冰冻切片的制作步骤及每个步骤的要求和作用

冷冻切片 1、取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上冰冻，用吸热器压住组织，至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片（1~3分种）。 2、将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。 3、调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5~10μm间。 4、调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求 *** 作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，以切出完整、平滑的切片为准。切好的组织在干净的玻片上黏附时顺着一个方向稍微用力轻轻一带 ，可避免组织摊片过程中皱折 ，保证组织结构的完整及切片的美观。 注：①包埋剂的选用：包埋剂是对冷冻切片质量一重要影响因素，包埋剂用量要适宜，过多或过少都会影响标本冷冻质量。常用的有三种包埋剂OCT剂、B超藕合剂以及普通胶水。B超藕合剂适用于细胞丰富质地较嫩的组织，普通胶水或 OCT剂适用于纤维丰富质地偏硬组织。 （OCT包埋剂骤冷时固化，其冷冻速度和软硬韧度与组织相近，其还具有水溶性，不影响染色等优点。） ②组织块过小：先将少量胶挤在托架上预先放在冰冻机中冷冻，约30秒钟左右待胶凝固时将小组织放上，组织周围再加一些胶，再次置于冷冻机中冷冻，这样组织被垫高，就能快速切出高质量的切片。 ③冷冻箱及冷冻头的温度高低，要根据不同的组织而定。温度过低会导致组织块过硬，切片碎裂，出现梯田状薄厚不均或空洞；反之，温度过高，组织块硬度不够 ，切片不易成形或成皱褶。数据图1供参考。 ④当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。 另者，调高冰冻点。 ⑤用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻处，于室温存放即可。因为当附贴切片时，从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差，当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时，由于两种物质间温度的差别，当它们碰撞在一起时，分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力，使切片与载玻片牢固地附贴在一起。 如果使用冷藏的载玻片来附贴切片，由于温度相同，没有发生上述的现象。 四、常用冰冻切片苏木精—伊红染色 染色步骤：1、冰冻切片用10%甲醛固定1~5分钟，流水冲洗2分钟，蒸馏水浸洗3分钟。 2、苏木精1~2分钟。自来水快洗。 3、0。5%盐酸乙醇分色1~2秒。 蒸馏水快洗。 4、0。25%~0。5%氨水蓝化，几秒种或至组织变蓝，自来水洗30秒~1分钟。光镜下检查细胞核分色程度。 5、1%伊红1分钟。蒸馏水快洗。 6、80%、90%、95%乙醇速洗，每级数秒到十几秒。光镜下监控细胞核与细胞质量颜色对比。 7、100%乙醇2次，每次1~2分钟。 8、二甲苯2次，每次1~2分钟。中性树胶封固。 注：①结束阶段的二甲苯作用为透明，其目的是增强标本的折光率，达到光镜下清晰观察染色结果。标本内若含水分可降低其折光率，导致光镜观察细微结构不清楚的结果。 另二甲苯透明后有得于组织细胞的长久保存。 ②HE染色的水洗：整个染色过程中共5处涉及到水洗，但其洗涤程度及作用均有所不同。 苏木精染色前的水洗为蒸馏水浸洗：切忌自来水替代蒸馏水浸洗，否则苏木精染液由弱酸性（棕红色）转变为弱碱性（蓝色），导致“有色沉淀”出现与积累，致使染色结果为黑蓝色。 苏木精染色后的水洗为自来水洗，伊红染色后的水洗为蒸馏水快洗，作用是洗去未与组织相结合的染料成分，即洗去“浮色”。伊红染液为水溶性溶液，浸洗时间长会使组织的伊红颜色减退。 分色后的水洗为自来水快洗，目的是终止分色液（0。5%盐酸乙醇）对组织细胞的分色作用。 过度分色将致使染色强度减弱，影响苏木精与伊红颜色的匹配。 蓝化后的水洗为自来水冲洗，洗掉组织中多余的碱性成分（淡氨水），为伊红染色提供适宜的染色环境。 五、冰冻切片的快速染色法 ① 切片固定30秒-1分钟。 ② 水洗（10秒）。 ③ 染苏木素3-5分钟。自来水冲洗片刻。（在组织上加苏木精染液数滴，放在漂片机上的烤板上加热一分钟。染液不能干） ④分化（1%酸乙醇分化）。 ⑤ 于碱水（氨水）中返蓝20秒。 ⑥ 伊红染色10-20秒。 ⑦脱水，透明，中性树胶封固。 注：固定液的选择 A中性福尔马林溶液 B 95%乙醇 C AF(40%福尔马林10ml,95%乙醇90ml) D Carnoy（纯乙醇60ml，氯仿30ml，冰醋酸10ml） E Clzrke改良液[4]（纯乙醇95ml，冰醋酸5ml） F Bouin液（饱和苦味酸水溶液75ml，甲醛水溶液 25ml，冰醋酸5ml） 6种固定液固定后的组织切片染色效果各有差异，其中C 固定液固定的切片染色效果最好，组织结构清晰，核染色鲜艳，核无明显肿胀，核浆对比度好，镜下与石蜡切片相似（图1）。 D 液、E 液、F 液染色效果均较好，结构较清晰， 核染色较鲜艳，但核有肿胀，核轮廓有些模糊。A 液染色效果较差，组织结构尚清楚，但细胞核肿胀比较明显且境界模糊不清（图2）。B 液染色效果差，核着色不良，结构模糊。 甲醛、乙醇、冰醋酸

这个东西就是个步骤，没啥技术难度。和你说一下网站制作流程吧。

1在纸上或者电脑上画出大概的布局。

2PS细化，做成一个标准的，也就是最后成为网页的。

3用DW切图。就是把里面装饰的地方一张一张的裁下来，然后用DW的table或者DIV给拼起来。

4交给PM写程序。

问题一：网页切图怎么做 网页设计切图 网页切图怎么做？网页设计切图

制作网页，很多的时候，首先要用处理软件制作出网页的效果图。效果图做好是一幅完整的，不可能把这一整张的都用在网页里。把效果图中有用的部分剪切下来作为网页制作时的素材，这个过程就是切图。（当然是用剪切、选择工具也可以，但是用切片工具处理更精确。）

切图的目的就是更加精确的进行网页布局。

photoshop、fireworks等软件都带有切片工具。

问题二：页面设计页面制作 这种背景的页面怎么切图的啊。。。主要是背景怎么整的。。。 目前我无法判断你那些带链接，所以只能大概的给你讲一下（目前文字部分我先不管），具体我拿第三张来讲给你吧。

首先，把所有要做链接的图层都隐藏掉，剩下的层，就可以用来切图，整体背景是蓝色，所以css搞定就行。

其次，背景有一张整体的背景图，这个需要全部单独切下来，上面不要带任何其他元素，就只是这张单独的就好，布局的时候引用为背景！

然后，剩下的就是主体部分，上面的播放视频和文字我就不讲了，简单，底部的汽车促销也切一张大图就好，也简单。

最后，就剩下最难搞的中间部分，大概想了一下，2种方法实现，如下：

1、切成整张大图，需要做链接的地方，画上不规则热区就好了！这种比较简单些。

2、什么样，就切成什么样，每张小图都单独切出来（注意：要做成png格式保存，背景设置为透明），然后写html的时候，用css画出等大的不规则图形，吧当做背景加进去，然后用css绝对定位一下，如有链接加链接，完美实现！

备注：css画不规则图形，网上可以搜到教程，看一看就差不多，不难！

至于其他几张图，比较简单，简单说一下第二张，第二张的其实如果想简单实现，那就除文字和纯背景色外，整张切，然后有链接的地方加热点就好，想做复杂一点，就可以用到我所说的css画不规则图形，纯色的三个纵横条，不用切，css画出来，添加背景色，然后绝对定位就好，其他的该切多大就切多大，然后用css绝对定位，设置好z-index的关系，就ok了！

之前做过很多这样的网站，这都是经验之谈，完全能实现，要有问题再问我！完全纯手打啊~~

问题三：photoshop网页切图怎么用 1、首先需要用photoshop把psd源文件打开，看看源文件的整体布局。源文件是分层的，方便切图的层次。

2、切图的工具叫做“切片”，在左侧面板可以看到。右击可以看到“切片工具”和“切片选择工具”按钮。

3、用放大镜将所要切的部分放大，可以用参考线确定大小，切图是可以沿参考线切。

4、切换到切片工具，沿参考线划出切片，右击可以看到有可以编辑切片的选项，可以设置切片像素大小。

5、切好后就可以单击菜单栏“文件”，选择“存储为web所用格式”选项。

6、选择要存储的切片，然后右上角可以设置的格式、质量大小，设置好以后就可以单击保存了。

7、保存需要保存的切片，选择好路径即可，单击保存即完成。打开保存好的，如图。

注意事项

注意保存时最好自己设置路径，settings选项。

问题四：怎么用ps做html切图 ，详细！ 10分 先切小片然后写代码 不是一句话两句话能说清楚的

问题五：UI 中网页设计切图怎么切 PxCook，目前我还没用上Mac，所以也不知道传说中的Sketch到底多神奇。PxCook在Windows上标注还比较顺手，虽然它还附带切图功能，但是比较鸡肋，不推荐用它切图。

切图工具：

Cutterman 一款PS的插件，切图非常方便，但不支持绿色免安装版本PS，而且对PS版本要求比较高，针对CS 6的已经不维护更新了。推荐安装官方完整版PS cc，然后自行破解。官网上有安装使用教程，自己研究下吧，因为我也是最近才开始接触这款插件。

Part 2 Photoshop

现在常用的几种设计尺寸

1 640960 4时代的尺寸，刚接触APP设计用的是这个尺寸，拟物盛行的时代(现在用这个尺寸设计的应该比较少了吧)；

2 6401136 5/5S/5C，IPhone更新，咱们设计也得跟着与时俱进(应该还有人用这个设计尺寸)，进入扁平的时代了；

3 7501334 6 目前我做设计稿的设计尺寸，IPhone6的尺寸，向下可以适配4，5，向上可以适配6 plus；我记得IP6推出后，我问总监应该用什么尺寸设计，他说用IP6的吧，好适配，切出来就是@2x了，改一改上下都能照顾到。

问题六：网页切图是不是一般只切按钮部分？别的比如背景都用CSS实现？ 一般来说，比如网站logo、网站相关的(例如产品,不规则的形状等)、渐变、特殊字体(宋体、黑体、微软雅黑以外的字体)，几乎都是要切成来做的。切成又分为2胆，一种通过设置css背景，另外一种是直接标签加路径调用。

其他的全部用css来实现。

问题七：ps如何切图成HTML页面 希望给一个详细流程 *** 作 修改好相应的文字与图象之后，我们就将PSD文件输出(X)HTML文件。

首先得先对PSD文件做切片，有两种方法：

①使用工具栏上的“切片工具”，

然后在图象上划出一块一块的区域。

②使用基于参考线的切片，按ctrl+R调出标尺栏，

把鼠标移动到标尺上，按住鼠标左键，移动到图象上，将会看到一条绿色的参考线，如图

将参考线；排好，然后点一下工具栏上的切片工具图表，然后点上面

选项栏里的“基于参考线的切片”。于是在原来的参考线上就变成了一块一块的切片了。

接下来就可以输出了:

①依次选择菜单栏上的“文件”→“存储为Web所用格式”→“存储”。

②接下来就会d出一个“将优化结果存储为”的窗口，如图

在“保存类型”处有个下拉列框可以选择，因为我们要存储为网页的格式，所以选择“HTML和图象( html)”，再选择“保存”就可以输出憨个网页格式的HTML文件与一个包含图象的名为“images”的文件夹。

③如果我们需要输出“div+css的网页”我们还可以这么做：

在“设置”处的下拉列框，选择“其他”

就会d出一个“输出设置”的窗口

在第2个下拉列框处选择“切片”

选择“生成CSS”

单击“好”→“保存”就可以输出一个目前流行的“div+css”的HTML网页。

问题八：网页美工是怎样进行切图的 步骤如下：

1首先我们需要用到的文件就是psd的文件了，一般都是由设计师来完成的，我们切图也就是切psd文件，因为psd文件是分层的，所以想切哪里切哪里。

2之后用Photoshop软件打开psd文件，这里小鱼用CC版本演示，其他版本大同小异。我们打开之后可以双击左侧的放大镜工具，将缩放到原图大小。

3我们要切图，当然用到的就是“切片”工具了，可以点击左边的切片工具，也可以右击这个图标选择更多的相关工具。切图都是用切片工具。

4选择好切片工具之后，想要切哪里就直接拖动鼠标就可以了，然后会出现切线，在切线框内右击还可以d出菜单。

5点击菜单的编辑切片选项还可以对切片进行编辑，可以编辑大小等项目。

6但是如果我们只想要字怎么办，不要底层背景，那么可以用“移动”工具。选择移动工具，在不要的背景上单击，这时候在“图层”面板里面就会选中这个图层。注意勾选上面的“自动选择图层”。

7把选中的不需要的背景前面的小眼睛去掉，最后只剩我们想要的部分。

8然后点击左上角菜单栏的“文件”，选择“存储为web所用格式”选项。

9如果要透明的，那么一般选择png格式，如果要非透明的，那么哪个格式存储的文件小就选择哪个，这样能保证网页加载速度快。然后点击下面的“存储”按钮。

10然后给命名，选择一个保存地址，最后选择“选中的切片”，不然好多没用的都会保存下来。

11最后找到保存好的打开，已经是一个我们想要的了。

问题九：如何把切成HTML页面 用 ImageReady

其次打开你想做切片的

在英文输入法下，在程序界面中按 K 切换到切片工具

在上随意进行切片

按CTRL+ALT+SHIFT+S 将优化结果存储为

保存类型下拉框拉下来选择“HTML和图像”

进行保存

或者使用photoshop的 切片工具 *** 作！

这是教程

wenkubaidu/a

wenkubaidu/6

希望帮到你

问题十：网页切图什么意思，怎么切法 如果你登着QQ

同时按下Ctrl+Alt+A这三个键就可以切图了。

如果没登QQ，系统也有自带的截图功能，就是键盘上的PrtScrSysRq，不过这是全屏截图

然后在开始~所有程序~附件中打开“截图工具”，然后再按下ctrl+print（键盘上的PrtScrSysRq键）即可

切的图可以保存在自己电脑，也可以发给自己的朋友。

谢谢！

1确定好微信小程序的的定位和目的

比如行业，功能，内容，目标用户，目标市场，意向名单，专业作用等。

2洽谈好软件技术研发团队

最好与软件，小程序设计运营技术非常成熟的公司合作，多沟通，确保成品出来达到自己的预期效果

3确定好小程序设计文案资料

包括设计需求，功能项目，表格清单，广告logo，模板栏目按钮，跳转链接，运行逻辑，计算公式，展现方式等。

4小程序设计方案，确定好宣传

交付美工设计，随保持沟通，按照文案和沟通内容进行设计。初版审核，是否需要更改设计细节。敲定设计方案。

5小程序设计切片，程序设计，后台设计

设计稿交付前端切片，程序编辑设计。

6小程序相关资料素材上传，功能设置

添加相关的文本内容，完成小程序。

7小程序测试

进行不同环境测试，表单测试，电话测试，后台测试等。

8申请注册小程序

方法一：通过微信公众号后台快速注册微信小程序

小程序管理，添加，快速注册，认证，绑定。注册要申请一个邮箱，单独设立密码。认证的时候要注意，认证一般使用原公众号认证的资质，直接选择公众号认证就行。

方法二：直接注册微信小程序

在微信公众平台官网首页，点击右上角的“立即注册”按钮。选择注册的账号类型→填写邮箱和密码→激活邮箱→填写主体信息→选择主体→验证→填写管理员信息→完成注册（参考《微信小程序接入指南》）

9填写小程序资料

完善信息，填写微信小程序名字，介绍，上传小程序头像，设置关键词。

10添加管理员

把程序员设置为小程序项目管理员，分配权限。

11上传小程序版本V101

管理员按照微信开放平台指南，在开发管理里面，上传开发版本

12代码审核

版本审核阶段，可在审核版本中查阅。

13审核通过

手机收到“代码审核通过”的信息。

14生成线上版本

小程序版本V101上线，以后就是V102版本了。

15发布版本

设置允许被搜索。可在微信小程序里面，搜索到小程序。搜索名字。

16附近小程序添加

按照营业执照，添加小程序的地点位置。可在此位置附近，搜索到小程序。最多添加10个位置，需与营业执照主体相关才能添加地点。

17添加搜索关键词

添加行业的关键词，方便搜索。目前是自然流量的主要来源之一。

18客服功能

绑定微信号，设置客服，方便在线咨询

19微信支付设置

数据统计，开发管理，二维码等。

20微信小程序上线

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