核酸诊断的常见技术

基因诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应、恒温扩增、基因测序和生物芯片技术。 1.1 原理： 具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程，称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。

1.2 基因探针及其标记： 基因探针是一段与待测DNA或RNA互补的核苷酸序列，可以是DNA或RNA，长度不一，可为完整基因，也可为其中一部分。根据探针的来源和性质分为基因组DNA探针、cDNA探针、RNA探针和人工合成的寡核苷酸探针。作为探针至少必须满足两个条件，一是应为单链（或通过变性形成单链），二是应带有可被示踪和检测的标记。有了合适的探针，就有可能检测出目的基因，观察有无突变，也可根据探针的结合量进行定量检测。选择探针最基本的原则是要有高度特异性，其次也需考虑到制备探针的难易性和检测手段的灵敏性等其他因素。

1.3 常用核酸分子杂交技术： ① Southern印迹杂交；② Northern印迹杂交；③斑点杂交（dot blotting）；④原位杂交（in-situ hybridization）；⑤夹心杂交（三明治杂交）；⑥液相杂交。 恒温扩增技术主要包括链置换扩增法( strand displacement amplification , SDA) 、核酸序列扩增法( nucleic acid sequence-based amplification ,NASBA) 、转录介导扩增法( Transcription Mediated Amplification , TMA) 和滚环扩增法(RollingCircle Amplification ,RCA) 以及环介导等温扩增法(Loop-mediated isothermal amplification , LAMP)等。

LAMP是Notomi 等在2000 年开发的一种新颖的恒温核酸扩增方法,即环介导等温扩增法( loop-mediated isot hermalamplification , LAMP) ,其特点是针对靶基因的6 个区域设计4 种特异引物,利用一种链置换DNA 聚合酶(Bst DNA polymerase) 在等温条件(65 ℃左右) 保温几十分钟,即可完成核酸扩增反应。不需要模板的热变性、长时间温度循环、繁琐的电泳、紫外观察等过程。LAMP 是一种崭新的DNA 扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点,具有替代PCR 方法的可能性。 它们是DNA杂交 探针技术与半导体工业技术相结合的结晶。该技术系指将大量探针分子固定于支持物上后与带荧光标记的DNA样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。

生物芯片技术起源于核酸分子杂交。所谓生物芯片一般指高密度固定在互相支持介质上的生物信息分子（如基因片段、CDNA片段或多肽、蛋白质）的微阵列杂交型芯片（micro-arrays），阵列中每个分子的序列及位置都是已知的，并且是预先设定好的序列点阵。微流控芯片（microfluidic chips）和液态生物芯片是比微阵列芯片后发展的生物芯片新技术，生物芯片技术是系统生物技术的基本内容。

什么是生物芯片呢？简单说，生物芯片就是在一块玻璃片、硅片、尼龙膜等材料上放上生物样品，然后由一种仪器收集信号，用计算机分析数据结果。

人们可能很容易把生物芯片与电子芯片联系起来，虽然，生物芯片和电子芯片确实有着千丝万缕的联系，但它们是完全不同的两种东西。生物芯片并不等同于电子芯片，只是借用概念，它的原名叫“核酸微阵列”，因为它上面的反应是在交叉的纵列中所发生。

芯片的概念取之于集成的概念，如电子芯片的意思就是把大的东西变成小的东西，集成在一起。生物芯片也是集成，不过是生物材料的集成。像实验室检测一样，在生物芯片上检查血糖、蛋白、酶活性等，是基于同样的生物反应原理。所以生物芯片就是一个载体平台。这个平台的材料则有很多种，如硅，玻璃，膜（纤维素膜）等，还有一些三维结构的多聚体，平台上则密密麻麻地摆满了各种生物材料。芯片只是一个载体。做什么东西、检测什么，还是靠生物学家来完成。也就是说，原来要在很大的实验室中需要很多个试管的反应。

人观点：免费核酸检测也很久了，尤其是有疫情的时候，就会增加免费检测点给大家服务，其实并不是真正的免费，只是国家帮我们支付了，今后的免费检测点将逐步减少，开始付费只是回归正常罢了，我就经常做付费检测，混检5块，单检16，是否预示着对于核酸阴性证明将逐步放宽呢？

2、桂东铁路：乘坐火车不再查验核酸证明，进京除外，这个消息有点猛！

11月1日起乘坐火车的旅客(进京除外)不需要查验核酸检测阴性证明。桂东铁路管辖范围：贵广高铁、南广铁路、益湛铁路，41个车站。

个人观点：实实际际的放松已经开始了，相信很快会有很多地方也不再需要核酸证明，我也希望我在的地区早点也实施吧，加上北京已经放行马拉松比赛了，对于整个疫后复苏方向是很大的利好，包括酒店旅游，航空运输都是利好，希望在不久的将来，想去哪去哪，想见谁见谁，想吃啥吃啥！

3、中国联通与腾讯新设合营企业获批，盘中直接涨停，消息太猛了！

个人观点：混改延续中，近期一直传闻中信集团想当腾讯的爹，引发全球关注，没想到联通倒是合作上了，也不知道中信和腾讯到底怎么想的，如果真的有那么一天，按辈分联通就得叫中信叔了，辈份反而整小了，尽管中信和腾讯都在否认也辟谣了，但要说实力，那是没毛病的，中国的大金融控股集团，收点民企简单的跟一样！

4、今日电池级碳酸锂涨1500元/吨，均价报56.75万元/吨，续创历史新高！

个人观点：锂电材料已经接近57万了，如果再涨就奔向60万了，快停一停吧，如此下去令车企们不寒而栗，最后还是要转移至消费者手里，随着市场情绪回升，那么锂矿及锂电池方向也将继续反d！

5、多家券商否认研究所或分析师曾发布疫情政策调整相关内容！

个人观点：市场上的真假消息太多，且不排除借消息或制造消息来炒作股票，很多消息真假难辨谨慎看待，券商研究员的嘴可不是一般的黑，尤其臭名昭著的中信研究员更胜一筹，他们说的话反着听就完了，一个辟谣把早盘追高生物医药的股民给坑惨咯，大多冲高回落，更有天地杀的！

6、美国要求日本等国采取措施对中国实施半导体的出口限制 ！

个人观点：先不说老美为了保持霸权主义，处处为难于我们，就说作为美国的小弟有哪几个得到真正的好处了，卖油卖气发财可是独吃，打架斗殴就得带上人家，更气人的是德国、英国、日本这几个铁杆兄弟，今年被美国坑成啥样了，日本也不傻吧，心里肯定想美国总是以打压他国之名，行割兄弟韭菜之实！

今天市场简单总结：

1、久违的万亿成交重现，大盘指数重回3000点，上午情绪风领涨，下午机构风增强，二者合力市场向上！

2、最热短线题材第一梯队：供销社、元宇宙，明天进入龙头晋级赛，刚开始炒作，后面龙头股还有大空间！

3、最热题材第二梯队：数字经济、医疗医药，主要还是反复活跃状态，消息面要多留意，疫情是否真有放开意思，也关系消费复苏方向！

4、机构风最强：赛道的新能源、汽车，消费的白酒都是连续两日最强风口，那么接下来赛道会继续走强，白酒可能要震荡咯！

5、大金融方向还没大涨，所以指数未进入加速状态，期待大金融别大涨也别大跌，稳着震荡上行就好，毕竟也没有大涨的逻辑！

6、北向大幅流出却未能阻止市场大涨，可能也是规避晚间美联储会议，不管怎样，3000点是A股的起涨点，干就完了！

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