,对其开展全面测绘并进行一系列探测,为后续的取样工作做好准备。到2020年7月,探测器将进行一项大胆的 *** 作,在此期间其11英尺(约合335米)长的机械臂将尝试直接触及小行星地表并进行取样,采集至少60克的样品,包括小型岩石和尘埃并将其封装入样本返回舱内。OSIRIS-Rex飞船预计将在2023年9月将其采集的样品送回地球,随后这些样本将会被送往美国宇航局休斯敦航天中心保存并开展各项研究。

此前有过类似的探测项目吗?

OSIRIS-Rex项目将是美国首个小行星样本取样返回探测器,同时也将是阿波罗时代以来从地外天体取样规模最大的探测项目。OSIRIS-Rex项目经理,美国宇航局戈达德空间飞行中心的迈克唐纳利(Mike Donnelly)表示:“目睹这支杰出团队多年来所取得的成就,令人感到满意。我们实现了在预算经费范围内向发射场按时交付探测器,不久之后我们就将开展从未有其他NASA探测器从事过的工作,那就是从一颗小行星上取得样品并送回地球。”

在此之前,在1999年2月,美国宇航局曾经发射过一颗名为“星尘”(Stardust)的探测器。其主要目标是从怀尔德-2彗星(Wild 2)的彗发中采集尘埃样品,同时在飞行过程中沿途采集宇宙尘颗粒样品并带回地球进行分析。它是人类首次执行类似项目。在飞往怀尔德-2彗星的过程中,飞船还近距离飞过了5535号小行星Annefrank。2006年1月,星尘号探测器成功将所取得的样品送回了地球。

从2011年开始,星尘号开始了名为“NExT”的任务延长期,在经过轨道机动之后,星尘号探测器与另一颗彗星坦普尔-1号相遇,在此之前这颗彗星曾经在2005年由美国宇航局“深度撞击”(Deep Impact)探测器造访过。在完成对这颗彗星的探测任务之后,星尘号于2011年3月宣布终止任务。

2003年5月9日,日本宇宙开发机构(JAXA)研制并发射了“隼”(Hayabusa)的探测器。这是世界首个小行星取样返回任务,目标是从编号25143的“系川”小行星(Itokawa)上获取样品并带回地球。2005年9月中旬,“隼”探测器抵达目的地,并对这颗小天体的各种情况进行了详细考察。在2005年11月份,探测器着陆到小行星上并获得了少量样品,随后在经历一系列故障和艰难机动之后,样品舱于2010年6月被成功送回地球。

但这两次取样返回计划所获得的样品数量都非常少,基本上都是一些极其细小的颗粒物,重量远远不到一克的数量级,而此次OSIRIS-Rex的取样计划是60克物质,如果能够实现,将是一次重大的飞跃。

这到底是一艘什么样子的飞船?它有哪些科学设备?

美国宇航局戈达德空间飞行中心负责整个项目的管理、系统工程以及项目整体安全事项;亚利桑那大学领导了项目的科学团队并负责制定观测计划和日程;位于丹佛的洛克希德马丁空间系统公司是卫星制造承包商。

OSIRIS-Rex飞船的基本参数如下:

飞船长度:62米(太阳能帆板展开时)

宽度:24米X24米

高度:32米

取样机械臂长度:34米

干重(未加注燃料):880公斤

湿重:(加注燃料后):2110公斤

电力供应:两块太阳能帆板,总面积85平方米,发电量约为1226~3000瓦之间,取决于飞船距离太阳的远近;

载荷:5台科学设备,外加一根取样机械臂(TAGSAM)以及一个用于将样品送回地球的样品返回舱。

一)具体到飞船搭载的科学载荷,基本情况如下:

1)OCAMS——OSIRIS-Rex相机包

该设备包包括三台相机:PolyCam、MapCam以及SamCam。这些相机将在飞船逐渐接近小行星贝努时拍摄目标。随后,OCAMS将获取小行星的全球图像以及计划取样地区的详细图像,最后,OCAMS还将在整个“着陆-离开”(TAG)机动过程中完整记录整个采样经过。

具体如下:

PolyCam:这实际上是一台8英寸(20厘米)的望远镜,它将是首先对目标进行观测的相机设备,在距离小行星200万公里左右时,这台相机就将开始拍摄工作。一旦飞船逐渐接近目标,它将能够开始获取贝努小行星的高清图像;

MapCam:这台设备的任务是对贝努小行星进行搜索,寻找其可能存在的卫星以及地表可能存在的气体尘埃喷射。它能够用4种颜色对小行星进行成像测绘,从而帮助科学家判定小行星外形并提供计划取样地点的高清图像;

SamCam:将持续记录TAG机动与取样的全过程。

OCAMS设备包是由亚利桑那大学开发的,OCAMS设备组的负责科学家是Bashar Rizk,Christian d’Aubigny以及Chuck Fellows,三人均来自亚利桑那大学。

2)OLA——OSIRIS-Rex激光高度计

这是一台LIDAR(光学探测与测距)设备。它与雷达原理相似,但不是使用无线电波,而是激光束。OLA将发射激光脉冲照射贝努小行星表面并测量返回时间差,从而精确绘制其地表高程地图。这些数据将有力支持其他设备的探测并为导航和重力测量提供参照。

这台设备是由加拿大航天局提供的。因此相关团队也是由加拿大与美国科学家联合组建的,包括来自加拿大卡尔加里大学,约克大学,美国约翰霍普金斯大学等机构的科学家。

3)OTES——OSIRIS-Rex热辐射光谱仪

该设备能够采集红外波段(~5-50微 米波长)的光谱数据。在红外波段,大多数矿物都会显示独特的光谱学信号,通过将这些信号数据与地面实验室矿物样品光谱参考数据进行比对,科学家们将能够判 定存在于小行星贝努表面的矿物种类。另外,在红外波段科学家们还将获取贝努小行星地表温度的信息,而这将提供有关这颗小行星地表物质的关键物理信息,比如 说其地表物质的颗粒大小等等。科学家们将根据OTES设备提供的数据绘制贝努小行星的全球矿物分布与温度分布地图,并帮助挑选理想的着陆点位置。

OTES设备是由美国亚利桑那州立大学研制的,设备负责人是著名矿物光谱科学家菲利普克里斯坦森(Philip Christensen)。

4)OVIRS——OSIRIS-Rex可见光与红外光谱仪

这台设备将测量来自贝努小行星产生的可见光与红外光辐射。OVIRS对从可见光中的蓝光到近红外波段敏感,波长大致在04~43微米之间。OVIRS提供的数据将帮助科学家们识别贝努小行星地表的矿物与有机质分布情况,同时它将重点采集预定着陆地区的光谱学数据。

OVIRS设备是由美国宇航局戈达德空间飞行中心研制的,负责人是该机构的丹尼斯鲁特(Dennis Reuter)。

5)REXIS——表土风化层X射线成像光谱仪

这是一台学生实验设备,其将判定贝努小行星表面存在那些元素以及这些元素的丰度状况。该设备获得的数据将补充前述矿物学探测设备获取的数据。REXIS设备利用了一个原理,那就是来自太阳X射线辐射以及太阳风粒子会与贝努小行星地表物质发生相互作用。贝努小行星地表物质的原子吸收这些X射线并导致原子失稳,随后产生特征X射线辐射。通过对这种X射线波段信号的识别,将能够反推原子的种类,从而得知有哪些元素在此存在。

这台设备是由美国麻省理工学院和哈佛大学的学生们设计的,后来经过激烈竞争后被选中搭载到OSIRIS-Rex探测器上。

二)采样与返回设备

1)TAGSAM——着陆-离开样品获取机构

这是一台设计简洁而精妙的小行星表面取样机械臂设备。一旦该设备的顶部接触小行星地表,它就会喷射一股纯氮气气体,从而将小行星表面的部分表土层物质吹入设备的取样舱。而机械臂顶部接触小行星地表的部分也安装了取样装置,在借助地表时也会取得一部分样品。

TAGSAM设备一共储备了3罐的氮气气体,能够满足3次取样尝试。尽管这是一项全新的技术,但在地面上此前已经进行了真空失重环境下的多次模拟实验并取得了良好的效果,测试显示其应当能够取得超过60克的样品。这台设备是由洛克希德马丁公司研制的。

2)SRC——样品返回舱

这是一个小型返回器,安装了隔热防护罩以及降落伞。一旦在贝努小行星的取样任务完成,TAGSAM机械臂将会把TAGSAM的顶部部分直接卸掉,装进SRC返回器内。任务终结时,装有TAGSAM头部的SRC返回器将是唯一返回地面的部分。这套设备是由洛克希德马丁公司研制的。该项技术继承了此前2006年星尘号探测器返回舱的相关技术,当时星尘号的返回舱成功地将怀尔德-2号彗星的样品带回了地球。

为什么选择贝努小行星作为目标?

如前所述,OSIRIS-Rex探测器最重要的目标就是要从一颗小行星上实现取样返回。但为何选中了贝努小行星(Bennu)作为目标呢?要知道太阳系中已经被编号的小行星有超过50万颗。这当然是有原因的,主要的考虑因素如下:

1)距离地球近

贝努小行星的轨道示意图

距离地球最近的小行星被称为“近地小天体”(NEOs)。正如这一名称所暗示的那样,这些小天体可能会运行到距离地球非常近的范围内,一般将运行到距离太阳13个天文单位(AU)范围内的小天体都归入此类天体。一个天文单位是指地球到太阳的距离,大约为15亿千米。对于像OSIRIS-Rex这样的取样返回项目来说,最容易抵达的目标应该是在16AU~08AU之间的。理想的目标应当具有与地球相近的轨道,轨道偏心率与倾角都比较小。在2008年进行目标筛选时,有超过7000颗已经被发现的近地小天体候选,但其中只有192颗的轨道符合这一选择标准。

2)大小

直径较小的小行星相比那些直径比较大的小行星,其自转的速度更快。如果一颗小行星的直径在200米以下,那么它的自转速度将会非常迅速,其地表松散的表土层物质将会被抛离地表并进入太空流失掉。因此较为理想的采样目标应该是直径至少要大于200米的,这样飞船才能较为安全地接近目标并采集到足够的松散表土物质。这一大小要求的设定,将候选小天体的数量从192颗降低为26颗。

3)物质成分

根据其化学组成成分,小行星可以分为不同的类型。其中最原始的类型以富碳为特征,它们自从太阳系初期形成以来未曾经过大的改变。这样的小行星上存在着有机分子、挥发物质以及氨基酸,这些物质都有可能与地球上最早期生命的诞生有关。在前面剩下的26颗候选小天体中,只有12颗的物质成分是已经知晓的,而在这12颗小天体中,只有5颗是富碳类型的小行星。

而就是在这剩下的5颗候选天体中,科学家们最终选定了贝努小行星。贝努是一颗B型小行星,直径大约500米。其围绕太阳公转一周的时间大约是436604天(12年),并且每隔6年左右会接近一次地球,最近时与地球之间距离不到0002AU。这样的特征让贝努小行星有较大的可能性在22世纪期间与地球发生碰撞。而正是由于贝努小行星合适的大小、原始的成分以及有可能对地球构成威胁的轨道特征,使其成为一颗非常令人感兴趣的探测目标,因此成为OSIRIS-Rex的探测目标也就在情理之中了。

为地球的安全而出发!

1994年,地球上的人们目睹了一场前所未有的太空撞击事件——苏梅课-列维9号彗星撞击了木星。木星遭受这颗被撕碎的彗星一连串的猛烈撞击之后留下的黑色“疤痕”让人难以释怀。如果那次撞击事件发生在地球上,那么或许这将意味着人类文明的终结。

我们为什么存在?或许在一定程度上是幸运的结果:我们活着,因为我们非常幸运。这其中恐龙的消亡或许就占据着非常重要的作用——毕竟很难想象在恐龙统治的这颗星球上,我们脆弱的祖先们能够发展壮大并接管这个世界。而目前的主流科学理论基本认定在大约6500万年前的白垩纪末期,一次大规模的陨星撞击事件导致了恐龙的最终灭绝。

但陨星能够毁灭恐龙,当然也能够毁灭我们。现在,该轮到我们提心吊胆了。正如恐龙灭绝的 案例所体现的那样,在地球的历史上,大型撞击事件在极大的程度上塑造了地球的历史,甚至目前有很多证据表明月球的产生也是地球在早期历史上遭受一颗火星大 小的原始行星撞击的产物。地月系统的形成,地球上水和有机物的出现,地球上生命的诞生和数次严重的生命大灭绝事件,背后很有可能都有小天体撞击地球的重要 因素。

即便是在更近的历史上,1908年发生在西伯利亚的通古斯大爆炸事件很有可能就是一颗彗星冲入地球大气层后发生猛烈爆炸导致的结果。那场空前的爆炸事件几乎将方圆数百公里范围内的原始森林夷为平地,可见其威力之巨大。

最近几年,就在2013年2月15日中午,在俄罗斯车里雅宾斯克州发生了陨星坠落事件,巨大的冲击波震碎了数以千计人家的窗户,造成大量人员受伤。当时全世界各地的媒体都以头条新闻的形式报道了这一事件。

地球无时无刻不受到大量外来小天体撞击的威胁,这也直接关系到全人类的生存和安全。而为了制定防范对策,我们就必须对那些可能对地球造成威胁的小天体的相关特性深入研究,做到知己知彼,心中有数。而此次OSIRIS-Rex探测器的发射,正是这样一次伟大的壮举。

因此,完全可以说,OSIRIS-Rex探测器——为地球的安全而出发!(晨风)

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你好
这是一只925银镶翡翠饰品,镶嵌和翡翠的价值都比较低,常见于抽奖打折等销售方式。
镶嵌的部分,S925银。
(925就属于标准的纯银了,但是非千足银,千足银太软无法镶嵌使用)
镶嵌工艺一般用种植腊树,等批量化工艺,成本低廉。
镶嵌的配石是锆石或者水钻,为人工合成产物价格低廉。
翡翠部分天然翡翠A货(真货)糯种水滴,无色,尺寸很小价值低。
总体来讲整件100-300元范围还算可以接受。
如果有其他疑问欢迎追问。

基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域广泛应用和迅速发展。由于PCR具有敏感性高、特异性强、快速、简便等优点,已在病原微生物学领域中显示出巨大的应用价值和广阔的发展前景。
PCR技术是由Cetus公司和加利福尼亚大学1985年联合创造的,主要贡献者为Kary B mulis和HeneryA、Erlich。该方法首先被应用于人β-珠蛋白DNA的扩增及镰刀状红细胞贫血病的产前诊断。自85年首次报道PCR方法以来,PCR被广泛应用于分子克隆、序列分析、基因突变、遗传病、传染病、性传播性疾病及法医判定和考古研究等多领域、并发挥了越来越大的作用。因而发明人Kary B、mulis获1993年诺贝尔化学奖。
为了使PCR技术在临床上迅速得以普及,我们对该技术的某些程序成功地作了重大改革,使PCR技术变得简单、微量化、不易发生污染,从而使PCR技术常规化成为可能。我们的方法迅速在全国各大医院得到推广。
一、PCR的基本原理和基本程序
PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA单链的结合。引物与互补DNA结合后,以靶DNA单链为模板,经反链杂交复性(退火),在Taq DNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷(dNTP)为原料按5'到3'方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链。然后又开始第二次循环扩增。引物在反应中不仅起引导作用,而且起着特异性的限制扩增DNA片段范围大小的作用。新合成的DNA链含有引物的互补序列,并又可作为下一轮聚合反应的模板。如此重复上述DNA模板加热变性双链解开—引物退火复性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循环过程,使每次循环延伸的模板又增加1倍,亦即扩增DNA产物增加1倍,经反复循环,使靶DNA片段指数性扩增。
PCR的扩增倍数Y=(1+E)n,这里Y是扩增量,n为PCR的循环次数。E为PCR循环扩增效率。设PCR扩增效率E为100%、循环次数n=25次,靶DNA将扩增到33554432个拷贝,即扩增3355万倍:若E为80%、n=20、则扩增数量将下降到1408865拷贝,即扩增产物约丢失93%,若E=100%,n=20,则扩增数量减少1048576个拷贝,扩增产物约减少97%。可见PCR循环扩增效率及循环次数都对扩增数量有很大影响。PCR扩增属于酶促反应,所以,DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。靶DNA片段的扩增最初表现为直线上升,随着靶DNA片段的逐渐积累,当引物—模板/DNA/聚合酶达到一定比值时,酶的促化反应趋于饱和,此时靶DNA产物的浓度不再增加,即出现所谓平台效应。PCR反应达到平台期的时间主要取决于反应开始时样品中的靶DNA的含量和扩增效率,起始模板量越多到达平台期的时间就越短、扩增效率越高到达平台期的时间也越短。另外酶的含量,dNTp 浓度,非特异性产物的扩增都对到达平台期时间有影响。
二、PCR的特点
(一)特异性高:首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从温泉水中分离到的水生嗜热杆菌中提取的热稳定的Taq DNA聚合酶,在热变性处理时不被灭活,不必在每次循环扩增中再加入新酶,可以在较高温度下连续反应,显著地提高PCR产物的特异性,序列分析证明其扩增的DNA序列与原模板DNA一致。扩增过程中,单核苷酸的错误参入程度很低、其错配率一般只有约万分之一,足可以提供特异性分析,选用各型病毒相对的特异寡核苷酸引物。PCR能一次确定病毒的多重感染。如用HPV11和HPV16型病毒引物检测病妇宫颈刮片细胞可以发现部分病人存在HPV11和HPV16两型的双重感染。
(二)高度敏感:理论上PCR可以按2n倍数扩增DNA十亿倍以上,实际应用已证实可以将极微量的靶DNA成百万倍以上地扩增到足够检测分析量的DNA。能从100万个细胞中检出一个靶细胞,或对诸如病人口液等只含一个感染细胞的标本或仅含001pg的感染细胞的特异性片段样品中均可检测。
(三)快速及无放射性:一般在2小时内约可完成30次以上的循环扩增,加上用电泳分析。只需3-4小时便可完成,不用分离提纯病毒,DNA粗制品及总RNA均可作为反应起始物,可直接用临床标本如血液、体液、尿液、洗液、脱落毛发、细胞、活体组织等粗制的DNA的提取液来扩增检测,省去费时繁杂的提纯程序,扩增产物用一般电泳分析即可,不一定用同位素,无放射性易于推广。
(四)简便:扩增产物可直接供作序列分析和分子克隆,摆脱繁琐的基因方法,可直接从RNA或染色体DNA中或部分DNA已降解的样品中分离目的基因,省去常规方法中须先进行克隆后再作序列分析的冗繁程序。已固定的和包埋的组织或切片亦可检测。如在PCR引物端事先构建一个内切酶位点,扩增的靶DNA可直接克隆到M13,PUC19等相应酶切位点的载体中。
(五)可扩增RNA或cDNA:先按通常方法用寡脱氧胸苷引物和逆转录酶将mRNA转变成单链cDNA,再将得到的单链cDNA进行PCR扩增,即使mRNA转录片段只有100ngcDNA中的001%,也能经PCR扩增1ng有242碱基对长度的特异片段,有些外显子分散在一段很长的DNA中,难以将整段DNA大分子扩增和做序列分析。若以mRNA作模板,则可将外显子集中,用PCR一次便完成对外显子的扩增并进行序列分析。
三、PCR方法
(一)试剂
(1)引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生
物都有自己特异的引物。
(2)耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。
(3)10×PCR缓冲液:500mmol/l KCl;100mmol/L Tris-HCl(pH84,20℃)150mmol/L MgCl2,1mg/ml明胶。10×PCR缓冲液随酶一起购买。
(4)5mmol/L dNTP贮备液:将dATP、dCTP、dGTP和dTTP钠盐各100mg合并,加入灭菌去离子水溶解,用NaOH调pH至中性,分装每份300μl,-20℃保存。dNTP浓度最好用UV吸收法精确测定。现用dNTP溶液均有商品化产品。
(5)DNA模板:用处理液将待测标本处理,不同处理方法、 *** 作各异,但目的是暴露标本中被检测的DNA。
(二) *** 作程序
过去标准的PCR *** 作程序是将PCR必需反应成份分别加入一微量离心管中,然后置于一定的循环参数条件下进行循环扩增。具体如下:
(1)向一微量离心管中依次加入
DNA模板 102-105拷贝
引物 各1μmol/L
dNTP 各200μmol/L
10×PCR缓冲液 1/10体积
ddH2O 补到终体积(终体积50μl-100μl)
混匀后,离心15s使反应成分集于管底。以上步骤仅在实验研究用,现在商品化试剂已将dNTP、10×PCR缓冲液,引物,ddH2O混合在一起,反应体积为20-25μl,只要试验人员加入处理好的样品就可以了。
(2)加石蜡油50-100μl于反应液表面以防蒸发。置反应管于97℃变性10min。
(3)冷至延伸温度时,加入1-5u Taq DNA聚合酶,离心30s使酶和反应液充分混合。现在临床使用试剂酶通常已加入反应液中。
(4)PCR的循环程序为:94℃变性30s,55℃退火20s,然后在72℃延伸30s,共循环30-35次。最后一次循环结束后,再将反应管置72℃温育5min,以确保充分延伸。
PCR尚可用于组织标本DNA的扩增。由于固定组织标本的DNA常发生降解,就给常用的分析方法如Southern转印杂交等带来一定困难。87年Impraim等人首先将PCR技术引入固定包埋组织内DNA分析。他们先从组织标本中提取DNA,再用PCR进行特异性的DNA扩增,应用这种方法,他们成功地从保存30至40年之久的组织标本DNA中扩增了HPV病毒基因片段。但这种方法需要提取DNA, *** 作比较繁琐。1988年Shibata等人对Impraim的方法进行了改进。他们将固定包埋的组织块制成5-10um厚,04cm大小的切片。将切片放入容积为500μl的Eppendorf管内。加入400μl二甲苯脱脂,离心除去二甲苯,用400μl 95%乙醇洗去残余二甲苯。离心除尽乙醇、加入100μlPCR反应基质,将Eppendorf管放入沸水浴中煮10min,然后按前述PCR方法进行DNA扩增。
在应用PCR方法检测RNA病毒时,首先应将RNA转化成cDNA才能进行扩增,因为PCR只能对DNA模板进行扩增,我们把这种RNA的PCR反应称为反转录PCR,简称RT-PCR。把由RNA转化成DNA的过程叫做反转录,反转录需要在反转录酶的作用下完成。
四、PCR反应的基本条件及其对PCR的影响
(一)模板核酸
PCR可以以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增。不过RNA的扩增首先逆转录成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸标本必须经处理后才能用于PCR的扩增,处理不当或处理过程中DNA掉失都会导致PCR扩增失败。采集标本方法不当,未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现假阴性。但是如果待扩增标本中模板DNA浓度太高也会导致扩增失败。
(二)引物
PCR结果的特异性取决于引物的特异性,扩增产物的大小也是由特异引物限定的。因此,引物的设计与合成对PCR的成功与否起着决定性的作用。合成的引物必须经聚丙烯酰胺凝胶电泳或反向高压液相层析(HPLC)纯化。因为合成的引物中会有相当数量的“错误序列”,其中包括不完整的序列和脱嘌呤产物以及可检测到的碱基修饰的完整链和高分子量产物。这些序列可导致非特异扩增和信号强度的降低。因此,PCR所用引物质量要高,且需纯化。冻干引物于-20℃至少保存12-24个月,液体状态于-20℃可保存6个月。引物不用时应存于-20℃保存。
PCR反应中引物的量也影响PCR扩增效果,当PCR引物量太低,则产物量降低,会出现假阴性。引物浓度过高会促进引物的错误引导非特异产物合成,还会增加引物二聚体的形成。非特异产物和引物二聚体也是PCR反应的底物,与靶序列竞争DNA聚合酶,dNTP底物,从而使靶序列的扩增量降低。一般认为PCR反应中引物的终浓度为02~1μmol/L为宜,但我们实验发现,最适浓度远远低于此浓度。
(三)缓冲液
PCR反应的缓冲液的目的是给Taq DNA聚合酶提供一个最适酶催反应条件。目前最为常用的缓冲体系为10-50mmol/L Tris-HCl (pH83-88,20℃) Tris是一种双极性离子缓冲液,20℃时其pKa值为83,△pKa值为-0021/℃。因此,20mmol/l Tris-HCl(pH83,20℃)在实际PCR中,pH变化于68-78之间。改变反应液的缓冲能力,如将Tris浓度加大到50mmol/L,pH89,有时会增加产量。
反应混合液中50mmol/L以内的KCl,pH89有利于引物的退火,50mmol/l NaCl或50 mmol/L以上的KCl则抑制Taq DNA聚合酶的活性。有些反应液中以NH+4代K+,其浓度为166mmol/L。反应中加入小牛血清白蛋白(100μg/ml)或明胶(001%)或Tween 20(005% ~01%)有助于酶的稳定,反应中加入5mmol/l 的二硫苏糖醇(DTT)也有类似作用,尤其在扩增长片段(此时延伸时间长)时,加入这些酶保护剂对PCR反应是有利的。
(四)Mg2+
Mg2+浓度直接影响着酶的活性与忠实性,这是Taq DNA聚合酶活性所必需的。另外它还影响着引物的退火,模板与PCR产物的解链温度,产物的特异性,引物二聚体的形成等。Mg2+浓度过低时,酶活力显著降低;过高时,通常会导致非特异性扩增产物的累积。PCR混合物中的DNA模板,引物和dNTp 的磷酸基团均可与Mg2+结合,降低Mg2+实际浓度。因为Taq DNA聚合酶需要的是游离Mg2+。
(五)三磷酸脱氧核苷酸(dNTP)
四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)是DNA合成的基本原料,PCR反应中dNTP含量太低,PCR扩增产量太少、易出现假阴性。过高的dNTP浓度会导致聚合将其错误掺入(即所谓的“热力背信”),因此应当避免。一般认为最适的dNTP浓度为50~200μmol/L。dNTP的质量也直接影响PCR反应的成败。
(六)耐热DNA聚合酶
PCR之所以能得到广泛应用,主要是因为Taq DNA聚合酶取代了大肠杆菌DNA聚合酶I大片段。Taq DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus(Taq)中分离出的热稳定性DNA聚合酶,使用Taq DNA聚合酶不仅简化了PCR程序,也极大地增加了PCR特异性及PCR扩增效率。该酶的最适温度很高(79℃),使引物在高温下进行退火和延伸,这样便增加了反应的总强度并减少了与错配引物的延伸。在PCR反应中,每100μl反应液中含1-25u Taq DNA聚合酶为佳,酶的浓度太低会使扩增产物产量降低,如果酶的浓度太高则会出现非特异性扩增。Taq DNA聚合酶保存不当而失活是PCR实验失败的常见原因。
(七)温度循环参数
1.变性温度与时间
PCR反应中模板DNA的变性十分重要。只有完全性的模板DNA和PCR产物双链完全解开,才能有效的和引物结合。这种结合是PCR扩增的基础。变性温度越高,时间越长变性就越充分。但温度过高、时间过长又会影响Taq DNA聚合酶的活性,所以通常选用变性温度为95℃30s为宜。在PCR反应中第一个循环变性最重要,需时间较长,因模板DNA的链比较长。
2.复性温度与时间
变性温度是PCR反应成败的关键,复性温度决定着PCR的特异性。温度越低复性越好,但是容易出现引物与靶DNA的错配,增加非特异性结合,温度太高不利于复性,大多数PCR反应的复性温度在55℃左右。确定了复性温度后,复性时间并不是关键因素。但复性时间太长会增加非特异的复性。
3.延伸温度与时间
引物延伸温度一般为72℃。这个温度即考虑了Taq DNA聚合酶的活性,又考虑到引物和靶基因的结合。不合适的延伸温度不仅会影响扩增产物的特异性,也会影响其产量,72℃时,核苷酸的合成速度为35-100个核苷酸/S,这取决于缓冲体系、pH、盐浓度和DNA模板的性质。72℃延伸1min对于长达2kb的扩增片段是足够的。然而,延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。对很低浓度底物的扩增,延伸时间要长些。
4.循环数:
循环数决定着扩增的产量。在其它参数都已优化条件下,最适循环数取决于靶序列初始浓度。靶序列的初始浓度较低时、要增加循环次数。另外,酶活性不好,或量不足时也要增加循环次数、以便达到有效的扩增量。
五、PCR标本的制备
在将Taq DNA聚合酶引入PCR反应,并使之达到自动化之后,PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单,而且,许多PCR的失败都归因于标本的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用,因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外,处理标本可使待扩增DNA暴露,能与引物复性。关于PCR标本制备各种专业书中介绍了许多,我们实验发现 *** 作复杂、不慎便容易造成污染,且不实用。现介绍一种简单快速的处理方法即3%异硫氰酸胍和待检标本混合100℃,10min,离心取上清作为PCR模板即可。
六、PCR实验中常见问题对策
所有实验结果都有成功或失败,实验的失败可能是应该出结果而没有出,我们把它称作假阴性,不该出结果而出了结果我们把它称为假阳性。PCR实验中最常见的问题就是假阴性和假阳性问题。
(一)假阴性:出现假阴性结果最常见的原因是:Taq DNA聚合酶活力不够,或活性受到抑制;引物设计不合理;提取的模板质量或数量不过关以及PCR系统欠妥当;循环次数不够。所以在实验中出现假阴性失败时,首先在原来扩增的产物中再加入Taq DNA聚合酶、增加5-10次循环,一般都会获得成功。如果没有成功应检查PCR扩增仪的温度是否准确,采集标本是否有问题。为了防止假阴性的出现在选用Taq DNA聚合酶时,要注意用活力高质量好的酶。同时在提取PCR模板时,应特别注意防止污染抑制酶活性物质(如酚、氯仿)的存在。尽管Taq DNA聚合酶对模板纯度要求不高,但也不允许有破坏性有机试剂的污染。PCR扩增的先决条件及特异性是引物与靶DNA良好的互补,尤其是要绝对保证引物的3′端与靶基因的互补。对变异较大的扩增对象,宜采用巢式(Nested)PCR或double PCR。在进行PCR *** 作时应注意Mg2+的浓度要合理。PCR反应的各温度点的设置要合理。
(二)假阳性:PCR结果的假阳性是对被检测标本而言,而反应系统中所扩增的产物是真实的。因为PCR技术高度灵敏,极其微量的靶基因污染都会造成大量扩增,而造成结果判断上的失误,所以污染是PCR假阳性的主要根源。PCR的污染主要是标本间的交叉污染和扩增子的污染。出现假阳性结果的另一种可能是样品中存在有靶基因的同源序列。为了避免因污染而造成的假阳性,PCR *** 作时要隔离不同 *** 作区、分装试剂、简化 *** 作程序,使用一次性吸头。
七、PCR扩增产物的分析法
PCR扩增DNA片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可帮助判断扩增产物的大小,有助于扩增产物的鉴定,点杂交除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产物的大小,增加检测的特异性与敏感性,最近发展的一系列产物分析法(PCR-ELISA,PCR-EIA,PCR-OLA等)均有助于产物的精确分析。
(一)凝胶电泳分析法
PCR产物可通过琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,以前者最常用,通过电泳可以判断扩增产物的大小。在临床检测中,仅通过凝胶电泳判断扩增片段大小即可满足检测的需要。通常制胶方法为100mlTBE加15g琼脂糖在微波锅内溶解,稍冷后倒入电泳槽。
电泳后,用溴化乙淀染色20min,然后用去离子水漂洗2次,每次15min,于UV灯下观察结果并拍照。
凝胶电泳不仅可以鉴定产物的大小,检测扩增的情况,还可以用来纯化扩增产物。
(二)点杂交
当扩增产物是多条带时,用点杂交更合适。这种方法的基本过程是,首先将扩增的DNA固定到尼龙膜或硝酸纤维素滤膜上,再用放射性或非放射性标记物标记的探针杂交。点杂交还有助于检测突变DNA的突变类型,用于人类遗传病诊断和某些基因的分型。放射性同位素32P标记的寡核苷酸探针检测的敏感性、特异性和方法的可靠性均不容怀疑,对人们认识某些疾病与基因变异的关系起了很大的作用。但是,由于同位素不稳定和放射性危害,不能常规用于临床或法医检验,用非放射性物质(生物素、荧光素和地高辛等)标记的寡核苷酸探针分析PCR产物以确定核酸序列变异则是一种简便而安全的方法。非放射性标记物质稳定性高,使用方便、安全、检测速度快。
(三)微孔板夹心杂交法
该法是通过一固定于微孔板的捕获探针与PCR产物的某一区域特异杂交使产物间接地固定于微孔板上。然后,再用一生物素等非放射性标记物标记的检测探针与产物的另一区域杂交,漂洗后显色即可判断结果,该法需要两个杂交过程来检测一个产物,因此,其特异性较一次杂交的检测法高。该法已用于HBV的检测,其敏感度可达5个HBv DNA分子。此法的敏感性和特异性与PCR 32P探针的Southern杂交法相当。但PCR微孔板夹心杂交法 *** 作简便、快速、避免了同位素标记探针的危害,显色反应类似于临床常规应用的ELISA,适于临床实验室常规应用。
(四)PCR-ELISA法
本法避免了电泳和杂交的步骤,适于常规ELISA记数仪检测。因为5'端修饰后仍可进行常规PCR扩增特异靶序列。因此,可以通过修饰一个引物的5′端使其携带便于PCR产物固定的功能基因,而通过另一引物5′-端的修饰使产物便于检测。


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