计算的话,“GBT 21805-2008 化学品 藻类生长抑制试验”,搜索一下这个pdf,里面有讲
*** 作系统和配色方案:WIN7 Home Basic
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- Microsoft OfficeExcel 2010
- IBM SPSSStatistics 19可计算IC50
- GraphPad Prism 5可计算IC50,本讲推荐
- Origin851
任务:绘制量效曲线,计算IC50
IC50:半数抑制浓度(对应左图),Y轴的研究指标随浓度递减。
EC50:半数有效浓度(对应右图),Y轴的研究指标随浓度递增。
右图其实是把Cell Inhibition当成药物的效应,与药物浓度呈正相关。
其实对于细胞毒实验,两者是相等的。
如果药物有抑制细胞活性的作用,习惯上称之为IC50(称呼而已)。
实例 *** 作1细胞毒实验计算IC50
· 细胞毒实验:SRB法,MTT法
· 阴性对照组Concrol:给药浓度为0的含细胞的孔,实验中以该组细胞活力当成100%。
· 空白组Blank:无细胞的孔,用于吸光度的调零(扣掉96孔板自身的一点儿吸光度)。
拓展知识:计算IC50的其他方法
方法1:前面已演示,用Excel计算Mean,SD和N,转换成百分数后用GraphPad计算。注意选择normalized Response-Variable slope。
方法2:XY→Use sample data→Dose response,直接将吸光度值输入GraphPad近似计算。选择response-Variable slope。快速,但有近似,有主观成分
方法3:使用SPSS,分析→回归→Probit。
方法4:使用Excel,对中间呈线性的几个点进行线性拟合,用线性方程来近似计算。简易,但有近似,有主观成分
因为拟合的函数曲线并不能保证都通过所测定的点,其次IC50(EC50)附近的点并不都连成直线,所以计算误差较大。IC50(EC50)计算解决了以上问题。支持曲线图的复制、粘贴及图上上文字的编辑。在保证试验数据精度的前提下可以确保在IC50(EC50)周围的曲线的高精度,由此算得的IC50(EC50)可以保证是高精度的IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一物或者物质(抑制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种物诱导肿瘤细胞凋亡50%,并自动生成曲线图、曲线方程和IC50(EC50)值,决定系数R2=100。IC50和EC50的计算一般需要测定5个以上的点,再通过曲线拟合得到函数计算而得,或者假设IC50(EC50)附近的点连成直线计算而得等,但这都存在较大的误差,所建立的函数能完全通过IC50(EC50)附近的3个点。本输入可以为多组试验数据,将自动取最靠近IC50(EC50)处的三个点进行二次曲线拟合,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对物的耐受程度
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