小片段DNA的PCR扩增程序

138KB还是138bp？你这个先弄清楚。

扩不出来主要是你引物的问题吧。和扩增程序没多大关系。

你变性30s、退火20s，延伸45s就行。

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你这两个引物Tm差异比较大。不过我想在55~57℃退火，用我上面给你的程序应该是能够成功的。一般的real-time PCR的扩增产物也就150bp左右。如果低于55℃还是P不出来，那估计就是你的引物有问题或者模板降解了。

你的i和j一定是int类型的吧。这种类型是有符号类型，是能够存储负数的

而size()返回的是对象的大小，肯定不是负数，所以是unsigned int类型，没有符号位，是无符号类型，不能够存储负数。

有符号位的负数是将2进制中的第一位作为符号位

例如int型的1就是00000001

-1就是10000001

而无符号位的10000001代表的是129

如果你将int型的-1与unsigned int型的1进行比较

程序很可能会将-1当成129进行处理。就会发生-1竟然比1大的结论

所以回给你提示警告

如果你希望不报警，你可以使用unsigned int声明i和j

xor ah, ah ;将ah初始化为0

cmp al, 48 ;将al与'0'比较

jl exitc ;小于'0'则跳转退出

cmp al, 57 ;再将al与'9'比较

ja exitc ;大于'9'则跳转退出

ret ;返回

inc ah ;ah变成1

exitc:

ret ;返回

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