sod酶液颜色

sod酶液颜色,第1张

Sod酶液是一种含有钠离子的酶液,在水溶液中呈现出无色或淡**的颜色。然而,如果Sod酶液发生氧化反应或受到其他化学反应的影响,其颜色可能会发生改变。

如果Sod酶液遭受氧化反应,它的颜色可能会变成深**或棕色,这是由于氧化导致的产物溶于液体中,从而导致了颜色的改变。此外,如果Sod酶液受到酸碱反应的影响,其颜色也可能会发生变化。例如,如果Sod酶液受到强酸的影响,它的颜色可能变成红色或橙色,而受到强碱的影响则可能导致其变成绿色。

总的来说,Sod酶液的颜色取决于其化学性质和环境条件,因此在使用Sod酶液时需要保持其稳定性和纯度,避免颜色的变化对实验结果产生影响。

[原理]

SOD的活力测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力。在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧化酶法,邻苯三酚法,化学发光法,肾上腺素法,NBT-还原法,光化学扩增法,Cyte还原法等。其中改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。化学发光法和光化学扩增法不适用于测定Mn-SOD,但对于Cu/Zn-SOD反应极灵敏。Cyte还原法用于Mn-SOD活力测定结果稳定,重复性好。但专一性和灵敏度不够理想,而且需要特殊仪器,实际应用受到限制。亚硝酸盐形成法与CN—抑制剂或SDS处理相结合,应用于Mn-SOD测定,灵敏度比Cyte还原法提高数倍,而且专一性强,重复性好, *** 作方便,不需要特殊仪器和设备,易于实际应用和推广,是目前较好的测定方法之一。

在一般情况下,SOD酶活性测定只能应用间接活性测定法。本实验采用邻苯三酚自氧化方法。

邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2 -,生成带色的中间产物,反应开始后反应液先变成黄棕色,几分钟后转绿,几小时后又转变成**,这是因为生成的中间物不断氧化的结果。这里测定的是邻苯三酚自氧化过程中的初始阶段,中间物的积累在滞留30~45s后,与时间成线性关系,一般线性时间维持在4min的范围内,中间物在420nm波长出有强烈光吸收。当有SOD存在时,由于它能催化O2 -与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此,通过计算即可求出SOD的酶活性。

酶活力单位定义:在25℃恒温条件下,每毫升反应液中,每分钟抑制邻苯酚自氧化率达50%的酶量定义为1个酶活力单位。

[试剂和器材]

1、试剂

(1)pH82、50mmol/L Tris-HCl

称取Tris 061g,EDTA-2Na 0037g,用双蒸水溶解至80mL左右,用HCl调节pH =820(用pH计校正),最后定容至100mL。

(2)10mmol/L HCl

(3)50 mmol/L邻苯三酚

称取邻苯三酚0063g,用10mmol/L HCl溶液溶解,定容至10mL,避光保存。

(4)SOD样液

2、器材

(1)恒温水浴槽

(2)紫外分光光度计

(3)试管、刻度吸管、微量注射器

[方法和步骤]

1、邻苯三酚自氧化速率的测定

取两支试管按下表加入25℃预热过的缓冲液,然后加入预热过的邻苯三酚(空白管用10mmol/L HCl代替邻苯三酚 ),迅速摇匀,立即倾入1cm比色杯中,在325nm波长处测定光吸收值,每隔30s读数一次,测定4min内每分钟光吸收值的变化。要求自氧化速率控制在每分钟的光吸收值为007(可增减邻苯三酚的加入量,以控制光吸收值)。

试剂 空白管(mL) 自氧化管(mL)

pH82、50mmol/L

Tris-HCl 298 298

10mmol/L HCl 002 001

50 mmol/L邻苯三酚 - 001

2、SOD样液的活性测定

样品管取代自氧化管。样品管测定时先加入预热的待测酶液,再加邻苯三酚。其余步骤同邻苯三酚自氧化速率的测定。

试剂 空白管(mL) 样品管(mL)

pH82、50mmol/L

Tris-HCl 298 298

10mmol/L HCl 002 -

SOD样液 - 001

50 mmol/L邻苯三酚 - 001

(3)计算

sod是一个阿拉伯语字母名称,写成ص。

阿拉伯语的顶音是主副调音(articulation)并用的辅音。以“ص”为例,发音时主调音方法跟 [s] 相同,同时起作用的还有副调音方法,即舌根抬高。这种主副调音方法并用说起来比较复杂,但是实际作用效果相当于在发辅音时舌面下凹,也就是说,对于学习阿拉伯语的学生来说不必花费力气掌握主副调音的方法,只需练习发出顶音的主调音方法对应的非顶音时加上一个舌面下凹动作即可,依然以“ص”为例,练习发音时,先发出“س”,然后舌面下凹,就发出“ص”了。当然学会之后,可以一步到位发出顶音,不要再用非顶音作为前引再发出顶音了。

舌尖轻顶上齿与牙龈之间的部位比较容易发得准确,阿拉伯人这四个音的发音非常相近,并不像中国老师教得那么清楚。不要受中文和英语的影响,多听多练就好。

希望我能帮助你解疑释惑。

 SOD是超氧化物歧化酶,属于金属蛋白酶,按照结合金属离子种类不同,该酶有以下三种:含铜与锌超氧化物歧化酶( Cu-ZnSOD )、含锰超氧化物歧化酶( Mn-SOD )和含铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD )。三种SOD都催化超氧化物阴离子自由基,将之歧化为过氧化氢与氧气。

 SOD能专一地清除体内有害的自由基,以解除自由基氧化体内的某些组成成分而造成的机体损害。如氧中毒、急性炎症、水肿、自身免疫性疾病、辐射病等疾病都与活性氧的毒性有关。实验证明:SOD 能够清除自由基,因此可消除上述疾病的病因。此解毒反应过程是两步:

第一步是:作为有害物质的超氧阴离子在SOD的作用下和氢离子反应,生成另一种物质——过氧化氢;第二步是,过氧化氢又在过氧化氢酶的作用下和氢离反应,最终生成了一种对人体无害的物质——水。

第二步是:人体清除第一步反应所生成的过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶体,因而作为治疗手段的药用SOD若与过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶合并使用,其治疗效果将更好。

SOD作为超氧阴离子的整合剂,它既是目前临床上常用的治疗药物,可以制成SOD含片。例如谷奥SOD 含片,能有效的俘获自由基,抵御自由基对机体蛋白质的破坏,从而导致老年常发的三高并发症。

SOD的具体作用有:

     1、清除自由基、提高免疫力、改善睡眠、增强记忆力、延缓衰老。快速催化人体自由基发生歧化反应,当它与有害自由基﹙如超氧阴离子自由基、羟自由基、四氯化碳及一些含氧反应性高的活性物质等﹚相遇时,促使超氧自由基分解,将它变成对人体无害的水分子和氧分子,消除组织细胞脂质过氧化。保护部分对生命物质和生理机能有益自由基(如一氧化氮)维持机体自由基的平衡,深度调节睡眠质量,增强记忆力,提高机体的免疫力,抵抗疾病,激发青春活力,延缓衰老。

      2、 有效降低血脂、血压、胆固醇、血粘度、预防老年性痴呆。SOD含量逐渐降低,氧自由基不断产生,与血管壁中蛋白质发生交联反应,使小动脉血管壁增厚变硬管腔狭窄,血管内阻力增加,血液粘稠,从而引发了各种心脑血管疾病。SOD进入血液中将沉积的自由基清除,使沉积的脂蛋白重新变成游离状态,迅速提高氧的利用率并改善末梢血流量,降低心肌脂褐素。服用SOD可预防和治疗心血管疾病。

    3、 增强肝胆功能氧自由基对生物膜的脂质过氧化作用引起肝细胞膜伤害,导致肝细胞变性和坏死,破坏肝组织结构,损伤肝脏。SOD能降低血液中的毒素水平、防止肝昏迷、降低血氨、减轻肝负担,改善肝功能。

     4、 预防老年性白内障,提高视力。活性氧自由基在眼内产生过多,引起眼内蛋白质改变,尤其是A-晶体蛋白和B-晶体蛋白发生交联变性,同时还可使晶状体血浆膜发生过氧化,形成不溶性的高分子产物聚集在晶状体中间,各种酶亦因此而失去活性,从而导致白内障的形成。补充SOD可预防白内障形成,提高视力。

    5、 对糖尿病有明显的恢复作用。

   糖尿病是一种常见的有遗传倾向的内分泌代谢性疾病,其 基本病理为绝对或相对的胰岛素分泌不足引起的糖、脂肪及蛋白质等代谢紊乱。患者SOD含量明显下降,血浆过氧化脂质和过氧化氢明显升高,久病后常见心血管、眼、肾、神经等病变。因而在治疗时补充SOD,受自由基 *** 作胰小岛细胞开始恢复活力并分裂出新的胰小岛细胞,胰岛素分泌也变得旺盛起来。对预防并发症、保护胰岛B细胞分泌胰岛素等起着重要作用。

    6、 调节女性生理周期,推迟更年期,防治前列腺炎。

   SOD具有超强的抗氧化能力,可抑制前列腺素及白三烯等炎症因子的合成和释放。服用SOD后,能迅速到达前列腺病灶周围,直接穿过前列腺脂膜的屏障作用,直达病灶。SOD能彻底抑制前列腺素的PGE2的释放,来改善前列腺炎症,激活前列腺增生组织细胞内溶酶体的活性,使增生组织细胞萎缩,从而使前列腺处于真正健康状态,重新发挥其功能,使泌尿、生殖两大系统运转恢复,使其达到排尿正常,同时从生理上调节、修复被自由基氧化的性腺体,提高肾动力酶的活性,达到性功能及生理周期康复的目的,从根本上解决了前列腺患者从心理到生理上的痛苦。

    7、 提高关节活动能力,防治骨性关节炎、类风湿性关节炎。SOD能明显增强握力,缩短晨僵时间,减轻关节疼痛和肿胀,并降低血沉,改善关节外形,提高关节活动能力。

8、 有效预防肿瘤,癌症的发生发展自由基可以引起DNA的氧化,破坏或发生交联改变,使核酸变性,DNA发生空变,单联断裂,从而影响信息传递的功能以及转录复制的特性,导致蛋白质合成能力下降产生合成差错,最终导致基因突变和癌变。另外,癌症患者在放疗和化疗过程中,由于放射性物质和化学药物均可诱发产生过量的活性氧自由基,不可避免地发生放疗和化疗综合症,像脱发、炎症、尿失禁、肠胃功能紊乱。服用SOD可以预防肿瘤和癌症的发生发展,而且还可以缓解放疗,化疗所产生的副作用。

9、 防治黑色素形成,美白祛斑,去皱,去痘。色素沉着(包括酒刺沉积斑、老年斑、雀斑、黄褐斑及色素沉积症)的产生最主要的原因是氧自由基,氧自由基作用于机体中的不饱和脂肪酸,产生不稳定的过氧化脂质,进而产生醛类,特别是丙二醛,它能迅速进攻磷脂,蛋白质发生反应,形成色素沉着。SOD有效清除氧自由基,预防色素沉着,同时也能清除沉积在皮肤中的色素沉积物,增加皮肤的湿润度,使皮肤不绷紧。

10、 增强创伤愈合能力SOD具有超强抗氧化、抗炎症功能,快速修复受损细胞组织。达到迅速愈合作用。

    美国人Mccord and Fridorich在1968年提出氧自由基和SOD理论,首次从牛血中提取SOD。中国科学家自由基理论与SOD泰斗方允中、兰开慰、丁克祥等也从牛血中提取SOD获得成功。当时在以色列、德国、荷兰、澳大利亚等国相继从动物血液里获取动物性SOD成功并用于药品,在那届的汉城奥运会上,动物性SOD制品用于竟技体育取得了非常理想的效果。但由于动物性SOD的排他性、不易常温保存、爱滋病等血液中病毒的交叉感染及其他潜在危险,所以国际卫生组织呼吁:立刻停止动物性SOD的使用。故从植物中提取超氧化物歧化酶(SOD)已成为国内外专家研究的新课题。

    自1994年12月全国首届叶蛋白学术研讨会在长沙召开,在党中央、国务院关于加强科技创新,发展高科技,实现产业化方针政策的指引和全国中蛋白会议35位专家教授论证的启示下,串叶松香草的应用价值得到首肯和支持。

     生物医药及化工方面的专家教授研究表明,直接从串叶松香草植物的鲜茎叶提取的蛋白制品,是无毒无害的天然高级营养食品。其串叶松香草高含量的超氧化物歧化酶(SOD)具有保健功能和药理作用,制成超氧化物歧化酶(SOD)药物胶囊,其临床效果十分显著。因此串叶松香草叶蛋白(LPC)和超氧化物歧化酶(SOD)的研究开发于2001年被国家计委、科技部列入中国高新技术产业化重点项目。

2004年4月,国家发改发委、科技部、商务部联合行文,制定了《当前优先发展的高技术产业化重点领域指南》,《指南》中第31条明确指出:发酵工程关键技术及重大产品,其中包括超氧化物歧化酶,并列入了国家“十一五”规划。由此可见,迅速开发SOD系列产品,是落实“十一五”规划,加快发展高新技术产业的迫切需要。

1995年湖南省沅江市科学爱好者秦和沅试种串叶松香草成功,并深入研究叶蛋白和SOD。1997年7月2日《人民日报》以“这场革命静悄悄”为题,报道了全国串叶松香草协作组长、中国科学院植物研究所袁国弼答记者问,串叶松香草具有生长快、再生力强、营养价值高等特点。由于疯牛病的影响,欧盟从1997年1月起禁止使用动物SOD,国内外专家学者把眼光投向植物SOD领域,植物SOD 的开发研究开始彰显其重要性。我国近年来在植物SOD 的研究领域有大量相关进展报道。其中全国植物SOD工业化生产技术先驱者秦和沅教授 ,经过10多年的研究,成功的从串叶松香草中提取了超氧化物歧化酶(SOD)从根本上克服了动物超氧化物歧化酶病毒交叉感染的弊病。2002年11月4日,该研究成果已通过湖南省科技厅鉴定,认为该研究项目“属国内首创,属国内领先水平。”植物SOD的应用开发成为当今SOD领域的研究主流。

串叶松香草又名神州草、法国香槟草为优质的药食两用天然原料,是北美印第安人的传统草药。MGrieve 所著《现代草药》报道:“该草的根可入药,用做强壮剂或补剂、具有抗疲劳、改善体质的作用,具有利尿、发汗、补虚的作用”。湖南农业大学食品科技学院测得干草蛋白质1783~2215、叶蛋白773%、每克干草含S O D 活性单位为2 85 U 、黄酮286 m g,氨基酸组成合理;其草本身对顽咳、哮喘、肺、肝以及内伤、溃疡各类杂症等均有疗效,在民间常用于沐浴、熏蒸、治伤风感冒等各种保健药用及疾病治疗的传统草药。另外,并用作药酒、药用乳胶和口香糖的原料。其草本身最大的优势就是蛋白质含量丰富,氨基酸组成合理,仅次于大豆。尤其是限制性氨基酸赖氨酸和超氧化物歧化酶(SOD)的含量特别高,因此生物价值很高。

   免疫诊断试剂工程国家实验室、香港分子生物实验室、普济生物医药集团首席专家 左有权研究员为首联合湖南食状源生物科技有限公司组织核心技术科研团队经过十年的艰苦研究,一直兢兢业业地研究各种天然产物有效成分提取工艺、借鉴吸收国际最先进的设计理念,自主知识产权创新工艺双相酶法SOD提取与酶固定化修饰技术应用,在工艺表达中,对每项工艺步骤的细节反复实验和持续创新,不断设计和优化工艺结构,能有效控制和减少工业成本,该项目技术具有工艺安全环保(无污染)、产能大(能工业化)、效率高(提取率高)、品质优(纯度、比活性高)等特点的现代生物酶工程先进技术。

在同行业领域的提取技术工艺方面有着重要突破和无可比拟的优势。已申请两项国家发明专利:一种从植物(神州草)中提取超氧化物歧化酶(SOD)的方法:专利申请号为ZL201310164284·3。目前经过分子改造和酶修饰技术PTD导肽转蛋白结构域的方法制得超标准品生物制品(药)级高纯度比活性(超千万级Cu/znSOD冻干粉)Cu/Zn-SOD比活性达到2900万级(29×10<7次方>u/g),通过国家权威机构广州分析测试中心检测,报告编号2016002855-7b已申请专利:一种微球生物新材料包裹SOD活性药物载体制备方法(2016103587990)。为我国药用酶与治疗酶制剂产品开发提供科学研究,填补应用空白。已在多种植物中提取SOD获得成功,(详见如下图和国家权威检测机构中国广州分析测试中心检测报告)。

   目前从植物中提取超氧化物歧化酶(SOD)酶活性和比活性很难突破300万级国际单位。通过双相酶法提取和酶固定化修饰技术生产的植物SOD产品经第三方权威检测机构中国广州分析测试中心鉴定酶活性达到830万级国际单位(83×10<6次方>u/g),比活性纯化达到2900万级国际单位(29×10<7次方>u/g蛋白),产品酶活性及比活纯度己超出美国Sigma标准样品300万级国际单位(30×10<6次方>6u/g蛋白SOD酶活性26倍,蛋白比活性:97倍,同批次产品误差小于3%。超国际标准,填补国内空白。

  公司已与香港分子生物实验室(MBLHK)签订技术研发合作共建联合研发中心,并授牌公司“蛋白质与酶工程国际技术合作项目”。

植物性SOD能够有效清除血液内的垃圾,是清除体内自由基的高效清除剂,能催化还原脂质过氧化物,以抑制过氧化作用和清除自由基的链锁反应,提高氧的利用率并改善末梢血流量,降低心肌脂褐素,明显升高机体中SOD的活力,可抗氧化、防止衰老、抑制基因突变、消除疲劳及延缓衰老过程,可谓是人体垃圾的清道夫,是人体第一道防线上的卫士,其与人体疾病的关系具体表现为:

        1、人体SOD的减少氧自由基积聚诱发心血管疾病:氧自由基的不断产生,与血管壁中蛋白质发生交联反应,使小动脉血管壁增厚变硬管腔狭窄,血管内阻力增加,血液粘稠,从而引起高血压、动脉硬化、心胶痛、冠心病、心肌缺血、脑出血、脑血栓等心血管疾病。SOD能阻断血管壁的交联反应,服用SOD制品可预防和治疗心血管疾病。

        2、氧自由基引起急性肺气肿:急性肺气肿是氧中毒最常见的症状。这是由于高氧张力引起肺部功能紊乱所致。当高浓度氧进入肺后,肺泡巨噬细胞首先受到损伤,释放出一些因子能激活多形核白细胞和嗜中性细胞,后两者即能产生大量活性氧自由基,损伤支气管内皮细胞,改变肺泡微血管结构及基本功能,其结果使肺损伤导致肺气肿。SOD有抗氧化功能,服用SOD制品可预防和治疗肺气肿。

        3、氧自由基引起自身免疫性疾病:氧自由基对蛋白质的氧化破坏以及使其发生交联改变,导致某些异性蛋白的出现而启动机体免疫变态反应,形成自身免疫疾病。常见的有类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、皮肌炎、局限性肠炎、非特异性疾病(如非典型性肺炎、非典型性肝炎)后天获得性免疫功能缺损(如爱滋病)等,SOD能增强免疫功能。SOD制品对全身免疫性疾病有特殊的作用。

        4、糖尿病与自由基和SOD的关系:糖尿病是一种常见的有遗传倾向的内分泌代谢性疾病,其基本病理生理为绝对和相对的胰岛素分泌不足引起的糖、脂肪及蛋白质等代谢紊乱。糖尿病患者SOD活性明显下降,血浆过氧化脂质和过氧化氢明显升高,久病后常并发心及血管、眼、肾、神经等病变。自由基参与了糖尿病的的发生发展。SOD在糖尿病恢复过程中起着十分重要的作用,因而在糖尿病治疗时补充SOD,对预防并发症、保护胰岛β细胞分泌胰岛素等起着积极的作用。

        5、氧自由基可导致老年性白内障的发生和晶状后纤维组织的形成:活性氧自由基在眼内产生过多,引起眼内蛋白质改变,尤其是A-晶体蛋白和B-晶体蛋白发生交联变性,同时还可使晶状体血浆膜发生过氧化,形成不溶性的高分子产物聚集在晶状体中间,各种酶亦因此而失去活性,从而导致白内障的形成。补充SOD可预防白内障形成。

       6、氧自由基的过度积累可诱发癌症:自由基可以引起DNA的氧化、破坏或发生交联改变,使核酸变性,DNA发生空变,单联断裂,从而影响信息传递的功能以及转录复制的特性,导致蛋白质合成能力下降产生合成差错,最终导致基因突变和癌变。另外,癌症患者在放疗和化疗过程中,由于放射性物质和化学药物均可诱发产生过量的活性氧自由基,不可避免地发生放疗和化疗综合症,像脱发、炎症、尿失禁、血尿、肠胃功能紊乱、痉挛等,SOD不但可以预防癌症的发生发展,而且还可缓解放疗,化疗所产生的负作用。

        7、氧自由基与皮肤病的关系:色素沉着(包括酒刺沉积斑、老年斑、雀斑、黄褐斑及其色素沉积症)的产生最主要的原因是氧自由基,氧自由基作用于机体中的不饱和脂肪酸,产生不稳定的过氧化脂质,进而产生醛类,特别是丙二醛,它能迅速进攻磷脂,蛋白质发生反应,形成色素沉着。SOD有效地清除氧自由基,预防色素沉着,同时也能清除沉积在皮肤中的色素沉积物。

        8、氧自由基加重急性炎症和水肿:炎症感染时,嗜中性粒细胞对微生物进行吞噬时,产生大量的活性氧自由基,破坏细胞的结构,使炎症进一步加重,采用SOD制品治疗,可缓解疼痛,从根本上治愈关节炎、肩周炎等症状。

        9、肝胆系统疾病与自由基的关系:氧自由基对生物膜的脂质过氧化作用引起肝细胞膜损害,导致肝细胞变性和坏死,破坏肝组织结构,损伤肝脏。SOD能降低血液中的毒素水平、防止肝昏迷、降低血氨、减轻肝负担,改善肝功能,对肝炎,肝肿大、肝腹水、肝纤维化、脂肪肝有明显功效。补充SOD,对肝胆疾病有奇效。

        10、肠胃系统疾病与自由基的关系:目前资料表明,由普通性胃炎、萎缩性胃炎、浅表性胃炎加重到胃癌的病理过程,实际上是自由基沉积加剧或含量增高的过程,利用SOD能特异性清除自由基缓解疼痛,防治因抗生素、放疗、化疗引起的综合症以及结肠炎、腹泻、便秘等有显著功效。

    综上所述,伴随着中国消费者对健康与疾病认知与意识,越来越多的消费者对安全、健康、有效的保健方法更加关注。高科技发展是永无止境,同样SOD行业的发展也不会停止。SOD产业给传统的一些相关行业带来焕然一新的改革和不一样的业绩,斐然成为人们广泛关注的焦点之一。呼吁广大的科研工作者,在未来的SOD实验应用中除研究外,更应对相关市场进行研究,阐明机制。只有这样才能使我国现有SOD的应用持久深入,才有可能进而提高到国际先进水平。成为全球SOD发展史上最光辉的一页。

以上就是关于sod酶液颜色全部的内容,包括:sod酶液颜色、如何用邻苯三酚法测定超氧化物岐化酶的活性、sod文件如何打开等相关内容解答,如果想了解更多相关内容,可以关注我们,你们的支持是我们更新的动力!

欢迎分享,转载请注明来源:内存溢出

原文地址: http://outofmemory.cn/web/9499684.html

(0)
打赏 微信扫一扫 微信扫一扫 支付宝扫一扫 支付宝扫一扫
上一篇 2023-04-29
下一篇 2023-04-29

发表评论

登录后才能评论

评论列表(0条)

保存