pcr仪touchdown程序如何设置

首先是开机打开主页面-----按C键（programme）进入到---列表页面-----通过方向键选择一个subdirect-----按enter进入-----输入你的programme no 和name----再enter----设置lid temp:99度和preheating: on----继续按enter进入---输入

1：94度 5min

2：94度 1min

3：65度 1min（然后连按向右的方向键3下，进入到另一个界面，在

标闪烁处（也就是3的后面）输入-0.5（其上方为dt），

其他的不管，然后，再连续按enter键回到编程的主页

面，此时（65 度 1min 后面会显示一个加号）

4：72度 1min 2 19（Biometra PCR 本身加一个反应即20个循环）

5：94度 1min

6： 55度 1min

7： 72度 1min 5 4（Biometra PCR 本身加一个反应即5个循环）

8：72度 10min

9 ：4度 10h

好了，一个touchdown程序就设好了，本来想照了图片对应说，但是借别人的相机，界面照得不清楚，只好这样写出来了，也不知道说清楚了没有。

PCR即聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）的缩写，它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物，在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系中DNA复制反复进行，在短时间内可以取得大量扩增产物。其原理是寡聚核苷酸链引物在DNA聚合酶的作用下沿模板延伸，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。

主要的技术步骤是：

（1）DNA变性 加热使靶DNA序列双链解离成单链DNA。

（2）引物与靶DNA退火 适当降低温度，使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。

（3）引物延伸 在DNA聚合酶的催化下，引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后，又可作为模板与引物杂交，并且在DNA聚合酶的催化下，引导合成新的靶DNA链。如此反复进行以上3个步骤，即可使靶DNA片段指数性扩增。

1、在PCR仪软件界面上选择梯度功能，并输入需要控制的温度范围。

2、将所需扩增的样本加入反应管中，注意样本应该保持相同体积和浓度。

3、将反应管放入PCR仪中，启动PCR程序，设定初始温度和PCR循环次数等参数。

4、PCR仪会按照预设的温度范围，在反应管中设置不同梯度温度，并在每个梯度区域完成相应的PCR循环。

5、收集PCR产物并进行后续分析。

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