sds电泳图咋看

sds电泳图咋看,第1张

通过sds-page凝胶成像系统拍摄,注意调整对比度。如果是写报告的话,可以标记出marker各条带的分子量以及亮度,详见说明书;然后说明扩增片段与目的片段大小相同,均为xx;如果图像上有杂带可以分析一下,比如可能是引物二聚体之类的情况,以便下次实验可以酌量调整退火温度或者各成分的用量。

1)选择分子量 跟你的质粒接近的marker,最理想的是包含质粒分子量在内,但据我所知没有这样的marker

2)你这个电泳图上样量太大了,一方面条带不整齐难以判断,另一方面你干嘛要纠结于几条带呢一般说是3条带也是理论上的,但实际上,在菌体内复制的质粒就是一个连续的状态,什么样都有,电泳结果就可能造成条带的局部涂布

所谓的三条带解释没有定论,现在一般认为是超螺旋、复制型(处于复制的半开环状态,即眼结构)和开环DNA(一条链断了),早先认为的 线状DNA后来被否,因为质粒很不容易断裂成线状的顺序应该是超螺旋在最前边,开环在后边

凭经验,我估计你的超螺旋和复制型合并成你那个粗的涂抹带了,后边那个细的是少量的开环DNA,5,碱裂解法提取质粒DNA的电泳图谱,为何我的只有两条带分别都是什么

1我的Marker 选的100bp 是不是不合适

2这两条带是线性和开环构型DNA这两条带哪个是线性哪个开环构型DNA超螺旋的为什么没有

DNA浓度很低吧,沉淀多不一定DNA纯度就高,有可能蛋白质也很多,提DNA的过程中蛋白质有过多残留。跑电泳不知道你的buffer那条线有没有,如果也没有的话也许就是电泳的 *** 作过程中出现问题了。

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