什么是微电泳法?

外加电流通过含解离物质溶液的微电极时，会将微电极内的解离物质从管尖释放出来。如微电极接正极，头皮接负极（外向电流），阳离子物质就从微电极释出。微电泳的解离物质从微电极释出量与它通过的电荷量成正比。常用微电极电流强度来表示解离物质的释出量。

微电泳法使用器材方法

微电极

五、或七管微电极，一般每管尖端直径约1μm，七管总直径5-8μm.。若充灌的 是小分子物质，如NMDA、Glu等，则每管尖端直径可以是0.5μm, 七管总和为3-4μm，这样可使记录管电阻高达5MΩ-10MΩ，周边管达40MΩ-100MΩ，不仅能满足电泳要求，还能记录到较大的电位。若充灌的是大分子肽类，则直径要大一些，一般不能超过10μm，否则易致泄漏，且电痊记录过小。但本法虽然解离量与电流成正比，但不同的微电极或不同的物质的实际释出量有很大差异，且无规律可循。应将微电泳与整体功能结合起来，才能得出正确的结论。

充灌

微电极充灌一般多为较高浓度的NaCl (4mol)或KCl (3mol)以使电极尖端获得高离子浓度，从而得到低阻抗微电极。其中一个周边管充以150mmol/L NaCl作平衡电流用，其余根据需要充不同灌注液。充灌方法有许多种，压力法，充灌注，真空法，酒精法等，最常用的是玻璃纤维法。

充灌液

(1)浓度:增加传导性并减少噪声，可用较高浓度的溶液，以使所要电泳的离子具有较高的浓度和稳定形式一般微电泳溶液浓度为5-500mmol/L不必过大。对于效能很强的化学物质，可用150mmol/L的NaCl作为溶剂，溶液浓度尽量低，以防止因药物扩散引起的生物学效应。

(2)pH值:常用低浓度(0.1N)盐酸或NaOH将溶剂调整到适当的pH值，以增加溶质的溶解度和稳定度。但有些物质，如中性氨基酸难以离子化。此时可参考其pKa值调整，使pH=pKa-1，这可使90%氨基酸离子化。根据经验，一般pH为3.5-4.0。完全不能离了化物质可用微压力法注射。另外，充灌注一定要干净，避免污染。

(3)防止药物漏出，可通过持续施加一个带极性的"迟滞电流"来防止。迟滞电流的极性方向与所要电泳的离子所带电荷相反，这样使得所要电泳的离子向回移动(对抗漏出)，从而使尖端离子浓度降低，一般电流大小应根据实际情况具体调整，一般为10-30nA。有些效能很强的物质则需施加较大的迟滞电流。

(4)注射电流。其大小和持续时间以能产生预期的生物学效应为标准。注射电流的极性方向与迟滞电流方向相反，即和甩要电泳的离子所带电荷相同。

微电泳法常见问题

什么叫电泳漆

电泳漆又叫电泳涂料。早期以阳极电泳涂料为主，目前逐渐被阴极电泳涂料取代。电泳涂料又可分为单组份和双组份两种，目前以双组份为主。从颜色可分：黑色、灰色、白色和彩色。从原料...

什么是电泳？

带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。• 电泳原理： 电泳是电...

怎么去除电泳漆

您说的是烘烤过的呗？一般比较常用是发烟也就是浓，这个便宜一些，哪都有卖，就是 *** 作起来得小心；另外还有专用脱漆剂也可以，不过价格比较贵；再如果又抛丸设备就可以用机器走一遍就OK了。就想到这些，希望能帮到...

毛细管区带电泳法概述

毛细管区带电泳法

【所用设备】主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源，内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的d性石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器，前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH值>3的情况下，其内表面带负电，与缓冲液接触时形成双电层，在高压电场作用下，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动，从而形成电渗流。同时，在缓冲溶液中，带电粒子在电场作用下，以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动，形成电泳。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳和电渗流的矢量和。各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。

目前，毛细管电泳的分离模式有以下几种。

(1)毛细管区带电泳，用以分析带电溶质。为了降低电渗流和吸附现象，可将毛细管内壁涂层。

(2)毛细管凝胶电泳，在毛细管中装入单体，引发聚合形成凝胶，主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质，如葡聚糖、聚环氧乙烷，装人毛细管中进行分析，称毛细管无胶筛分电泳，故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳，下分为凝胶和无胶筛分两类。

(3)胶束电动毛细管色谱，在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基硫酸钠，形成胶束，被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移，达到分离。本模式能用于中性物质的分离。

(4)亲和毛细管电泳，在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基，以亲和力的不同达到分离目的。

(5)毛细管电色谱，是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相，以电渗流为流动相驱动力的色谱过程，此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。

(6)毛细管等电聚焦电泳，是通过内壁涂层使电渗流减到最小，再将样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别为酸和碱，加高电压后，在毛细管内建立了pH梯度，溶质在毛细管中迁移至各自的等电点，形成明显区带，聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器。

(7)毛细管等速电泳，采用先导电解质和后继电解质，使溶质按其电泳倘度不同得以分离。

以上各模式以(1)、(2)、(3)种应用较多。电极槽和毛细管内的溶液为缓冲液，可以加入有机溶剂作为改性剂，以及加入表面活性剂，称作运行缓冲液。运行缓冲液使用前应脱气。电泳谱中各成分的出峰时间称迁移时间。胶束电动毛细管色谱中的胶束相当于液相色谱的固定相，但它在毛细管内随电渗流迁移，故容量因子为无穷大的成分最终也随胶束流出。

其他各种参数都与液相色谱所用的相同。

一、对仪器的一般要求所用的仪器为毛细管电泳仪。正文中凡采用毛细管电泳法测定的品种，其所规定的测定参数，除分析模式、检测方法(如紫外光吸收或荧光检测器的波长、电化学检测器的印加电位等)应按照该品种项下的规定外，其他参数如毛细管内径、长度、缓冲液的pH值、浓度、改性剂添加量、运行电压或电流的大小、运行的时间长短、毛细管的温度等，均可参考该品种项下规定的数据，根据所用仪器的条件和预试验的结果，进行必要的调整。

二、系统适用性试验同高效液相色谱法项下，按各品种项下的要求，进行预试验，并调节各运行参数使达到规定指标，方可正式测定。

三、测定法同高效液相色谱法项下。目前毛细管电泳仪的进样精度较高效液相色谱法低，定量分析时以用内标法为宜。

Zeta电位仪测量方法:电泳法

对许多熟悉利用此法进行高分子分离的人来说，颗粒电泳也是一个类似现象。悬浮于介质中的颗粒被置于一电场中;如果带电他们会在电场产生流动，阳性颗粒朝负极流动，阴性颗粒朝正极流动。然而，颗粒并不是独自流动，他们周围会携带一薄层离子和溶剂。这一分离固定媒介与移动颗粒及其携带的离子和溶剂的界面叫做流体剪切面，而zeta电位正是这一界面的电位。因此zeta电位可以通过测量颗粒在已知电场中的流速来测定。早期的测量仪器(Rank微电泳仪)通过充满误差，慢速度的手动方法观察颗粒，并自动计算样品中zeta电位的分布。大多数系统在水介质中的这一值在±100mV范围内。

电泳仪使用方法

1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。

2.电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。

3.接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。

4.工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。