SAM文件每一列的信息:
理解FLAG值含义的关键在于将FLAG转换为二进制,再对照下方的表,哪一位上晌姿是1,就代表这个比对符合后面的描述。
计算机处理时,可通过对FLAG值和每种FLAG进行与运算,若为带睁True,则包含此FLAG,反之不包含。
SAM文件中CIGAR字符串详细记录了read比对到参考蠢谨岁序列上的细节:
BAM文件中除了必须的前11列信息之外,不同的BAM文件中后面记录metadata的列是不固定的,在不同的处理软件中输出时也会有所不同,meatdata含义: SAM (Sequence Alignment/Map) Format Alignment Tags (samformat.info)
参考:
从零开始完整学习全基因组测序数据分析:第5节 理解并 *** 作BAM文件
SAM Format Flag
https://samtools.github.io/hts-specs/SAMv1.pdf
bowtie2是当前最流行的短序列比对软,SAM(SequenceAlignment/Map)格式是一种通用的比对格式,用来存储reads到参考序列的比对信息SAM是一种序列比对格式标准, 由sanger制定,是以TAB为分割符的文本格式。
主要应用于测序序列mapping到基因组上的结果表示,当然也可以表示任意的多
重比对结果
SAM分为两部分:注释信息和对比结果
注释信息以@开头
@HD:说明符合标准的版本。对比序列的排列顺序
@SQ:参考序列说明
@RG:比对上的序列(read)说明
@PG:使用的程序说明
@CO:任意的说明信息
比对结果部分
每一行代表一个片段的比对信息,包括11个必须的字段和一个可选字段,字段之间用tag分割
11个必须字段:
1:比对片段(read)的编首滚仿号
2.位标识(flag)每一种数字代表一种情况,这里的值是符合情况的数字和
3.参考序列的编号,没有比对上的序列,这里为 *
4.比对上的位置 从1开始计数,没有比对上此处为0
5.MAPQ:mapping的质量
6.CIGAR:简要比对信息表达式 以参考序列为基础,使用数字加字幕表示比对结果
比如3S6M1P1I4M,前三个碱基被剪切去除了,然后6个比对上了,
然后打开了一个缺口,有一个碱基插入,最后是4个比对上了,是按照顺序的
“M”表示 match或 mismatch;
“I”者纤表示 insert;
“D”表示 deletion;
“N”表示 skipped(跳过这段区域备轿);
“S”表示 soft clipping(被剪切的序列存在于序列中);
“H”表示 hard clipping(被剪切的序列不存在于序列中);
“P”表示 padding;打开缺口
“=”表示 match;
“X”表示 mismatch(错配,位置是一一对应的)
7.下一个片段比对上的参考序列的标号,没有另外的片段这里为 * ,同一个片段 =
8.下一个片段比对上的位置,如果不可用,此处为0
9.Template的长度,最左边得为正,最右边的为负,中间的不用定义正负,
不分区段(single-segment)的比对上,或者不可用时,此处为0;
10.比对上的序列片段的序列信息,如果不存储此类信息,此处为’*‘,
长度=简要比对信息表达式算出来的结果
11.序列的质量信息,格式同FASTQ一样
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