1.革兰氏染色时,关键的环节是脱色,脱色不够,造成假阳性,脱色过度,造成假阴性。2.固定时烘烤也要适度,太轻会在冲洗时冲走细菌,过度会破坏细菌形态。
一、实验目的
1.了解革兰氏染色的原理
2.掌握革兰氏染色的 *** 作方法
二、实验原理
根据细菌的细胞壁结构和成分不同,可用革兰氏法将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。阳性菌由于细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞不能酒精脱色,仍呈紫色;阴性菌由于肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,乙醇将细胞壁脱色,细胞无色,碱性品红复染后呈红色。
三、实验材料及仪器
1.实验材料:枯草芽孢杆菌(或大肠芽孢杆菌)、草酸铵结晶紫染色液、碘液、95%乙醇、碱性品红染液、载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、废水缸、胶头滴管、酒精灯
2.仪器:油镜、接种环
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