怎么配置1%琼脂糖胶

怎么配置1%琼脂糖胶,第1张

1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取07 g(05 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成10%琼脂糖凝胶液。

2、胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子将内槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层。

3、室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中。添加1×TAE电泳缓冲液至没过胶板为止。

扩展资料:


储藏温度:常温

商品名很多,常见的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ),Bio-Gel-A(美国Bio-Rad)等。琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下,它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,pH4-9范围内的盐溶液)。

琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。

琼脂糖 Agarose,缩写为AG,是琼脂中不带电荷的中性组成成份,也译为琼胶素或琼胶糖。琼胶糖化学结构由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基单位构成

把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。适于用sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤,若使用5%以下浓度的凝胶,也能够分级分离细胞颗粒、病毒等。

利用其吸附性小的特点,有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。

参考资料:

百度百科-琼脂糖凝胶

(1)计算:计算配制所需液体浓溶液的体积(计算得需盐酸25ml)
(2)称量:用移液管(但中学阶段一般用量筒)量取液体体积
(3)转移:将溶液沿玻璃棒小心转入100ml的容量瓶中(玻璃棒下端应靠在容量瓶刻度线以下)
(4)洗涤:用蒸馏水洗涤移液管(量筒)和玻璃棒2~3次,并将洗涤液转入容量瓶中,振荡,使溶液混合均匀
(5)定容:向容量瓶中加水至刻度线以下1cm~2cm处时,改用胶头滴管加水,使溶液凹面恰好与刻度线相切
(6)摇匀:盖好瓶塞,用食指顶住瓶塞,另一只手的手指托住瓶底,反复上下颠倒,使溶液混合均匀
(7)最后将配制好的溶液倒入试剂瓶中,贴好标签

看了一下,有的还是可以借鉴的,
分析化学常用试液配制方法
乙醇制氢氧化钾试液 可取用乙醇制氢氧化钾滴定液(05mol/L)。
乙醇制氨试液 取无水乙醇,加浓氨溶液使每100ml中含NH3 9~11g,即得。 本液应置橡皮塞瓶中保存。
乙醇制硝酸银试液 取硝酸银4g,加水10ml溶解后,加乙醇使成100ml,即得。 乙醇制溴化汞试液 取溴化汞25g,加乙醇50ml,微热使溶解,即得。 本液应置玻璃塞瓶内,在暗处保存。
一氯化碘试液 取碘化钾014g与碘酸钾90mg,加水125ml使溶解,再加盐酸125ml,即得。本液应置玻璃瓶内,密闭,在凉处保存。
N-乙酰-L-酪氨酸乙酯试液 取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯240mg,加乙醇02ml使溶解,加磷酸盐缓冲液(取0067mol/L磷酸二氢钾溶液389ml与0067mol/L磷酸氢二钠溶液616ml,混合,pH值为70)2ml,加指示液(取等量的01%甲基红的乙醇溶液与 005%亚甲蓝的乙醇溶液,混匀)1ml,用水稀释至10ml,即得。
乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液 取对二甲氨基苯甲醛1g,加乙醇90ml与盐酸23ml使溶解,再加乙醇至100ml,即得。
二乙基二硫代氨基甲酸钠试液 取二乙基二硫代氨基甲酸钠01g,加水100ml溶解 后,滤过,即得。
二硝基苯试液 取间二硝基苯2g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
二硝基苯甲酸试液 取3,5-二硝基苯甲酸1g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
二硝基苯肼试液 取2,4-二硝基苯肼15g,加硫酸溶液(1→2)20ml,溶解后,加水使成100ml,滤过,即得。
二乙基二硫代氨基甲酸银试液 取二乙基二硫代氨基甲酸银025g,加氯仿适量与三乙胺18ml,加氯仿至100ml,搅拌使溶解,放置过夜,用脱脂棉滤过,即得。本液应置棕色玻璃瓶中,密塞,置阴凉处保存。
二苯胺试液 取二苯胺1g,加硫酸100ml使溶解,即得。
二氨基萘试液 取2,3-二氨基萘01g与盐酸羟胺05g,加01mol/L盐酸溶液100ml,必要时加热使溶解,放冷滤过,即得。本液应临用新配,避光保存。
稀二硝基苯肼试液 取2,4-二硝基苯肼015g,加含硫酸015ml的无醛乙醇100ml使溶解,即得。
二氯化汞试液 取二氯化汞65g,加水使溶解成100ml,即得。
二氯靛酚钠试液 取2,6-二氯靛酚钠01g,加水100ml溶解后,滤过,即得。
丁二酮肟试液 取丁二酮肟1g,加乙醇100ml使溶解,即得。
三硝基苯酚试液 本液为三硝基苯酚的饱和水溶液。
三硝基苯酚锂试液 取碳酸锂025g与三硝基苯酚05g,加沸水80ml使溶解,放冷,加水使成100ml,即得。 三氯化铁试液 取三氯化铁9g,加水使溶解成100ml,即得。
三氯醋酸试液 取三氯醋酸6g,加氯仿25ml溶解后,加30%过氧化氢溶液05ml,摇匀,即得。
五氧化二钒试液 取五氧化二钒适量,加磷酸激烈振摇2小时后得其饱和溶液,用垂熔玻璃漏斗滤过,取滤液1份加水3份,混匀,即得。
水合氯醛试液 取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解,即得。
水杨酸铁试液 (1) 取硫酸铁铵01g,加稀硫酸2ml与水适量使成100ml。 (2) 取水杨酸钠115g,加水使溶解成100ml。 (3) 取醋酸钠136g,加水使溶解成100ml。 (4) 取上述硫酸铁铵溶液1ml,水杨酸钠溶液05ml,醋酸钠溶液08ml与稀醋酸02ml,临用前混合,加水使成5ml,摇匀,即得。
甘油醋酸试液 取甘油、50%醋酸与水各1份,混合,即得。 甲醛试液 可取用“甲醛溶液”。 甲醛硫酸试液 取硫酸1ml,滴加甲醛试液1滴,摇匀,即得。 本液应临用新制。
对二甲氨基苯甲醛试液 取对二甲氨基苯甲醛0125g,加无氮硫酸65ml与水35ml的冷混合液溶解后,加三氯化铁试液005ml,摇匀,即得。 本液配制后7日即不适用。
对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐试液 取对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐985mg,加三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH81)5ml使溶解,加指示液(取等量01%甲基红的乙醇溶液与005%亚甲蓝的乙醇溶液,混匀)025ml,用水稀释至25ml。
对氨基苯磺酸-α-萘胺试液 取无水对氨基苯磺酸05g,加醋酸150ml溶解后,另取盐酸-α-萘胺01g,加醋酸150ml使溶解,将两液混合,即得。 本液久置显粉红色,用时可加锌粉脱色。
对羟基联苯试液 取对羟基联苯15g,加5%氢氧化钠溶液10ml与水少量溶解后,再加水稀释至100ml。本液贮存于棕色瓶中,可保存数月。
亚铁氰化钾试液 取亚铁氰化钾1g,加水10ml使溶解,即得。 本液应临用新制。
亚硫酸氢钠试液 取亚硫酸氢钠10g,加水使溶解成30ml,即得。 本液应临用新制。 亚硫酸钠试液 取无水亚硫酸钠20g,加水100ml使溶解,即得。 本液应临用新制。
亚硝基铁氰化钠试液 取亚硝基铁氰化钠1g,加水使溶解成20ml,即得。 本液应临用新制。
亚硝基铁氰化钠乙醛试液 取1%亚硝基铁氰化钠溶液10ml,加乙醛1ml,混匀,即得。 亚硝酸钠试液 取亚硝酸钠1g,加水使溶解成100ml,即得。
亚硝酸钴钠试液 取亚硝酸钴钠10g,加水使溶解成50ml,滤过,即得。 血红蛋白试验 取牛血红蛋白1g,加盐酸溶液(取1mol/L盐酸溶液65ml,加水至1000ml)使溶解成100ml,即得。本液置冰箱中保存,2日内使用。
过氧化氢试液 取浓过氧化氢溶液(30%),加水稀释成3%的溶液,即得。
次氯酸钠试液 取含氯石灰20g,缓缓加水100ml,研磨成均匀的混悬液后,加14%碳酸钠溶液100ml,随加随搅拌,用湿滤纸滤过,分取滤液5ml,加碳酸钠试液数滴,如显浑浊,再加适量的碳酸钠溶液使石灰完全沉淀,滤过,即得。含NaClO应不少于4%。 本液应置棕色瓶内,在暗处保存。
次溴酸钠试液 取氢氧化钠20g,加水75ml溶解后,加溴5ml,再加水稀释至100ml,即得。 本液应临用新制。
异烟肼试液 取异烟肼025g,加盐酸031ml,加甲醇或无水乙醇使溶解成500ml,即得。
多硫化铵试液 取硫化铵试液,加硫黄使饱和,即得。
邻苯二醛试液 取邻苯二醛10g,加甲醇5ml与04mol/L硼酸溶液(用45%氢氧化钠溶液调节pH值至104)95ml,振摇使邻苯二醛溶解,加硫乙醇酸2ml,用45%氢氧化钠溶液调节pH值至104。
含碘酒石酸铜试液 取硫酸铜75g、酒石酸钾钠25g、无水碳酸钠25g、碳酸氢钠20g与碘化钾5g,依次溶于800ml水中;另取碘酸钾0535g,加水适量溶解后,缓缓加入上述溶液中,再加水使成1000ml,即得。
间苯二酚试液 取间苯二酚1g,加盐酸使溶解成100ml,即得。 间苯三酚试液 取间苯三酚05g,加乙醇使溶解成25ml,即得。 本液应置玻璃塞瓶内,在暗处保存。
苯酚二磺酸试液 取新蒸馏的苯酚3g,加硫酸20ml,置水浴上加热6小时,趁其尚未凝固时倾入玻璃塞瓶内,即得。用时可置水浴上微热使融化。
茚三酮试液 取茚三酮2g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
{占}吨氢醇甲醇试液 可取用85%{占}吨氢醇的甲醇溶液。 钒酸铵试液 取钒酸铵025g,加水使溶解成100ml,即得。
变色酸试液 取变色酸钠50mg,加硫酸与水的冷混合液(9:4)100ml使溶解,即得。 本液应临用新制。
茜素氟蓝试液 取茜素氟蓝019g,加氢氧化钠溶液(12→100)125ml,加水800ml与醋酸钠结晶025g,用稀盐酸调节pH值约为54,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。
茜素锆试液 取硝酸锆5mg,加水5ml与盐酸1ml;另取茜素磺酸钠1mg,加水5ml,将两液混合,即得。
草酸试液 取草酸63g,加水使溶解成100ml,即得。 草酸铵试液 取草酸铵35g,加水使溶解成100ml,即得。
枸橼酸醋酐试液 取枸橼酸2g,加醋酐100ml使溶解,即得。 品红亚硫酸试液 取碱式品红02g,加热水100ml溶解后,放冷,加亚硫酸钠溶液 (1→10)20ml、盐酸2ml,用水稀释至200ml,加活性炭01g,搅拌并迅速滤过,放置1小时以上,即得。 本液应临用新制。
品红焦性没食子酸试液 取碱式品红01g,加新沸的热水50ml溶解后,冷却,加亚硫酸氢钠的饱和溶液2ml,放置3小时后,加盐酸09ml,放置过夜,加焦性没食子酸01g,振摇使溶解,加水稀释至100ml,即得。
氢氧化四甲基铵试液 取10%氢氧化四甲基铵溶液1ml,加无水乙醇使成10ml,即得。 氢氧化钙试液 取氢氧化钙3g,置玻璃瓶内,加水1000ml,密塞,时时猛力振摇,放置1小时,即得。用时倾取上层的清液。
氢氧化钠试液 取氢氧化钠43g,加水使溶解成100ml,即得。
氢氧化钡试液 取氢氧化钡,加新沸过的冷水使成饱和的溶液,即得。 本液应临用新制。
氢氧化钾试液 取氢氧化钾65g,加水使溶解成100ml,即得。
氟化钠试液 取氟化钠05g,加01mol/L盐酸溶液使溶解成100ml,即得。 本液应临用新配。
香草醛试液 取香草醛01g,加盐酸10ml使溶解,即得。
重铬酸钾试液 取重铬酸钾75g,加水使溶解成100ml,即得。 重氮二硝基苯胺试液 取2,4-二硝基苯胺50mg,加盐酸15ml溶解后,加水15ml,置冰浴中冷却,滴加10%亚硝酸钠溶液5ml,随加随振摇,即得。
重氮对硝基苯胺试液 取对硝基苯胺04g,加稀盐酸20ml与水40ml使溶解,冷却至15℃,缓缓加入10%亚硝酸钠溶液,至取溶液1滴能使碘化钾淀粉试纸变为蓝色,即得。 本液应临用新制。


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