杂交育种的过程

杂交育种的过程：

1、首先选择父母本，父母本的选择主要取决于育种目标和目的，亲本植物必须从当地进行挑选，而且一定要适合当地条件。

2、第二步是去雄，如果自交系材料在正常条件下生长就需要去雄，去雄就是将雌亲本雄蕊在开裂散落之前去除。单性生殖植物基本上不需要去雄，但双性生殖或自花授粉植物需要去雄。

3、套袋是植物杂交的第3步，去雄的雌花或花序一定要立即套袋，避免外来花粉对其进行授粉。套袋的制作材料非常广泛，可以选择普通的纸、牛油纸、玻璃纸或细布，最常用的是牛油纸。

4、去雄后的花朵还要在套袋后贴上标签。一般使用3厘米的圆形标签或约3×2厘米的矩形标签，然后将其用线系在花或花序的基部即可。标签上的内容要简洁但必须涵盖以下内容：去雄日期、杂交日期、母本名称后加叉号，父本名称等。例如，C×D表示C是母本，D是父本。

5、杂交后的果荚或穗子一定要及时收获，并在完全干燥后进行脱粒，然后将获得的种子跟原始标签一起保存。在下一个季节来临时，可以将储存的种子进行播种，这就是F1代植物。F1代植物是杂交种子的后代，也就是杂种。

杂交育种和诱变育种有什么区别

1、 *** 作不同

杂交育种是将两个或多个品种的优良性状通过交配全部集中在一起，然后再经过选择和培育，获得一个新品种。诱变育种是利用物理或化学因素处理生物，使生物产生基因突变，利用这些变异培育成新品种。

2、原理不同

杂交育种的原理主要是基因重组，通过基因重组然后产生新的基因型，从而培育新的优良性状。诱变育种的原理是基因突变。

3、优点不同

杂交育种的优点就是可以将两个或多个品种的优良性状集中诱变育种。诱变育种的优点是可以在较短时间内获得更多优良性状。

1、使用地高辛标记的核酸探针进行石蜡切片的RNA原位杂交第一天

1） 二甲苯于37℃脱蜡2次，每次15分钟；

2） 无水乙醇浸泡2次，每次3分钟；

3） 95%乙醇浸泡2次，每次3分钟；

4） PBS清洗3分钟；

5） 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟；

6） PBS清洗10分钟；

7） 加入胃蛋白酶25ul/ml，37℃孵育15分钟；

8） PBS清洗2次，每次3分钟；

9） 0.2N的HCl孵育30分钟；

10）PBS清洗2次，每次3分钟；

11）0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟；

12）PBS清洗2次，每次5分钟；

13）预杂交缓冲液孵育30分钟；

14）准备核酸探针混合物：使用预杂交缓冲液稀释探针，85℃加热5分钟，置于冰块中10分钟；

15）杂交；第二天

16）将玻片置于SSC中2次，每次5分钟以去除封片；

17）PBS清洗3分钟；

18）RNA酶A溶液中（或0.1-1ng/mlPBS中），37℃孵育30分钟；

19）PBS清洗5分钟；

20）室温，2×SSC清洗10分钟；

21）37℃，1×SSC清洗10分钟；

22）37℃，0.5×SSC清洗10分钟；

23）缓冲液A孵育10分钟；

24）缓冲液A（1%正常绵羊血清和0.03%三重氢核X-100）孵育30分钟；

25）加入抗地高辛抗体（1/200的上述缓冲液，来自Boehringer Mannheim），37℃孵育3 小时；

26）缓冲液A清洗2次，每次10分钟；

27）缓冲液B清洗2次，每次5分钟；

28）制成NBT/BCIP暗处保存30-60分钟，显微镜下进行观察，如果背景尚佳，显色时间可延长到16小时；

29）停止缓冲液B的反应，用水进行简单的清洗；

30）固红，脱水以及封片进行核的复染。

2、使用地高辛标记的寡核苷酸探针进行石蜡切片的原位DNA杂交第一天

1） 二甲苯于37℃脱蜡2次，每次15分钟；

2） 无水乙醇浸泡2次，每次5分钟；

3） 95%乙醇浸泡2次，每次5分钟；

4） PBS清洗5分钟；

5） 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟；

6） PBS清洗5分钟；

7） 加入胃蛋白酶25ul/ml，37℃孵育10分钟；

8） PBS清洗2次，每次5分钟；

9） 0.2N的HCl孵育30分钟；

10）PBS清洗2次，每次5分钟；

11）0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟；

12）PBS清洗5分钟；

13）预杂交缓冲液孵育30分钟；

14）准备寡核苷酸探针混合物：使用预杂交缓冲液稀释探针；

15）杂交；第二天

16）将玻片置于SSC中以去除封片；

17）室温，2×SSC清洗10分钟；

18）37℃，1×SSC清洗10分钟；

19）37℃，0.5×SSC清洗10分钟；

20）缓冲液A孵育10分钟；

21）缓冲液A孵育30分钟；

22）加入抗地高辛抗体37℃孵育3小时；

23）缓冲液A清洗2次，每次5分钟；

24）缓冲液B清洗2次，每次5分钟；

25）制成NBT/BCIP暗处保存30-60分钟，显微镜下进行观察，如果背景尚佳，显色时间可长到16小时；

26）停止缓冲液B的反应，用水进行简单的清洗；

27）固红，脱水以及封片进行核的复染。

在中国，一般包括以下环节：①原始材料观察。种植国内外种质资源，进行初步观察研究，以便选取可供利用的杂交亲本。②亲本圃。种植杂交亲本，为便利 *** 作，可采用宽行距点播，按性状归类种植，花期不同的材料要分期播种，以利杂交。③选种圃。种植各世代杂种材料，按预定的杂种后代处理方法进行选择。如采用系谱法则要点播，以利选株。④产量比较试验。种植优良品系，比较其性状优劣、产量高低、品质好坏。需有一定的试验设计，按规格种植，经2～3年试验，最后选出产量高、品质优、综合性状好的少数纯合品种，提交区域试验。在此阶段种植初步参加鉴定试验的品系的地段称鉴定圃。这时的材料数目多，种子少，种植的小区面积小，所得数据仅是初步结果，一般进行1～2年。经鉴定圃选出的优良品系进入品种预备试验或品种比较试验，供试品种数较少，小区面积增大，重复3～4次，一般进行2～3年。参加品种比较或预备试验的材料，可以择优同时进行多点试验及生产试验，并注意作好种子繁殖工作。

育成品种与旧品种的区别以及它的稳定性和表型的一致性，简称DSU。育种程序的安排还因不同国家对品种DSU 要求的标准而异。如美国有些育种单位对品种内一致性要求不严格，一般在F4～F5系统就可不再选择而进入品种比较试验。但英国及西北欧国家则对品种的一致性要求很高，其选择年限就长些。

由于杂交育种一般需7～9年时间才可育成优良品种，现代育种都采取加速世代的做法，如利用温室、异地、异季等条件一年种植2～3代，结合多点试验、稀播繁殖等措施，尽可能缩短育种年限。

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