[拼音]:gudinghuamei
[外文]:immobilized enzyme
将生物酶约束或限制在一定空间,使变成不溶于水、仍保持酶的催化活性的一类酶制剂。1953年N.格鲁布霍费尔等开始研究酶的固定化,1969年千畑一郎等将固定化的氨基酰化酶用于工业上拆分D,L-氨基酸。此后,固定化酶的研究工作取得迅速进展。目前,这类酶制剂在工业生产中已得到广泛的应用。
将酶固定化的方法主要有四种:
(1)吸附法 通过物理吸附或静电引力将酶吸附在活性炭、氧化铝、离子交换树脂、 DEAE-葡聚糖凝胶等具有活泼表面的载体上(图a)。
此法的优点是简便,载体可再生使用;缺点是结合不牢,使用中容易脱落。
(2)共价法 通过酶分子上的官能团,如氨基、羧基、羟基、酚基、巯基、咪唑基,将酶分子通过共价键结合于天然或合成高聚物载体上(图b)。此法的优点是酶与载体结合牢固,酶分子不会脱落;缺点是反应条件有时较剧烈,可能降低酶的活性。
(3)交联法 利用双功能试剂如戊二醛等,将酶分子交联起来,使成网状结构而不溶于水(图c)。
(4)包埋法 将酶包藏在凝胶的网格中,或包藏在半透性的微型胶囊中(图d)。此法较简便,由于只是将酶分子包藏起来,未起化学反应,固定化酶具有较高的活力。
酶经过固定化后,稳定性普遍有所提高,而且有良好的机械强度,可像离子交换树脂那样反复使用,弥补了天然酶易失活、易污染产物、难回收使用等缺点;但酶的催化活力和选择性相对下降。
固定化酶已用于L-氨基酸、糖、核苷酸、抗生素等有机化合物的生产;在分析化学上,利用固定化酶可以准确而灵敏地测定一个复杂体系中的某一成分的含量;在医疗上,可用于治疗多种先天性的缺酶疾病,能避免免疫反应。此外,固定化酶也可作为天然酶的一种模型,从理论上研究细胞中酶的作用方式。
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