293细胞的形态特点

上皮细胞

致瘤性 +

产物或抗原 大T抗原

染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t（115） (q42q13），der⒆t（319） (q12q13），der⑿t（812） (q22p13），还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+）常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。 细胞名称 293 和 293T 种属 人 组织来源 　形态特点 上皮细胞 致瘤性 + 产物或抗原 大T抗原 染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t（115） (q42q13），der⒆t（319） (q12q13），der⑿t（812） (q22p13），还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+）常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。 生长特性 粘附 文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒（Ad 5） DNA的永生化细胞。[RF32725]

表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]

早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]

此细胞系人腺病毒滴度高。

室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。

表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793]

The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 （19q13.2）. 传代 293：弃培养基，含0.25% 胰酶，0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。

加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。

293T：生长快，通常倍增时间不到一天。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。 培养基更换 每2-3天一次 冻存液 95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%DMSO,5%；50%培养液，10%DMSO, 40%血清。 培养条件 ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清

37℃培养

293和HEK293是同一种细胞，它们的全称是Human Embryonic Kidney 293 cell 即人类胚胎肾细胞。

293还有一种衍生的293T细胞：

293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株，即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增，促进蛋白的表达。

293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产，还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产，如腺病毒及其他哺乳动物病毒。

许多真核表达载体如pcDNA3.1中含有SV40病毒的复制起始位点，可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制，从而提高外源基因的表达水平。293T细胞就是一种表达SV40病毒T抗原的细胞系，它来源于人胚胎肾细胞293HEK。

经改造后在其中插入了T抗原，因此用293T细胞做转染可以获得较高的表达水平。 293T细胞也可以作为普通的哺乳细胞用于筛选稳定表达的细胞系，不过它贴壁性差，容易脱落，不利于筛选。 3T3细胞是小鼠胚胎成纤维细胞系，它具有明显的接触抑制作用，所以易于识别已发生转化的细胞。

293细胞是人肾上皮细胞系，有多种衍生株，比如HEK293，293T/17等，来源都是人胚胎肾细胞，其极少表达细胞外配体所需的内生受体，且比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

293T细胞由293细胞通过基因技术派生出的细胞系，是经过腺病毒E1A基因的转染，能表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区。

扩展资料：

293T细胞的转染技术：

常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。

一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染，外源DNA既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体（episome）存在。

尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小，大约1/104转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。

参考资料来源：百度百科-T淋巴细胞

参考资料来源：百度百科-239细胞

参考资料来源：百度百科-转染

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