western blot 二抗是怎么进行级联放大反应的

蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

由于免疫组化的蛋白一般没有变性保留着二级或三级结构，抗体较难结合，所以抗体效价需要较高，而western的蛋白都是变性的，蛋白决定簇基本暴露，所以不需要很高效价的抗体。所以抗体区别在于效价的高低，一般能用于免疫组化的基本都能用于western blot。

western
blot
印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通
过sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（nc膜或pvdf
膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与经辣根过氧化物酶标记（偶联）的二抗结合，最后用ecl超敏发光液试剂检测。如果转印膜上含有靶蛋白，经x
光片曝光、
显影后，则会在x-光片上出现特异性蛋白条带。
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免疫捕获法是一种常用的免疫学实验方法，用于检测样品中特定抗原或抗体的存在，其正常值的范围取决于检测的具体抗原或抗体种类、检测方法和实验条件等因素。
一般来说，免疫捕获法检测结果的正常值是根据一定数量的正常人群样本测定得出的，在同样的实验条件下，正常人群样本的平均值加减两个标准差就是该检测方法的正常值范围。例如，对于某一种特定抗体的检测，其正常值范围可能是01-10 ug/mL。但是，不同实验室或机构可能使用不同的检测方法和标准，因此正常值的范围可能会略有不同。
总之，在进行免疫捕获法检测时，应根据具体的实验条件和参考标准来判断检测结果是否正常。如果您需要进行特定抗原或抗体的检测，建议咨询专业医生或检验机构的医学检验师，以获取更详细和准确的信息。

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