10%明胶溶液怎么配

10%明胶溶液怎么配,第1张

商品明胶的配置方法,称取10克明胶于250ml三角烧瓶中,添加90克纯净水,溶胀两个小时,放到60度的水浴锅里,溶解30分钟,中间不间断搅拌,便于溶解充分,直至拿起烧瓶观察没有明胶颗粒,完全溶解了就行了。

配10%的胶10ml,当然用333ml 30%的arc-bis储液,15M的分离胶缓冲液是4倍的,所以用25ml,10%SDS100ul,10%AP100ul,补水至10ml即可

SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的 *** 作了,刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方,这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。
1
分离胶(12%)
配制

所需试剂

所需体积

分离胶(12%)

30%丙烯酰胺

60
ml

15
mol/l
Tris-HCl

38
ml

10%SDS

150
μl

10%过硫酸铵

150
μl

TEMED

6
μl

蒸馏水

49
ml

2
浓缩胶(5%)
配制

所需试剂

所需体积

浓缩胶(5%)

30%丙烯酰胺

13
ml

15
mol/l
Tris-HCl

10
ml

10%SDS

80
μl

10%过硫酸铵

80
μl

TEMED

8
μl

蒸馏水

55
ml

3
分离胶缓冲液(pH89)
配制

所需试剂

所需体积

分离胶缓冲液

Tris

366
g

1
mol/l
HCl

48
ml

蒸馏水

补足至100
ml

4
浓缩胶缓冲液(pH67)
配制

所需试剂

所需体积

浓缩胶缓冲液(pH67)

Tris

598
g

1
mol/l
HCl

48
ml

蒸馏水

补足至100
ml

5
30%丙烯酰胺(pH≤70)
配制

所需试剂

所需体积

30%丙烯酰胺(pH≤70)

丙烯酰胺

29
g

甲叉-双丙烯酰胺

1
g

蒸馏水

补足至100
ml

6
10%过硫酸铵(W/V):1g过硫酸铵溶于10ml水中,4℃保存数周,尽量现用现配。
7
10%SDS:将10
g
SDS溶于80ml重蒸水中并轻缓搅拌(室温低时需水浴加热溶解),再定容至100ml,室温存放。
8
样品缓冲液
配制

所需试剂

所需体积

样品缓冲液

1
M
Tris-HCl(pH67)

5
ml

SDS

25
g

巯基乙醇

1
ml

溴酚兰

005
g

蔗糖

10
g

蒸馏水

补足至100ml

9
考马斯亮蓝染色液:025g考马斯亮蓝R-250用少量甲醇溶解后,用甲醇(40ml)-乙酸(10ml)水溶液稀释至100ml。
10
Tris-甘氨酸电泳缓冲液(pH83)
配制

所需试剂

所需体积

Tris-甘氨酸
电泳缓冲液(pH83)

Tris碱

151
g

甘氨酸

94
g

10%(W/V)SDS

50
ml

去离子水

补足至100
ml

凝胶配制所需试剂的母液不能放置太久,有条件的实验室可将母液保存在4度冰箱中,放置母液被微生物污染或者出现沉淀。

10×DNA loading buffer(仅供参考)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
02%溴酚蓝 20mg
02%二甲苯青FF 20mg
200 mmol/L EDTA 4ml 05mol/L EDTA(pH80)
01%SDS 100ul 10% SDS
50%甘油 5ml
补足 水 20mg 到10ml


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原文地址: http://outofmemory.cn/yw/13245684.html

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