谁有以下几位NBA退役球星的资料

谁有以下几位NBA退役球星的资料,第1张

大卫汤普森:绰号天行者
大卫-汤普森是两届NBA 全明星赛的MVP,也是全联盟唯一一位既荣获ABA全明星赛MVP、又得过NBA全明星赛MVP的球员,人送外号“天空漫步者”。大卫-汤普森的能力非常突出,他并不喜欢花哨的扣篮,但是总能准确的将球送入篮筐。1978年4月9日,对于大卫-汤普森来说是终生难忘的一天。因为就在这一天,他在与底特律活塞比赛中,不可思议的砍下73分。这个单场得分目前仍旧排在NBA历史得分榜的第四位,这足以证明大卫-汤普森不凡的得分能力
英格里什:David English
是整个80年代联盟里最多产的得分手。在密尔卧基和印地安那度过了郁郁不得志的4年后,English来到了充满活力和能量的丹佛。在这里,English开始展现他爆发性的得分能力,并且使球队一跃成为当时NBA最好的进攻球队之一。
English的黄金时期贯穿了整个80年代。在丹佛的10个赛季里,他连续8年进入全明星阵容,拿到了一个得分王头衔,有9年的场均得分突破23分,同时连续9年将球队带入了季后赛(虽然从未进入总决赛)。这个技术娴熟的6尺7寸前锋也是联盟历史上第一个连续8季总得分超过2000分的球员。作为丹佛历史得分王,他有7个赛季的得分冠绝全队。
English是个平静温和的人。他只会用赛场上的表现来说话。自我吹捧和吸引眼球的举动从来就不是他的风格。可一旦English决定开口发表意见,他的口才总能让人欲辩无词。事实上目前English已经出版了三本个人诗集。在打球期间,他甚至还在由Gregory Peck和Jamie Lee Curtis主演以核战争为背景的“Amazing Grace and Chuck”中出演了一个感性角色。(召唤达人)
当Julius Erving, Larry Bird和Magic Johnson在那个时代吸引了大多数关注的时候,English默默地创造了NBA历史上最令人叹服的个人成就之一。
English曾经这么说:“我不是那种非常浮华,嘈杂的球员。我只是低调地完成我所应该完成的工作。有些人从来没有看到过这些,可是他们也从来没有关心过。”
虽然English从来不是媒体的宠儿,但是专家和老鸟们可不会忘记他的那些辉煌履历。NBA 专家Marty Blake曾对达拉斯时代先驱报的记者说过这么一段话:“真正影响到ALEX生涯评价的,至少人们在把他与其他伟大球员比较时不会忽略的一点是他不够华丽或者说过于朴实的球风。他最令人挑剔的问题就是从来没有得到大众太多的重视和承认。我曾经和18位名人堂成员有过接触,我认为ALEX是其中最伟大的之一。”
丹佛主教练Doug Moe非常善于组织快攻战术以及高得分的进攻体系。English在这个进攻体系中受益良多。而一旦这个攻击体系被抑制不能取分,English就开始自己创造得分机会。联盟中只有极少数球员具备他那样的进攻创造力和胆色在他15年的职业生涯中,English的投篮命中率高达507,而他耐战度也非常引人注目,在除了新秀赛季的14年里,他每年至少能出勤78场。
English出生在南卡罗莱纳洲哥伦比亚市,他的大学生涯在南卡罗莱纳大学度过。大学期间他取得了不怎么吸引眼球却非常优异的数据统计。他在大学联赛的前3年里场均分别轰下146, 183,
和160分,而第四年正是English在大学表现最好的一年,他场均能拿下226分。顺便一提,这4年里他的平均投篮命中率是538。
1976年的选秀大会聚集了包括John Lucas, Scott May, Adrian Dantley 和 Robert Parish在内的一群优秀年轻球员。English运气不佳,直到第2轮才被密尔沃基在第23位选中。
当时的雄鹿正值重建,他们过去的全明星中锋Kareem Abdul-Jabbar已经在LA度过了两年的时光,密尔沃基的荣光早已成为历史。一支新兴的球队正围绕Brian Winters, Junior Bridgeman, Swen Nater和Quinn Buckner建设。新秀年的English在60场比赛里仅仅获得了10分钟的场均上场时间,自然无甚发挥。第二年他得到更多的上场时间,然而之后 Marques Johnson和David Meyers 的到来将他再一次牢牢摁在了Don Nelson教练身边的板凳上。
经历了两年失败的替补生涯后,English在78年赛季结束时成为自由球员。他选择与印第安纳签约,印第安纳则送给密尔沃基一个第一轮选秀权作为补偿。来到了另一支重建球队的English终于得到了首发位置——虽然大部分的攻击机会依旧集中在 Ricky Sobers,Johnny Davi和Mickey Johnson三者身上1979-80赛季季中,English被交换到了丹佛,作为补偿,印第安纳得到了29岁的前锋George McGinnis(讽刺的是,这人之后只打了两季就退休了)。
English来到丹佛后如鱼得水般地爆发了,之后的24场比赛他场均拿下213分。当季成绩为30胜52负的丹佛急切需要能点燃他们进攻火力的催化剂。所幸,上帝给了他们ALEX。
80-81赛季中,Doug Moe 取代Donnie Walsh成为球队主帅,他惊奇地发现English能够把握住几乎所有给予他的进攻机会。当时球队阵容整齐,除了当打之年的English还拥有健康的 David Thompson并且吸纳了新人前锋Kiki Vandeweghe。于是,MOE奏响了丹佛快攻冲击波的序曲。English(238分)也由此开始了他连续9年场均23+的华丽演出。丹佛如同火箭升空一般一口气把场均得分从联盟第14提升到了第一。不幸的是,那个赛季丹佛同样也被钉上联盟失分第一的耻辱柱,最终以37胜45负的平庸战绩结束了赛季。
1981-82赛季的English几乎势不可挡,他以场均254分的数据带领球队进入暌违两年的季候赛,并首次入选全明星——这仅仅是他连续八年全明星经历的开始。季末,出色的表现为他在NBA第二阵容中博得了一席之地。一年之后的82-83 赛季,English场均得分飙升至284并首次获得联盟得分王。同队的Vandeweghe 以267分位居第二。是年掘金依靠ALEX,KIKI以及老将Dan Issel和T R Dunn的表现再次成为拥有联盟最强进攻和最弱防线的球队。他们以45胜37负的成绩结束常规赛,只比中西赛区的老大圣安东尼奥少了8场胜差。
1983-84赛季,Vandeweghe超越English成为球队得分王。他和 English(264分)分别占据了联盟得分榜第3,第4的位置。他俩的组合是NBA历史上最恐怖的前场组合之一。但是球队的两个重要问题仍旧没有得到解决:篮板和防守。Dunn球队最高的574个篮板总数仅仅是当季联盟篮板王的一半。而那一赛季丹佛的场均失分达到了骇人听闻的1248 分。那年他们胜率跌破5成,全季仅拿下38胜-44负。
经历了一个忙碌夏天的掘金利用和波特兰的交易得到了前锋Calvin Natt,后卫Lafayette Lever以及替补中锋Wayne Cooper——代价则是Vandeweghe。在那个大交易里,开拓者方面还送上了两个选秀权做添头。由于COOPER和NATT当季分别有600个以上的强力篮板表现,加上English场均279分的表现继续维持着球队强劲的攻击火力,丹佛在1985年获得了分区冠军。通过这一系列动作,掘金终于将球队的赛季场均得分超越了场均失分。
那年季后赛,掘金接连轰杀了圣安东尼奥和尤他两大废柴,第一次进入西部决赛并遭遇了当年的NBA总冠军湖人,最终湖人在5场比赛内轻松结束了战斗。这是ENGLISH整个职业生涯最接近冠军戒指的一次。
English在85至86赛季的场均得分达到了生涯最高的298分,仅次于亚特兰大的 Dominique Wilkins和尤他的Adrian Dantley列联盟第三。在当时队内没有第二名20+得分手的条件下,掘金连续三年统治NBA球队得分榜的光荣历史结束了,同时他们也遗憾地失去了分区冠军的宝座。
那年全明星赛,English作为替补打出个人全明星最佳表演,在16分钟内以12中8的命中率轰下16分。他在那年还创造了另一项个人记录:对垒本分区冠军休士顿火箭全场贡献生涯最高得分54分。这也是丹佛球队历史上第二个人高分,只有 David Thompson在77-78赛季拿下的73分才能压过English。
经历了一个不到5成胜率的惨淡赛季后,88年掘金再度赢得了分区冠军,这次他们的推进器是新加盟的Jay Vincent和Michael Adams。已经超过30岁的English依旧是那么彪悍,他在得分上继续站在了球队的最顶端:场均25分。掘金打入季后赛第二轮,可惜最终仍旧功亏一篑在6场大战中败给了达拉斯小牛。
ENGLISH在89-90季场均得分仅有179分,在赛季结束后成为了自由球员。由于丹佛放弃与他续约,36岁的他最后和达拉斯签了一年和约。作为一名掘金球员,English几乎是所有球队记录的保持者,他的记录包括了总得分(21645),总助攻(2679),总比赛场次(837)以及总上场时间(29893)等。
ENGLISH这不体面的告别方式给他和球迷深深的伤痛。“我曾经无数次想象过如同Dan Issel 和Julius Erving那样潇洒离去的场面,在我的想象中我会周游全联盟,向所有城市里所有的球迷们告别。”English在1992年接受洛基山新闻报采访时说道,“不幸的是,在这个联盟里,没有多少球员能自己选择职业生涯终结的方式。”
ENGLISH加入了一支处在上升期间的球队。当时达拉斯拥有Rolando Blackman, Roy Tarpley, Derek Harper,James Donaldson以及新加入的前锋Rodney McCray等强者。在赛季开始前,ENGLISH自信满满地对媒体说:“这次我终于可以为总冠军而奋斗了!”
然而,可怜的English和小牛并没有走多远。作为McCray的替补,他打了79场比赛,场均拿下97分。球队主力Tarpley持续不断的伤病和毒品问题和Lafayette Lever的重伤最终使小牛仅排名中西区第6。
第二年小牛放弃了ENGLISH。他在1991年不得不选择退役。在他的整个生涯里,他一共得到25,613分。历史上仅有六名球员的总得分在他之上,他们是:Kareem Abdul-Jabbar, Wilt
Chamberlain, Elvin Hayes, Moses Malone, Oscar Robertson 以及John Havlicek 无一不是战功赫赫之辈。ENGLISH37岁的时候还为意大利Depi Napoli打了一年共18场比赛,场均得到139分。
English和丹佛的故事在1992年落下了帷幕。球队终于为当年对他作出的不公正待遇表达了歉意,并且将他的2号队服高高悬挂在球场上空。球队主席Tim Leiweke在记者招待会上说:“作为一个团体,掘金在过去的5到6年里显然失去了方向和责任感。所以首先,我们必须为我们的失职向ALEX道歉。 ”English则表示他非常满意。他告诉洛基山新闻报的记者:“我总觉得我的故事需要一个结局,因为一种茫然若失的感觉经常袭上我的心头。今天我终结了我的过去,但这也是一个开始。因为我将把我的目光投向那些未知的挑战。”
很多年过去了,English在退役后终于得到了足够的尊重和认可——他在掘金时代的那件2号彩虹色队服始终在NBA复古球衣销售榜上名列前茅。
他所说的未知的挑战将他带入了有别于比赛的另一个领域。他曾受聘成为NBA球员联合会球员规划和服务方面的主管。职责包括酒精,毒品,艾滋病毒检查,球员定位和职业计划规划等方面。他过去作为球员的杰出表现使他在媒体上小露了一把脸,之后的 English也有过NBDL主教练以及亚特兰大老鹰队助理教练的经历。
凯文约翰逊
上世纪八十年代中期,KJ(凯文·约翰逊的呢称)和后场搭档克里斯·华盛顿给一度死气沉沉的加州大学金熊队带来生机,带领加州大学队杀入NCAA锦标赛,并在25年来首次打败竞争对手加州大学洛杉矶分校。凯文·约翰逊让我想起了我喜欢的一名球员——“微笑刺客”伊塞亚·托马斯:他只有185米,但速度疾如闪电,且控球能力极佳,这使他可以在任何时间轻易突破击溃对手。KJ在场上的奔跑速度极快,而且总是善于调动他的队友们加入攻防,但他从不抢走队友风头。
但令我印象深刻的是,在我短暂就读加州大学时期间,我看到的不只是KJ在场上如鱼得水的演出,还有他不时出现在学校的图书馆里,而且不止一次。这让我颇感兴趣,因为在密歇根大学我看到篮球选手经常出入酒吧,却从不在图书馆中现身。显然,约翰逊不只是一名球员,还是一名真正的球星。
1987年选秀大会,KJ被骑士以第7号选秀权相中,该队当时在组织后卫位置上已拥有二年级球员马克·普莱斯。在新秀赛季的2月,即1988年2月25日,KJ被骑士送到太阳,在菲尼克斯他立刻获得新生。1988-89赛季,是他在太阳的首个完整赛季,约翰逊场均掠下204分,并有个人职业生涯最高的122次助攻,荣膺该赛季“进步最快球员奖”。连续3个赛季,约翰逊都场均有得分20+助攻 10+的表现。要知道,史上只有5名球星有此佳绩,其他4名球星分别是伊塞亚·托马斯、内特·阿奇巴尔德、“魔术师”约翰逊、“大O”奥斯卡·罗宾逊,后 4人均入选了NBA50大巨星。约翰逊职业生涯场均助攻达到91次,这在NBA历史上列第4席,仅次于“大O”、“魔术师”和史上“助攻王”约翰·斯托克顿,在其12年的NBA生涯中,KJ还有场均179分进账。
值得一提的是,在KJ抵达菲尼克斯的最初7个赛季中,太阳每个赛季取胜场次不少于53场,优秀组织后卫催生了一批高产攻击手,包括汤姆·钱伯斯、埃迪·约翰逊(今夏被《芝加哥论坛报》等美国媒体误认为性侵犯一名8岁女童,其实是另一位同名同姓的前 NBA球员埃迪·约翰逊所为,后者主要效力于老鹰)以及1992-96赛季效力太阳的查尔斯·巴克利。1993年总决赛中,太阳将公牛逼进了第6场大战,包括总决赛第3场经3个加时以129比121力克芝加哥人,这场比赛成为了总决赛历史上的经典之战,就是在这场比赛中,KJ负责防守“飞人”乔丹,让他在球迷中间留下了深刻印象。
和职业生涯一样,凯文·约翰逊的场下生活同样伟大。1989年当他在太阳队效力时,他在加州萨克拉门托附近的橡树园社区创建了圣希望(St Hope)学校,这是一所非营利的、为萨克拉门托市中心的孩子们提供学习和成长的学校,KJ小时候是在橡树园长大的。圣希望学校现在由独立人士承租,已拓展到其他社区。20年后,当我们再次重温他的辉煌球员岁月时,我的第一印象仍是他在加州大学的图书馆内孜孜就读,但这对约翰逊来说却是再平常不过的事情。
虽然他只有6'1 "高 ,KJ往往会隔着大个子扣篮得分,其中包括暴扣奥拉朱旺 , 马克伊顿 ,和约翰的"热棒"威廉斯 。
约翰逊是在NBA历史上仅有的四个,在3个不同的赛季平均每场以平均每年至少有200分和100次助攻的球员之一。
约翰逊是在NBA历史上仅有的四个,以平均每年至少有150分和100次助攻,平均每场超过过程中的本赛季投篮命中率至少0500来自外线的球员之一。
约翰逊是一个只有两名球员(另一个是魔术师约翰逊 ),以平均每年至少有200分和100次助攻,平均每场超过过程中的本赛季投篮命中率至少0500来自外线的球员。凯文约翰逊和魔术师约翰逊都完成了这一壮举,前者在1988-89年和1990-91,后者在一九八六至八七年度和一九八八至八九年度。

不是,线虫类是动物的一个大纲。
线虫
nematode
亦称圆虫(roundworm)。
袋形动物门(Aschelminthes)线虫纲(Nematoda)所有蠕虫的通称,不少学者为之另立为一门。系动物界中数量最丰者之一,寄生於动、植物,或自由生活於土壤、淡水和海水环境中,甚至在醋和啤酒这样稀罕的地方亦可见到。已知约有13,000种,营寄生者由於多数具医学、兽医学或经济重要性而被大量研究,营自由生活者则可能只有小部分被鉴定。线虫属两侧对称,体长,通常两端尖,并具透明隔腔(消化道与体壁间充满液体的体腔)。一般为雌雄异体,有些则为雌雄同体(即个体兼具雌雄生殖器官)。大小由肉眼不可见至长7公尺(约23呎)不等,最大者系在鲸体内发现的寄生型。营动物寄生者几乎见于寄主所有器官,惟最常寄生於消化、循环与呼吸系统。部分种类以钩虫、后圆线虫、蛲虫、粪类圆线虫、鞭虫与小线虫等俗称为人所熟知。线虫且为丝虫病、蛔虫病与旋毛虫病等种种疾病的根源。
线虫种类繁多,为害家畜的线虫分属于杆形目、圆形目、蛔虫目、尖尾目、旋尾目、丝虫目、毛首目、膨结目和驼形目。其形态和生活史既有共同点又有某些区别。
线虫形态 通常呈乳白、淡黄或棕红色。大小差别很大,小的不足1毫米,大的长达8米。多为雌雄异体,雌性较雄性的为大。虫体一般呈线柱状或圆柱状,不分节,左右对称。假体腔内有消化、生殖和神经系统,较发达,但无呼吸和循环系统。消化系统前端为口孔,肛门开口于虫体尾端腹面。口囊和食道的大小、形状以及交合刺的数目等均有鉴别意义。如杆形目虫体的食道上具有食道球及前食道球,尖尾目的食道上只有食道球,而无前食道球。蛔虫目食道简单呈圆柱状,头端有唇3个。旋尾目食道常由前端的肌部与后端的腺部构成,头端有偶数的唇(2、4、6或更多),雄虫尾部呈螺旋状旋曲。丝虫目的食道亦常由肌部和腺部两部分构成,无唇,阴户在虫体前端。圆形目的食道简单或呈瓶状,雄虫尾端具有由肋状物支撑的角质交合伞,往往有两根等长的交合刺。毛首目往往区分为前后两部,食道很长,呈串珠状,雄体只有一根交合刺。膨结目的食道简单,雄虫具有肉质交合伞,无肋状物支撑,只有 1根交合刺。驼形目具有单核的食道腺,无唇。在中国畜禽中已发现线虫病原350余种。其中常见的有:寄生在马属动物肠道的副蛔虫圆形线虫、尖尾线虫、胃线虫和皮下组织的副丝虫;寄生在反刍动物真胃的血矛线虫、肠道的仰口线虫、食道口线虫、毛首线虫和气管的网尾线虫;寄生在猪肠道的蛔虫、类圆形线虫、旋毛线虫、肾线虫和气管的后圆线虫;寄生在禽类肠道的禽蛔虫、异刺线虫和腺胃的华首线虫,以及寄生在犬肠道的弓首蛔虫和肾脏的膨结线虫等。
这里所说的线虫特指秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是一种很小的蠕虫。秀丽隐杆线虫已经成为现代发育生物学、遗传学和基因组学研究的重要模式材料其成体长仅1mm ,全身透明, 以细菌为食,居住在土壤中,全身共有959个细胞,性别为雌雄同体或雄性。整个的生命周期仅3天。野生型线虫胚胎发育中细胞分裂和细胞系的形成具有高度的程序性,这样就便于对其发育进行遗传学分析。一个成体的蠕虫仅由959个细胞组成。由一个受精卵发育成为成熟的成体只要二天多一点(25℃时需52小时)。从卵到成体每个细胞的命运以及它们沿着一定的程序,在特定时间的分裂和迁移都已搞得十分清楚。
Celegans有很多有趣的特点,它是一个染色体数很少的二倍体,2n=12(有一对性染色体和5对常染色体),其基因组也很小,仅有8×107bp,约为人类基因组的3%,约有13,500个基因。在真核生物中基因都是产生单顺反子mRNA,但唯有Celegans与原核相似,有25%左右的基因产生多顺反子mRNA(Polycistronic mRNA),此和它们通过反式剪接使下游基因的到表达有关。还有一个特点是其基因组中非重复序列很高,达到83%,而高等的真核生物都在50%以下,Ecoli为100%,看来Celegans在这些特点上都较接近原核生物,这也反映其在进化中的地位点较为原始。这种蠕虫大部分是XX型,是可以自体受精的两性体(hermaphrodites)大约每500个蠕虫有1个是XO 型的雄体,此是染色体不分离的结果。
2002年诺贝尔生理学或医学奖授予悉尼·布雷内等三人,他们获奖的原因是在20世纪60年代初期正确选择线虫作为模式生物,发现器官发育和“程序性细胞死亡”过程中的基因规则。布雷内是分子生物学的奠基者之一,他在1965年第一次研究线虫,直到1974年才发表第一篇有关论文,其中经历了长达10年左右默默无闻的基础工作时间。直到20世纪80年代后,线虫研究才逐渐受到国际认可,目前一些国家的科学家已经开始利用布雷内三人的成果,研究可以治疗多种疾病的新方法。
线虫生活在土壤间水层,成虫体全长只有 01 公分,因以细菌为食物,所以在实验室中极易培养。又因为全身透明,研究时不需染色,即可在显微镜下看到线虫体内的器官如肠道、生殖腺等;若使用高倍相位差显微镜,还可达到单一细胞的分辨率。
管圆线虫病:食源性寄生虫病的一种,又名嗜酸粒细胞增多性脑膜炎,是由于鼠类的心、肺部寄生的Ascaris lumbricoides,线虫的一种。线虫,即广州管圆线虫幼虫(或成虫)寄生在人的中枢神经系统所致。可发生嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎或脑膜脑炎。
线虫种类甚多,可以与昆虫相媲美
我国研究线虫以广州管圆线虫、松材线虫、甘薯茎线虫为多
2006年的诺贝尔生理医学奖
瑞典卡罗林斯卡医学院宣布,将2006年诺贝尔生理学或医学奖授予两名美国科学家安德鲁·菲尔和克雷格·梅洛,以表彰他们在分子生物学和遗传信息方面的开创性工作。Andrew Z Fire和Craig C Mello发现了RNA干扰机制,论文发表在1998年。这一发现对于防御病毒及寻找疾病的治疗方法极为重要。笔者将从以下几个方面向您介绍06年的诺贝尔生理医学奖。
1.获奖者基本情况
安德鲁·菲尔出生于1959年,美国公民,1983年获美国麻省理工学院生物学博士学位,现任斯坦福医学院病理学和遗传学教授。克雷格·梅洛出生于1960年,美国公民,1990年获得哈佛大学生物学博士学位,现任马萨诸塞州医学院分子医学教授。
2.获奖成果
科学家们最早在植物(Napoli等,1990)和脉孢菌(Neurospora crassa) (Cogoni和Macino,1997)中发现了dsRNA诱导的RNA沉默现象。RNAi在这些机体中作为抗病毒的防御体系而发挥作用。虽然在上述发现中,转基因病毒可以编码具有沉默功能的基因片断,并在复制过程中产生dsRNA,但针对RNA沉默现象的决定性发现还是由Andrew Fire和Craig Mello首先完成的。早在几年前,在线虫中进行反义RNA实验时,Guo和Kemphues就观察到正义RNA也具有很高的基因沉默活性(Guo和Kemphues,1995)。后来Andrew Fire(安德鲁·菲尔)和Craig Mello(克雷格·梅洛)通过实验阐明了这一反常现象:将反义RNA和正义RNA同时注射到秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)比单独注射反义RNA诱导基因沉默的效率高10倍。由此推断,dsRNA触发了高效的基因沉默机制并极大降低了靶mRNA水平(Fire等,1998),这是一个有关控制基因信息流程的关键机制。人们将这一现象命名为RNAi (见综述:Arenz和Schepers,2003)。安德鲁·菲尔和克雷格·梅洛因为发现这一关键机制而获得诺贝尔生理医学奖。
RNAi的机制:基因所携带遗传信息(即单个基因的具体功能)的传递是通过名为信使RNA的分子进入细胞蛋白合成“工厂”而实现的,而基因功能的研究方法一直是研究工作的拦路虎。安德鲁·菲尔和克雷格·梅洛通过线虫实验证实:某些分子触发了特定基因上RNA的破坏,导致蛋白无法合成,出现“基因沉默”,而这一过程便被称为RNAi。天然的RNAi现象存在于植物动物和人类等真核生物的体内,在调解基因活力和预防病毒感染方面起到重要作用。同时他们还发现了有效关闭基因表达的方法,这样当某一特定基因被“沉默”后,其功能便反向的体现出来了。
3研究成果的应用价值
关于RNA的功能,以前教科书上大概有三种,一种是作为信使RNA(mRNA), 是gene转录的直接产物,接下来翻译成蛋白质。所有的蛋白质都是这样合成的。另外是转运RNA(tRNA), 蛋白合成的时编码和运送氨基酸到核糖体。还有一些具有催化作用的RNA, 比如核糖体的构成成分就有RNA,它们起催化作用。但是RNAi(RNA interference)的发现,揭示了RNA的另外一个重大功能:调节gene的表达(这给gene表达的调控也增加了一个全新的概念)。
2001年,随着人类基因组测序的完成,针对其它多种生物的基因组测序计划也相继开展起来。在未来的一段时间内,科学界将不会出现比人类基因组测序更瞩目的技术。有人将人类基因组测序称为“21世纪科学发展史上的里程碑”、“生物学领域最重要的成就之一”。然而时隔不久,同一年在哺乳动物中发现的RNAI掀起了一场风暴,而且愈演愈烈。《Science》杂志将RNAi称为“2002年的重大突破”(Couzin,2002)。然而,更加令人吃惊和兴奋的是,4年以后的今天,这项技术的始作俑者,安德鲁·菲尔和克雷格·梅洛就因此获得2006年诺贝尔医学奖。一项全新的技术在提出后短短几年就得到诺贝尔奖的青睐和肯定,此前是绝无仅有的,这也足见RNAi在医学领域的开创性意义和极大的应用前景。随着人们对多种生物体基因组序列了解的深入,RNAi技术可以帮助我们更细致地了解复杂的生理学过程。RNAi技术与基因组学、蛋白质组学和功能蛋白质组学密切相关,因此, RNAi本身可作为一项实验技术为生物工程及制药业等相关行业服务,从而在更深更广的领域发挥其作用。
植物、动物、人类都存在RNA干扰现象,这对于基因表达的管理、参与对病毒感染的防护、控制活跃基因具有重要意义。RNA干扰已经作为一种强大的“基因沉默”技术而出现。这项技术被用于全球的实验室来确定各种病症哪种基因起到了重要作用。RNA干扰作为研究基因运行的一种研究方法已被广泛应用于基础科学。
RNAi主要通过在转录后(post-transcriptional)水平阻断基因的表达,并借此研究基因的功能。同时它为我们提供了一个治疗疾病的新途径。比如,我们可以按拟定的方式来关闭(shutting off)非必需或致病基因的功能。从理论上说,若能关闭致病基因的表达则很多疾病将被治愈。动物实验已证明,可以通过RNAi的方法使导致血胆固醇升高的基因“沉默”;病毒性疾病,眼疾,心血管代谢性疾病等方面的临床试验也正在进行中;这一方法为病毒性肝炎、艾滋病和肿瘤等人类顽疾的治疗指了一条新路。
线虫有好氧和兼性厌氧的,兼性厌氧者在缺氧时大量繁殖。线虫是污水净化程度差的指示生物。

RNAi是Napoli C D等在试图向紫色矮牵牛花转导色素合成基因,用以增加其花色时发现的。结果出乎预料,转基因的植株不仅没有新基因的表达,反而自身的色素合成也减弱了,一些转基因的花出现了全白色或部分白色。他们把这种导入的基因未表达和植物本身合成色素基因的失活现象命名为共抑制(cosuppression)。之后,Ramano等在向粗糙孢菌(Neurospora crassa)中导入合成胡萝卜素的基因时造成失活,他们称为基因静止(quelling)。Guo S等发现正义RNA与反义RNA有相同水平的抑制效应,但未能就此现象给出合理的解释。Fire A等在研究反义核苷酸时发现在线虫体内,双链RNA( double stranded RNA,dsRNA)能有效地抑制有互补序列的内源性基因,且抑制效果优于单链反义RNA。至此,正式提出了双链RNA诱导的RNAi的概念,开启了RNAi研究的序幕。
1 RNAi可能的作用机制及特点
11 RNAi的作用机制
虽然RNAi作用的确切机制尚不清楚,但目前普遍认可是Bass假说。具体概括为三个阶段。
(1)起始阶段。在细胞内,双链RNA(dsRNA)由核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ) Dicer 在ATP的参与下被处理为21个~23个碱基的小RNA,即小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)。siRNA是由19个~21个碱基配对形成的双链,并在其3′末端有两个游离未配对的核苷酸。研究发现, siRNA 是RNAi 作用发生的重要中间分子,序列与所作用的靶mRNA 的序列具有高度同源性;双链的两端各有2个~3个突出的非配对的3′碱基;两条单链末端为5′端磷酸和3′端羟基。这些是细胞赖以区分真正的siRNA和其他双链RNA的结构基础。 研究表明,平末端的siRNA 或失去了5′磷酸基团的siRNA 不具有RNAi 的功能
(2)引发阶段。siRNA与Argonaute蛋白家族及其他未知因素结合,形成siRNA-核蛋白复合物(siRNA-ribonucleoprotein complex,siRNP)。siRNP在ATP及其他未知因素参与下,使双链siRNA解旋形成RNA诱导的沉默复合物(RNA inducing silencing Complex ,RISC)。RISC可能以完全单链或两条链解旋但不完全分离的形式存在,继而RISC在dsRNA的介导作用下与互补mRNA结合,并将其降解。mRNA被降解在转录后水平,抑制基因表达,因而又称之为转录后基因沉默( posttranscriptional gene silencing,PTGS)
(3)循环放大阶段。在siRNA诱导的RNAi过程中,可能还存在siRNA 的循环放大过程,以维持它的RNA诱导功能。此过程推测是以siRNA为引物,互补mRNA 为模板,在RNA依赖性RNA合成酶(RNA-dependent RNA Polymerase,RdRP) 的作用下,合成新的双链RNA,再由Dicer作用,产生新的siRNA,完成siRNA 的放大过程,开始新的RNAi循环。
关于对RNAi机制中重要酶的作用研究,Zamore P D等发现,21 nt RNA指导mRNA的降解; Scharf W D等发现ATP依赖的RNA解旋酶为Mut6;Grishok A等发现Let-7和lin-4为内源性的RNAi基因(stRNA);Dalmay T等提出RNA依赖的RNA多聚酶就是SDE-1; Bernstein E等证实RNaseш样的核酸酶为Dicer; Elbashir S M等应用外源性21 nt-siRNA能够抑制同源mRNA的表达;Novina C D等证实无论是针对病毒感染细胞所需的CD4受体,还是针对病毒基因组的gag区域,siRNA都可以有效地使病毒与细胞的基因沉默,抑制HIV的感染与复制。
12 RNAi的作用特点
(1)“共抑制”性。RNAi是双链RNA介导的转录后基因沉默机制,它的启动子相当活跃,外源基因可以转录,但不能正常积累mRNA;RNAi作用不仅使外源基因在转录后水平上失活,同时诱导与其同源的内源基因沉默。
(2)高效性。试验证明双链RNA干扰mRNA 翻译的效率比单纯反义或正义RNA 的抑制效率提高了几个数量级;RNAi可在低于反义核酸几个数量级的浓度下,使靶基因表达降到很低水平甚至完全“剔除”,而产生缺失突变体表型。它比基因敲除技术更为便捷,研究人员称RNAi技术为靶基因或靶蛋白的“剔降”(knockdown)。
(3)高特异性。由dsRNA降解成的小干扰RNA,除其正义链3′端的两个碱基在序列识别中不起主要作用外,其余碱基在序列识别中都是必需的,单个碱基的改变即可使RNAi失效,RNAi能特异性降解mRNA,针对同源基因共有序列的RNAi则可使同源基因全部失活。
(4)高穿透性。RNAi具有很强的穿透能力,能在不同的细胞间长距离传递和维持,如在含有双链RNA的溶液中,喂食表达双链RNA的细菌等,能向秀丽隐杆线虫导入双链RNA。
(5)“遗传性”。已在线虫中观察到RNAi效应通过生殖系传递到后代,说明RNAi具有一定的可遗传性。
高稳定性。细胞中可能存在天然的稳定siRNA的机制。此机制可能是siRNA与某种保护性蛋白结合,从而使其具有相对的稳定性,这些双链RNA 不像反义核酸那样需要多种化学修饰来提高其半衰期。
(7)双干扰系统。哺乳动物(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)中存在有非特异性干扰和特异性干扰两条独立的途径。 非特异性干扰反应是由大于30个碱基对的双链RNA介导,导致整个细胞中非特异性蛋白合成抑制,RNA降解;特异性反应由21 bp~25 bp的小干扰RNA介导,可逃避非特异性干扰系统的“监控”,只降解与其序列相应的单个基因的mRNA。
2 研究方法
在研究过程中,科研人员逐渐摸索总结出了成套的研究方法。目前,展开RNAi *** 作主要有两种方法。一种为直接将靶向特定基因的大约21个碱基长短siRNA,或45个~50个碱基的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)转染到细胞,shRNA在细胞中会自动被加工成siRNA,从而引发基因沉默或表达抑制。另一种为构建特定的siRNA表达载体,通过质粒在体内表达siRNA而引发基因沉默。此法的优点是排除了RNA酶干扰,延长siRNA半衰期。更重要的是,该法可以进行稳定表达细胞株的筛选,且随着质粒复制扩散到整个机体,基因抑制效果可传代。试验表明,可被化学合成或体外合成的siRNA抑制的基因同样可被表达相同序列的载体表达出的siRNA所抑制。
3 RNAi的应用
31 基因功能研究
在神经生物学研究中,研究人员们通过siRNA表达质粒对中脑腹侧神经细胞中的多巴胺能相关基因进行了有效抑制,还通过病毒介导的RNAi建立了此类成年小鼠模型,不仅为建立神经系统(Nervous System)(Nervous System)(Nervous System)的功能缺失模型找到了一些有价值的表型标记,对神经系统(Nervous System)(Nervous System)(Nervous System)的基因治疗(gene therapy)(gene therapy)(gene therapy)也有一定借鉴意义;在癌症(cancer)(cancer)(cancer)研究中,通过shRNA表达载体成功抑制成年大鼠脑癌基因,同时对RNAi的远程(穿过血脑屏障)基因沉默方法进行了非常有益的探索;利用细胞凋亡(Apoptosis)(Apoptosis)(Apoptosis)途径,通过RNAi抑制凋亡基因Caspase-8能提高患急性肝功能衰竭小鼠的成活率,并发现Caspase 8 siRNA处理对特异性Fas激活剂(Jo2和AdFasL)和野生型腺病毒(adenovirus)(adenovirus)(adenovirus)介导的急性肝功能衰竭都有效,表明这个动物模型(Animal Models)(Animal Models)(Animal Models)能反应人类急性病毒肝炎多分子参与的机制,增强了siRNA用于急性肝炎病人治疗的希望。除了对某些关键基因的RNAi研究外,还在哺乳动物(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)细胞中探索了siRNA在基因组水平上的筛选方法。他们建立了一个包含8 000多个基因的siRNA表达框文库阵列,通过它来高通量筛选NF-kB信号途径中已知的及Unique基因。由此可见,RNA干扰也正作为筛选成百甚至上千基因的工具,发挥着越来越大的作用。RNAi为系统地抑制RNA分子合成蛋白提供了快速而相对简便的途径。通过在一段时间内对一个基因RNA信号的抑制,研究者可以深入研究基因功能,进而描绘支配从细胞形态到信号系统的遗传网络。
32 基因治疗(gene therapy)(gene therapy)(gene therapy)及药物筛选探索
由于RNAi是针对转录后阶段的基因沉默,相对于传统基因治疗(gene therapy)(gene therapy)(gene therapy)对基因水平上的敲除,整个流程设计更简便,且作用迅速,效果明显,为基因治疗(gene therapy)(gene therapy)(gene therapy)开辟了新的途径。其总体思路是通过加强关键基因的RNAi机制,控制疾病中出现异常的蛋白合成进程或外源致病核酸的复制及表达。尤其针对引起一些对人类健康严重危害的病毒,如2003年在全球多个国家和地区流行的SARS,病原体是单链核酸的新型冠状病毒,寻找药物靶点,设计核酸药物就更为方便。目前已经有很多公司在积极开发这方面的药物,如在SARS药物研究中一鸣惊人的美国俄勒冈州的AVI BioPharma生物制药(Biopharmaceutical)(Biopharmaceutical)(Biopharmaceutical)公司等。国内也有很多研究机构及生物技术公司投入了这方面的工作。如上海生科院成立了SARS防治科研攻关小组,其中生化细胞所和药物所的一些课题组在从RNAi的角度努力。此外,北京大学、中南大学,北京动物所等大专院校和研究机构,以及北京金赛狮反义核酸技术开发有限公司等,也开展了RNAi药物的研究与开发。
基因治疗(gene therapy)(gene therapy)(gene therapy)方面最引人注目的进展之一是对肝炎病毒的RNAi研究。Mccaffrey A P等通过表达shRNA的载体在细胞水平和转染HBV质粒后免疫活性缺失的小鼠肝脏中成功抑制了HBV复制。与对照相比,小鼠血清中测得的HBsAg下降了845%,免疫组化对HBcAg的分析结果下降率更超过99%。哈佛大学Lieberman研究小组通过注射针对Fas的siRNA,过度激活炎症反应,诱导小鼠肝细胞自身混乱。然后给测试小鼠注入 Fas hyperdrive的抗体,发现未进行siRNA处理的对照组小鼠在几天中死于急性肝功能衰竭,而82%的siRNA处理小鼠都存活下来,其中80%~90%的肝细胞结合了siRNA。并且,RNAi发挥功能达10 d,3周后才完全衰退。由于Fas很少在肝细胞外的其他细胞高水平表达,它对其他器官几乎没有副作用。此外,这个小组还和其他研究者积极开展针对HIV的RNAi测试,目前报道他们使用的针对CCR5蛋白的siRNA能阻止HIV进入免疫细胞约3周,在已经感染的细胞中也能阻止感染病毒的复制。
然而,尽管取得了不少研究成果,但要真正用于医疗还需时日。目前大多数还停留在小鼠测试阶段,siRNA的导入多采用静脉或腹腔注射,尾部注射,细胞移植等,如何对人进行有效的给药,既能确保药效在靶器官靶组织有效释放,还要具有高度安全性等问题都需进一步研究。人们期待着RNAi引领的新医学革命的到来。
在药物筛选领域,除了线虫这种低等动物的RNAi高通量药筛模式外,Lavery K S等对RNAi在药筛领域的应用前景进行了高度评价,RNAi技术将逐渐成为药物靶点筛选和鉴定的强大工具。他对如何在药筛的各个阶段应用RNAi做了具体描述及展望,并指出将这项技术与高通量筛选、体外生物检测和体内疾病模式相结合,将提供大量基因功能方面的有用信息,在药物开发过程的多个阶段促进靶点的有效筛选。
33 抗肿瘤治疗
多种癌基因可以作为靶点设计相对应siRNA。Brummelkamp T R等用逆转录病毒载体将siRNA 导入肿瘤细胞中,特异性抑制了癌基因K2RAS (V12)的表达。对急性髓性白血病的研究已经取得了较好的结果。Scherr M等以引起慢性髓性白血病和bcr2abl阳性急性成淋巴细胞白血病的bcr2abl癌基因为靶基因,设计了对应的siRNA,并获得了87% 的有效抑制率。Wilda M等用siRNA抑制白血病BCR/ABL融合基因表达也取得了成功。 因此,基于RNAi 技术的抗肿瘤治疗药物开发潜力巨大。有报道称,一种全新生物工程药品“RNA干扰剂”(非干扰素)业已浮出水面,并有望在3年内上市。经过多年的探索,研究人员终于发现,在癌细胞和病毒RNA的22对碱基中有1对碱基专门负责复制工作,只要能使这对碱基“休眠”,癌细胞或病毒就会自动停止复制。这一重要发现为一种全新药物——RNA干扰剂奠定了基础。研究人员们相信,艾滋病(AIDS)(AIDS)(AIDS)、乙型肝炎、恶性胶质瘤(恶性脑瘤)和胰腺癌等疾病有望成为RNA干扰剂的第一批受益者(2004年经FDA批准已开始RNA干扰剂的临床试验),艾滋病(AIDS)(AIDS)(AIDS)、中枢神经系统(Nervous System)(Nervous System)(Nervous System)退行性病变疾病如多发性硬化症、阿尔茨海默病、帕金森病(Parkinson’s disease)(Parkinson’s disease)(Parkinson’s disease)等将成为第二批受益者。
34 抗病毒治疗
由于RNAi 是机体中古老而天然的抗病毒机制,目前国外科技人员利用此特点,已设计出针对HIV gag、tat、rev、nef等基因的siRNA,针对丙型肝炎病毒非结构蛋白5B基因的siRNA,针对脊髓灰质炎(poliomyelitis)(poliomyelitis)(poliomyelitis)病毒衣壳蛋白和多聚酶基因的siRNA,针对 口蹄疫(foot and mouth disease)(foot and mouth disease)(foot and mouth disease)病毒3D片段siRNA等,均在试验中取得理想结果。陆续有关通过RNAi抑制其他病毒在细胞内复制的报道如呼吸道合胞病毒、人乳头瘤病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等,国内也已设计出针对 口蹄疫(foot and mouth disease)(foot and mouth disease)(foot and mouth disease)病毒VP1基因的siRNA,针对丙型肝炎病毒5′保守区的siRNA,针对 口蹄疫(foot and mouth disease)(foot and mouth disease)(foot and mouth disease)病毒IRES和L串联序列两侧的保守区的siRNA,针对SARS冠状病毒的6个siRNA,即RL001、R L002、RL003、RL004、RL005和RL006,均已取得理想结果。针对病原的siRNA已经进行到动物实验阶段,向病毒病的有效防治迈出了坚实的一步。由此可见,利用RNAi技术将使病毒病的有效治疗成为可能。
35 转基因研究
在动植物的转基因试验中, 经常发生基因沉默。因此, 对转基因沉默机制的探索可以为在转基因研究中避免基因沉默提供对策。在转基因植物(transgenic plant)(transgenic plant)(transgenic plant)研究中避免基因沉默可提高试验成功率,且节省时间,而在大型动物转基因研究中避免基因沉默可节约成本,提高产率。
36 干细胞研究
在干细胞研究方面,在dsRNA阻断大鼠骨髓源性神经干细胞 Hes5表达的试验中,观察外源性短dsRNA在转录后水平mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行了初步探讨。同时基于干细胞可能拥有自己的一套基因组,不同类型的干细胞又拥有各自所特有的基因,这些基因可能是决定干细胞特性的最关键的实质性因素。因此,RNAi技术在此领域应用空间广阔。
37 研究信号传导的新途径
Biotech认为,联合利用传统的缺失突变技术和RNAi技术可以很容易地确定复杂的信号传导途径中不同基因的上下游关系,Clemensy等应用RNAi研究了果蝇细胞系中胰岛素(insulin)(insulin)(insulin)信息传导途径,取得了与已知胰岛素(insulin)(insulin)(insulin)信息传导通路完全一致的结果。RNAi技术较传统的转染试验简单、快速、重复性好,克服了转染试验中重组蛋白特异性聚集和转染率不高的缺点,因此认为RNAi技术可能成为研究细胞信号传导通路的新途径。
38 常见病的治疗
Nature杂志报道了miRNA(Micro RNA)的应用上一个重要发现,成功采用miRNA调节了胰岛素(insulin)(insulin)(insulin)的分泌,这为糖尿病的治疗带来新的希望,也将为糖尿病的新药研究带来新的曙光和思路。据Sicence杂志报道,显示应用RNAi技术可有效降低血管内胆固醇含量,对治疗心血管疾病有明显的作用。
4 展望
综上所述,RNAi技术在基因功能研究、抗肿瘤治疗、抗病毒治疗、基因应用研究、常见病的治疗等许多方面都是强有力的工具和手段。同时做为新兴的生物技术,还有广阔的研究和应用空间期待着科研人员的探索。例如,siRNA在病毒持续性感染过程中扮演怎样的角色?siRNA在冬眠动物体内的作用如何?RNAi在雀斑形成中起到怎样的作用?如上述问题得到解决,将进一步依据其机理及特点,有望应用于病毒持续性感染的鉴别诊断及治疗,利用siRNA在冬眠动物体内的作用进行星际航行,以解决能量供应及时间跃迁问题,RNAi应用于祛除雀斑等。
尽管在RNAi方面的研究已取得许多突破性进展,尤其是哺乳动物(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)细胞中的研究的报道逐渐增多,但由于RNAi机制尚未完全阐明,仍有许多问题尚未得到彻底解答。例如,siRNA 在哺乳动物(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)细胞中抑制mRNA表达是有效的, 但达不到果蝇细胞那样的高抑制率, 可能是因为生物进化水平越高,调控基因表达系统的复杂程度相应的越高,多种抑制机制间相互作用的频率也越高,抑制作用受到的影响因素也就越多。另外, 在哺乳动物(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)中,RNAi能否成功地抑制基因表达以及抑制的程度还取决于细胞类型。对线虫来说,可以采用注射、浸泡或喂食的方法转入dsRNA,而对哺乳动物(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)(mammal;mammalian)来说,寻找高效的方式来转入siRNA以及快速的方式来筛选siRNA仍在进一步探索中。RNAi在抗病毒感染中的应用令人鼓舞, 但要取得最终的成功还有很漫长的路要走。其中一个关键的原因是siRNA并不能对所有病毒RNA发生作用,有些病毒靶序列可能隐藏在二级结构下, 或者位于高度折叠的区域中, 而有些病毒序列可能与蛋白质形成紧密的复合物, 阻碍了与siRNA 的识别。因此,不仅要选合适的靶序列,而且需要反复试验。另一个重要的原因是病毒子代的突变率较高, 这使病毒可逃避siRNA 的识别。为了克服这个障碍,所选病毒RNA的靶序列必须是高度保守的, 或者设计数对siRNA同时作用。
总之,RNAi作为一种新发展起来的分子生物学技术,不可避免地会存在潜在的问题,这就要求研究者在利用该技术时要考虑到生物安全性等诸多问题,以使RNAi技术更好地为人类服务。


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