食用菌菌种的贮藏方法

食用菌的贮藏方法 1.低温周期性移植保存方法 将待保存的菌种接种在合适的斜面培养基上，在合适的温度下培养，待菌丝旺盛、长满斜面时取出，保存在3℃-5℃的低温干燥处或4℃的冰箱或冷柜中，每隔4-6个月移植转移一次，视菌种特性而定。在储存过程中，环境温度不能太高，以防止霉菌通过棉塞进入管中。因此，如果使用棉球，可以用干净的硫酸纸或牛皮纸包裹棉球，这样可以减少污染的机会，防止培养基变干。除草菇外，其他食用菌都可以用这种方法保存。 2.液体石蜡储存方法 取化学纯液体石蜡(要求不受潮不发霉)，放入带棉塞的三角瓶中用纸包好，在1kg/cm2的压力下灭菌1小时，然后放入40℃恒温箱中几天，使水分蒸发，直至石蜡油完全透明。将处理过的石蜡油移植到空白斜坡上，在28℃-30℃培养2-3天，即可使用。然后将液体石蜡注入倾斜的试管中，无菌 *** 作保存。注射量应高于培养基斜面1-1.5cm，用胶塞塞紧，固体石蜡密封，在低温干燥处直立保存。储存时间一年以上，低温下可延长储存时间。 3.砂管储存法 将河砂在水中浸泡数次，用60目筛筛去粗颗粒，再用10%盐酸浸泡2-4小时除去有机物，然后用水冲洗至pH值达到中性，晾干备用。同时将贫瘠的土壤或菜园土用水浸泡，使其呈中性。沉淀后，除去上清液，干燥并研磨，用100目筛过筛。将处理后的沙和土按(2-4): 1的比例混合均匀，用磁铁吸出铁。然后分别分装于小试管或安瓿中，每支容量为0.5-2g，用棉塞塞住，用纸包好，灭菌(1.5kg/m2)在无菌条件下向孢子形成的斜面菌种中注入3-5ml无菌水，刮取菌片，制成菌悬液。然后，用无菌吸管吸出菌液，滴入沙管中，直至沙被浸透。将接种过的砂管放入充满干燥剂的true 空干燥器中，连接true 空泵抽几个小时的空气，直到砂变干。真空干燥 *** 作应在孢子接种后48小时内完成，以避免孢子萌发。制备的砂管用石蜡密封，可在低温下保存2-10年。 4.滤纸储存方法 取白色(收集深色孢子)或黑色(收集白色孢子)滤纸，剪成4cm 0.8cm小纸条，铺在培养皿中，用纸包好灭菌(1kg/cm2，30min)。用钩悬法收集孢子，让孢子落在滤纸上。将装载有孢子的滤纸条放入储存试管中，然后将储存试管放入干燥器中干燥1-2天，除去滤纸的水分，直到滤纸的水分含量达到2%左右，然后低温储存。 5.天然基质储存方法 ①小麦储粮法。 将无瘪粒、无杂质的小麦洗净，浸泡12-15小时，加水煮沸15分钟，继续用热水浸泡15分钟，使麦粒胀而不碎。沥干水分，摊开晾干，使麦粒含水量在25%左右。将碳酸钙和石膏混合成熟麦粒(麦粒与碳酸钙和石膏的比例为10 kg: 133 g: 33 g)，混合均匀，放入试管中，每管2-3 g，然后将试管清洗干净，塞好棉塞，灭菌(1.5 kg/cm2，2小时)。无菌检测合格后，冷却后接种试管基质，然后在合适的温度下培养。2年左右转一次。 ②麸曲的保存。 取新鲜麸皮，过60目筛，去除粗粒。将麸皮和自来水按1: 1的比例混合，放入小试管中，每管约1/3高，加棉塞，用纸包好，高压灭菌(1.5 kg/cm2，30分钟)。无菌检查合格后，将斜面培养基上生长的健壮菌株移植到无菌麸曲管中。移栽时注意尽可能把小试管里的麸皮捣实，使其松散，并保持在适宜的温度。 6.生理盐水储存方法 取0.7-0.9g纯氯化钠，放入100% ml蒸馏水中，搅拌均匀，分装试管，每管5-10ml，灭菌(1kg/cm2，30min)。无菌试验合格后，将待保存的细菌放入马铃薯葡萄糖液体培养基中，在适宜的温度下振荡5-7天。无菌 *** 作吸取少许培养菌株，注入已检验合格的生理盐水试管中，用无菌胶塞塞紧，涂上石蜡，室温或低温保存。 7.冷冻真空空干燥法 将培养好的生长良好的菌体或孢子悬浮在由无菌血清、蛋清和脱脂乳制成的菌悬液上，将悬液分装在无菌玻璃安瓿中，每管0.3-0.5毫升，然后用耐压橡胶管与冻干装置连接。安瓿在-30℃ ~-40℃的冷冻罐中快速冷冻，然后在冷冻状态下抽/[/k0/。 8.液氮冷冻保存方法 首先将待保存的菌种制成菌悬液备用；其次，准备安瓿瓶，每瓶加入0.8毫升10%(体积比)的防冻剂甘油蒸馏水溶液，然后用棉条(1kg/cm2，5min)灭菌。无菌检查后，连接待存菌，用焰熔法密封瓶口，检查是否漏气。将密封好的安瓿瓶放入冷冻器中，以每分钟1℃的速度缓慢降温，使保存的物品逐渐均匀冷冻至-35℃，之后无需控制冷冻速度。安瓿冷冻后，立即放入液氮罐中，在-150℃ ~-196℃的低温下保存。