GEO筛选差异,KOBAS注释分析。
GEO数据库来筛选差异表达基因,KOBAS进行KEGG注释分析
利用基因在不同物种之间的保守性,任何基因组的数据都可以映射到这些数据库中去。
ncbigeo数据库怎么使用CDS(CodingSequence)特征域被认为是DNA生成蛋白质的翻译指令,利用CDS特征域构建外显子-内含子数据库(Exon-IntronDatabase,EID)是研究内含子起源、进化和功能的重要手段
标准化的方法就是Counts值:
对给定的基因组参考区域,计算比对上的read数,又称为raw count(RC)。
aw count作为原始的read计数矩阵是一个绝对值,而绝对值的特点是基因长度、测序深度不同不可以比较。所以我们要进行标准化把count矩阵转变为相对值,去除基因长度、测序深度的影响,我们采用分析的。
标准化的三种方法得出的三种值:
RPM (Reads per million mapped reads):RPM方法:10^6标准化了测序深度的影响,但没有考虑转录本的长度的影响。
RPKM/FPKM方法:
103标准化了基因长度的影响,106标准化了测序深度的影响。TCGA的数据分析多采用这种结果。
TPM (Transcript per million):TPM的计算方法也同RPKM/FPKM类似,TPM可以看作是RPKM/FPKM值的百分比。
具体判断方法:
表达量是否需要重新标准化。
可以通过boxplot函数观察一下样本表达丰度值的分布是否整齐进行判断。
是否需要log2:根据数据值的大小。
如果表达丰度的数值在50以内,通常是经过log2转化的。如果数字在几百几千,则是未经转化的。
GEO数据库是一个储存芯片、二代测序以及其他高通量测序数据的一个数据库。利用这个数据库,我们可以检索到其他一些人上传的一些实验测序数据。
由于GEO数据库和我们之前介绍的gene数据库a以及我们常用来搜索文献的pubmed都是一个机构的。使用这个数据库,我们需要做的就是就是就是提供检索式。检索式可以是简单的几个关键词,也可以是制定特殊的检索式。我们一般可以用到的进一步筛选的过程就是:在样本类型当中寻找自己想要的物种。由于GEO包括了很多不同组学的数据,如果我们有特定的检索目的的话,我们可以在aStudyaType当中来选择合适的数据类型。默认的检索结果的排序是基于检索相关性来排序的。而我们再找目标数据的时候。有时候需要看样本量,一般来说样本量越大其实也就越好的。所以我们可以改变一下检索结果的排序。
你好,本公司是专门做生物信息数据处理的。
差异表达基因的筛选(阀值)以及后面的生物信息分析都可以做的。
差异表达基因筛选步骤:选择GEO数据——下载芯片数据——差异分析(方法有很多:SAM法,R包处理,T-test检验等)——选择想要的阈值(Fold change >4)
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