台盼蓝染液可以检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。台盼蓝,是一种有机化合物,化学式为C34H24N6Na4O14S4,常用作细胞活性染料。
台盼蓝,一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化,即可将活细胞和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。
台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝还常用来淬灭细胞表面的自荧光,或者其他荧光信号。
台盼蓝母液配置方法:
1、制备4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100mL,用滤纸过滤,4℃保存。使用时。用PBS稀释至0点4%。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0点4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%。
细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。
正常细胞具有完整的细胞膜结构,而死亡的细胞其细胞膜结构被破坏。台盼蓝无法通过正常的细胞膜因而正常的细胞不被台盼蓝染上,而死细胞则可被台盼蓝染成蓝色。
台盼蓝染色机理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色,通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且 *** 作非常简单。
以上内容参考:百度百科-台盼蓝拒染法、百度百科-台盼蓝
1.台盼蓝染色原理:细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,和解体的DNA结合,使其着色。
2.而活细胞能阻止台盼蓝进入细胞内。
3.台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。
4.活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
5.正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内。
6.而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
7.通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
8.因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
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