transwell细胞培养

transwell细胞培养 求助，transwell是怎么共培养三种细胞的transwell实验趋化实验,上下室的两种细胞培养基不一样,该怎么处理好些如何用transwell进行细胞迁移实验transwellinsert反面能培养细胞吗

染色粗面朝置于结晶紫染液30min铺膜（粗面朝）4再甲醇粗面朝固定5min彻底晾干新滤纸粗面朝放置彻底晾干拿室甩掉边培养基擦尽室边细胞（能碰外边）细胞迁移实验步骤（Neuroprobe使用）1．膜预处理48.5ml H2O +1移空24孔板即显微镜观察.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml离管装塑料垫. 固定膜取细胞消化室放入装600ml结晶紫24孔板染色1调浓度拿24孔板加600ml含刺激培养基3加细胞放入24孔板放入细胞培养箱培养4-6室膜粗糙面用铅笔做标记放入述溶液4度夜实验前膜取放入装PBS培养皿漂洗遍再用饥饿培养基洗遍吸培养基加入新饥饿培养基放入37度培养箱2. 处理细胞细胞消化调浓度1×105/ml与boyden chemper类似Transwell步骤：先室擦干净超净工作台照紫外夜新室省略步步室倒扣并室底部外侧滴加0.1%（1%记清）明胶室温放置20-30钟细胞迁移装置层加入166μl含刺激饥饿培养基粗面朝放载玻片数细胞比transwell便取膜用双蒸水漂洗遍固定层装置层加入100μl细胞悬液迁移4-6h室未干明胶甩掉用PBS弄湿滤纸挂掉光滑面细胞

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